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Hieff NGS® DNA Selection Beads 分选磁珠 12601ES
物品单位 价格 品牌
296 Yeasen
  • 产地:China
  • 货号:12601ES03
  • 发布日期: 2020-03-23
  • 更新日期: 2021-12-02
产品详细说明
产地 China
品牌 Yeasen
货号 12601ES03
用途范围
纯度 %
CAS编号
规格 1 mL
是否进口


品信息

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

Hieff NGS® DNA Selection Beads DNA分选磁珠

12601ES03

1 mL

296.00

12601ES08

5 mL

986.00

12601ES56

60 mL

6286.00

12601ES75

450 mL

26186.00

产品描述

Hieff NGS® DNA Selection Beads基于SPRI (Solid Phase Reverse Immobilization)原理,配合精心优化过的缓冲体系,可用于二代测序文库构建过程中的DNA段分选、纯化。本产品可适用于各品牌的DNA、RNA建库试剂盒,和目前广泛使用的AMPure XP Beads使用方式相同,片段回收效率和文库大小分布均与AMPure XP Beads高度吻合。

运输与保存方法

冰袋运输。2-8℃保存,效期一年。避免冷冻!

注意事项

1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2)磁珠使用前须在室温平衡至少30 min。

3)80%乙醇需现用现配,否则将影响回收效率。

4)进行长度分选时,初始样品体积需≥100μL,不足时请用超纯水补齐。样品体积太小,将导致移液误差增大,进而影响分选的准确性。

5) 本产品仅用作科研用途!

使用方法

1. 准备工作

将磁珠由冰箱中取出,室温平衡至少30 min。配制80%乙醇。

2. 长度分选(双轮法)

长度分选操作流程如1所示,具体操作如下。


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1双轮分选操作流程

1)请涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证混匀。

2)根据要求,参考1DNA溶液中加入第一轮分选磁珠,涡旋混匀或移液器吹打10次混匀。

3)室温孵育5 min。

4)将离心管短暂离心并置于磁力架中,待溶液澄清后(约5 min),小心转移上清到干净的离心管中。

注意:转移上清时,请残留2 μL液体于管底,切勿全部吸出上清,避免吸到磁珠并影响分选效果。

举例:当初始体积为100 μL,第一轮使用0.8×比例,即加入80 μL磁珠,推荐吸出178 μL的上清。

5)参考1向上清中加入第二轮分选磁珠。

6)涡旋混匀或移液器吹打10次混匀,室温静置5 min。

7)将离心管短暂离心并置于磁力架中,待溶液澄清后(约5 min),小心移除上清。

8)保持离心管始终处于磁力架中,加入200 μL新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠,室温孵育30 s,小心移除上清。

9)重复步骤8。

10)保持离心管始终处于磁力架中,开盖干燥磁珠至刚刚出现龟裂(约5 min)。

注意:切记磁珠不要干燥时间太久,磁珠干燥过度将影响纯化效果。

11)将离心管从磁力架中取出,加入适量ddH2O(≥20 μL),涡旋振荡或使用移液器轻轻吹打充分混匀,室温孵育5 min。

12)将离心管短暂离心并置于磁力架中分离磁珠和液体。待溶液澄清后(约5 min),小心吸取上清至干净的管中,即完成分选。

3. DNA段分选参考条件

通过超声法将小牛胸腺DNA进行片段化,制备100-1000 bp的Smear片段,根据表1进行双轮分选。结果使用Agilent 2100 Bioanalyzer进行分析(2)。

1磁珠文库分选推荐比例

DNA段大小

250-350 bp

320-420 bp

450-550 bp

550-700 bp

700-900 bp

800-1000 bp

第一轮体积比(Beads:DNA)

0.80×

0.70×

0.60×

0.55×

0.50×

0.45×

第二轮体积比(Beads:DNA)

0.20×

0.20×

0.20×

0.15×

0.15×

0.15×

注:表中“×”表示样品DNA体积。如文库插入片段长度为250 bp,样品DNA体积为100mL,则第一轮分选磁珠使用体积为0.80×100 mL=80 mL;第二轮分选磁珠使用体积为0.20×100 mL=20 mL。


1637803289656409.png

2 Agilent 2100 high sensitivity DNA chip electopherogram

Smear fragments溶于ddH2O,使用0.80×/0.20×至0.45×/0.15×磁珠进行片段分选

HB211123