Pembentukan model kolitis ulserativa natrium sulfat (DSS, kolitis)

Sejarah Perkembangan Pemodelan DSS

Pengembangan obat memerlukan model hewan untuk menguji kemanjurannya. Dengan lebih dari 50 tahun pengembangan dan pengoptimalan, model kolitis ulseratif (UC) Dextran Sulfate Sodium Salt (DSS), di antara berbagai model hewan, digunakan secara luas untuk mempelajari etiologi dan patogenesis penyakit radang usus (IBD).

Gambar 1. Pengembangan model DSS kolitis ulseratif

Ckarakteristik model UC dibangun oleh Sistem Penyiaran Digital (DSS)

Beberapa gejala akut atau kronis UC dapat disebabkan, seperti: diare, tinja seperti lendir, darah samar feses, tinja berdarah, penurunan berat badan, penurunan aktivitas, dan warna bulu yang buruk, dengan dosis DSS yang berbeda.

Tabel 1 Karakteristik histologis model kolitis DSS

Kategori model kolitis DSS

model kolitis akut

Model kolitis fase kronis

perubahan histologis

Hiperemia usus besar, edema, pemendekan, kerapuhan, peningkatan rasio berat terhadap panjang

usus besar yang dipersingkat secara signifikan

Ulkus usus besar dengan derajat yang bervariasi

Penebalan mukosa, limfadenopati

Edema mukosa, hilangnya sel goblet, pembengkakan dan kerusakan kripta

hilangnya sel goblet, hilangnya kripta

Tingkat infiltrasi sel inflamasi yang berbeda pada mukosa dan submukosa, kerusakan sel epitel

Polip adenomatosa dan perubahan mirip tumor pada sejumlah kecil hewan

Keunggulan Model DSS UC

  1. Protokol mudah diimplementasikan.
  2. Model DSS UC sangat menyerupai gejala UC manusia dengan pengulangan yang tinggi.
  3. Berbagai gejala khas dapat ditimbulkan melalui pengendalian dosis DSS yang diberikan, yang unik untuk model DSS UC.
  4. Model DSS UC dapat dibuat dengan berbagai model hewan yang banyak digunakan, seperti tikus, mencit, ikan zebra, babi, lalat buah, dan lain-lain.
  5. Model kanker terkait kolitis (CAC) yang diinduksi IBD dapat dibuat dengan penggunaan gabungan azoxymethane (AOM).

Contoh konstruksi model DSS UC

  1. Tikus model(Klik untuk detailnya)

1) Tikus BALB/c, betina, 6-8 minggu, 25 g;

2) Air minum steril dengan 3% DSS, dan filter dengan membran 0,22 μm;

3) DSS diberikan selama 7 hari;

4) Peradangan, seperti usus besar edema dan kongesti, diamati setelah pewarnaan HE.

Gambar 2 Hasil pewarnaan HE pada potongan kolitis akut DSS [1]

  1. Model ikan zebra(Klik untuk detailnya)
1）Embrio ikan zebra diperoleh dari pemijahan alami dan dibesarkan hingga 1 hari pasca pembuahan (dpf) dalam inkubator pada suhu 28.5℃ dalam air yang bersirkulasi (60 μg/mL garam laut instan) dan ditambah dengan metilen biru hingga 1 dpf；
2）Setelah 1 dpf, gunakan media kultur embrio E3 tanpa metilen biru untuk mengkultur hingga 3 dpf；
3）Siapkan larutan penyimpanan DSS 10% dengan media E3；
4) Encerkan DSS dengan media kultur hingga dosis maksimum yang tidak mematikan (referensi konsentrasi DSS: 0,5%);
5)Ikan zebra diperlakukan dengan 0,5% DSS dari 3 dpf hingga 6 dpf, dan indeksnya adalah.

Gambar 3. DSS menginduksi respon inflamasi pada hati ikan zebra [2]

3.Model babi(Klik untuk detailnya)

1) Anak babi Yorkshire pada usia 4-5 hari;

2) Dosis DSS: 1,25 g/kg, asupan oral selama 5 hari;

3) Peningkatan laju penyerapan D-manitol diamati.

