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mRNA Cap 2′-O-Methyltransferase mRNA Cap2甲基转移酶 10616ES
物品单位 价格 品牌
652 Yeasen
  • 产地:China
  • 货号:10616ES84
  • 发布日期: 2020-05-20
  • 更新日期: 2020-05-20
产品详细说明
产地 China
品牌 Yeasen
货号 10616ES84
用途范围 RNA合成
纯度 %
CAS编号
规格 2000 U
是否进口

mRNA Cap 2′-O-Methyltransferase  

mRNA Cap2甲基转移酶

产品信息

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

mRNA Cap 2′-O-Methyltransferase  mRNA Cap2甲基转移酶

10616ES84

2000 U

652.00

mRNA Cap 2′-O-Methyltransferase  mRNA Cap2甲基转移酶

10616ES92

10000 U

2852.00

mRNA Cap 2′-O-Methyltransferase  mRNA Cap2甲基转移酶

10616ES97

50000 U

12352.00

产品描述

mRNA Cap2甲基转移酶(mRNA Cap 2′-O-Methyltransferase)是一种来自于牛痘病毒的重组蛋白。该酶可以在RNA5′末端紧帽结构的第一个核苷酸的2′-O位置处添加一个甲基基团。该酶利用SAM作为甲基供体来甲基化加帽RNA,从而形成Cap1结构。Cap1结构增强mRNA的翻译效率,因此可有助于改善mRNA转染和显微注射实验中的表达该酶需要有m7GpppN7-甲基鸟苷帽结构的RNA作为底物。

产品性质

英文名(English Name

mRNA Cap 2′-O-Methyltransferase

来源(Source

重组E.coli

浓度(Concertation

50000 Units/mL

纯度(Purity

≥99%SDS-PAGE

比活(Specific Activity

≥1.6×105 U/mg

储存缓冲液(Storage Buffer

20 mM Tris-HCl pH8.00.1mM EDTA1mM DTT100mM NaCl50%v/v)甘油,0.1%v/vTrion X-100

活性单位定义(Unit Definition

一单位(U)定义为:在37℃条件下1h内甲基化10pmol80nt带帽RNA转录物所需的酶量。

 

运输和保存方法

冰袋运输。-20℃保存,有效期1年。推荐分装冻存,避免反复冻融。

使用方法

1、使用RNase-free 将适量 Capped RNA 稀释至16μl

2稀释的RNA 65℃条件下加热处理5min反应后冰上放置 5mi

3、按下表(1)配置反应体系(适用于10μg以内Capped RNA的甲基化反应);

437℃条件下孵育1h(对与目的片段长度小于200nt RNA可将孵育时间增加到2h

510×Capping Buffer的配置如下:500mM Tris-HClpH8.050mM KCl10mM MgCl210mM DTT

120μL反应体系配置

体系组分

20μlTotal

Denatured Capped RNA

16μl

10x Capping Reaction Buffer

2μl

SAM (4 mM)

1μl

mRNA Cap 2′-O-Methyltransferase (50 U/μl)

1μl

注意事项

1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2、用于实验反应的RNA在用之前应进行纯化处理并溶于RNase-free water且溶液中不能含任何的EDTA和盐离子;

3、反应之前推荐65℃加热5min以去除RNA的二级结构。如果转录产物的5′端结构复杂,可将时间延长至10min

4SAM试剂在pH 7–837°C条件下稳定性较差,需要现用现配。可预先计算好所需SAM的用量,在反应前将32 mM的储备液稀释成4 mM的工作液。为防止SAM降解,工作液应保存于冰上。

HB200516