Gambar 4. Konsentrasi D-manitol yang diinduksi DSS pada anak babi lebih tinggi dibandingkan dengan kelompok kontrol. [3]

4.Model lalat buah(Klik untuk detailnya)

1) Lalat buah, betina, 5-10 hari;

2) Pemberian Makanan sedang disiapkan dengan larutan sukrosa 5% yang mengandung 3% DSS dan 25 μg/mL bleomisin;

3) Drosophila dikultur pada suhu 29°C selama tiga hari dengan penggantian botol kultur setiap hari;

4) DSS menginduksi proliferasi sel prekursor ISC dan memiliki efek mematikan pada drosophila.

Gambar 5. DSS menginduksi proliferasi sel prekursor ISC di Drosophila [4] .

5.Ckanker terkait olitis（Klik untuk detailnya)

1) Tikus BALB/c, jantan, umur 7 minggu;
2）Pada hari ke-1, timbang dan tandai tikus. Suntikkan tikus secara intraperitoneal dengan larutan AOM 10 mg/kg.
3) Isi persediaan air minum kandang tikus. Takaran air 7-10 ml per tikus per hari. Pemberian pakan selama satu minggu.
4) Ganti air minum dengan DSS 2,5% selama satu minggu;
5) Beri makan dengan air minum biasa selama dua minggu;
6) Ulangi langkah 3-4 sebanyak 3 kali.

    Gambar 6 Diagram skematik CAC disebabkan oleh AOM/DSS [5[Bahasa Indonesia] .

    Kriteria evaluasi model

    1. Indeks Aktivitas Penyakit ( skor DAI)

    Model tersebut dievaluasi dengan beberapa parameter termasuk berat badan, kekentalan feses, dan darah samar, yang menghasilkan DAI keseluruhan.

    Tabel 2 Aturan penilaian DAI

    skor

    persen penurunan berat badan

    konsistensi tinja

    darah tinja yang samar

    angka 0

    angka 0

    normal

    Negatif

    1

    1-5%

    bangku empuk

    biru muda

    2

    5-10%

    tinja berlendir

    biru

    3

    10-20%

    bangku longgar

    biru tua

    4

    >20%

    Bahasa Indonesia:

    tinja berdarah yang menjijikkan
    1. Skor Perubahan Histologis

    Skor diberikan untuk indikator di atas berdasarkan perubahan histologis yang tidak termasuk pembentukan kelenjar getah bening untuk model kolitis akut. Reagen pewarnaan HE yang digunakan adalah Cat#60524ES60.

    Tabel 3 Skor perubahan histologis

    skor

    Bisul

    Perubahan epitel

    infiltrat inflamasi

    kelenjar getah bening

    angka 0

    angka 0

    normal

    tidak ada

    tidak ada

    1

    1

    hilangnya sel goblet

    Infiltrasi Pericrypt

    1

    2

    2

    hilangnya sel goblet

    Infiltrasi muskularis mukosa

    2

    3

    3

    penghapusan kripto

    Infiltrasi umum pada muskularis mukosa, penebalan mukosa

    3

    4

    >3

    Kehilangan kripta yang luas atau regenerasi polipoid

    invasi submukosa

    >3
    1. Usus besar panjang
    Panjang usus besar yang memendek merupakan fenotipe yang jelas untuk model kolitis kronis, sementara perubahan serupa dapat dideteksi pada hari ke-8 untuk model kolitis akut.
      4.Ringkasan

      Percobaan pendahuluan direkomendasikan untuk menggunakan model hewan DSS UC dengan kontrol yang tepat. 8-10 hewan per kelompok merupakan persyaratan minimal.

      Tautan ke sumber daya ini

      [1]Xiaona Gao, dkk. Jurnal Biokimia Nutrisi 83 (2020) 108438.
      [2]Jing Ma,et al.Akuakultur dan Perikanan (2021) 548–557.
      [3]Connie J. Kim, dkk. Jurnal Biokimia Nutrisi 21 (2010) 468–475.
      [4]Fangfang Ren, dkk.PNAS.2010.107 (49) 21064-21069.
      [5]Jia-Rong Huang, dkk. Perbatasan dalam Farmakologi. 2020.11: 586885.

        Kasus sukses untuk pemodelan dengan Yeasen Sistem Penyiaran Digital (DSS)

        Model kolitis akut yang berhasil dihasilkan dengan Yeasen DSS (Cat#60316ES, MW: 36000~50000) dalam 7 hari dengan fenotipe menonjol seperti yang ditunjukkan pada tabel berikut.

        Tabel 4 Konstruksi berbagai jenis model enteritis dengan DSS

        Model

        Sampel pemodelan

        Rencana pemodelan

        Hasil pemodelan

        Gunakan evaluasi

        kolitis akut

        Tikus BALB/c, betina, 6-8 minggu, 25 g

        3% -5% DSS minum bebas selama 7 hari berturut-turut

        Hari ke 5 muncul, panjang usus besar memendek, pewarnaan HE, dan peradangan terlihat jelas

        Kecepatan cetak cepat dan waktu singkat. Sesuai dengan karakteristik model kolitis akut

        Tikus C57BL/6, jantan, 8 minggu, 20 g

        3%-5% DSS melalui gavage, pemberian terus menerus

        Hari ke 5 terjadi, usus besar memendek, berat badan turun, darah dalam tinja, diare

        Tingkat jamur tinggi dan durasi pendek. Sesuai dengan karakteristik model kolitis akut

        kolitis kronis

        Tikus C57BL/6, jantan, 8 minggu, 22 g

        1-2% DSS melalui gavage, pemberian terus menerus

        Munculnya Day40, pemendekan usus besar, penurunan berat badan, darah dalam tinja, diare

        Tingkat pembentukan yang tinggi. Sesuai dengan karakteristik model kolitis kronis

        kanker usus besar

        Tikus C57BL/6, jantan, 8 minggu, 21 g

        1% -2% DSS ad libitum selama 5 hari selama 3 minggu

        14 minggu dengan panjang usus besar yang lebih pendek, penurunan berat badan, pewarnaan HE, dan peradangan yang jelas

        Tingkat pembentukan yang tinggi. Sesuai dengan karakteristik model kanker usus besar

        FPertanyaan yang Sering Diajukan (AQ)

        Terlepas dari model kolitis DSS akut atau model kolitis DSS kronis, tingkat keparahan dan keberhasilan enteritis terkait dengan spesies tikus (latar belakang genetik yang berbeda), konsentrasi DSS, dan siklus dosis.

        Tabel 5 Masalah umum pemodelan kolitis DSS

        kemungkinan masalah

        kemungkinan alasan

        Solusi yang disarankan

        angka kematian tinggi pada tikus

        Konsentrasi DSS terlalu tinggi

        Kurangi konsentrasi DSS yang diberikan

        Tikus dengan gejala enteritis yang rendah atau tidak ada gejala sama sekali

        Konsentrasi DSS terlalu rendah

        Meningkatkan konsentrasi dosis DSS; mengurangi interval siklus (10-14 hari)

        Pada kelompok tikus yang sama, gejala enteritis sangat bervariasi

        tutup botol tersumbat

        Periksa botol minum tikus setiap hari

        Ppesanan produk

        Produk terlaris hanya butuh 1/3 dari harga M* dengan efisiensi yang sama, dan kami menyimpan stok dalam jumlah besar.

        Pproduk Nsaya

        AArtikel Nbanyak

        Spesifikasi

        ColitCare™ Dextran Sulfate Sodium Salt (DSS), Kelas Kolitis MW:36000~50000

        60316ES25/60/76/80

        25 gram/100 gram/500 gram/1 kg

        Azoksimetana (AOM)

        60751ES03/08/10

        1mg/5mg/10mg

        Mol Murni® Kit DNA Tinja

        Nomor telepon 18820ES08/50/70

        5T/50 T/200 T

        Mol Murni® Kit DNA Tanah/Kotoran Mag48 FA

        18528ES48

        48 jam

        Mol Murni®Kit DNA Mag Soil/Stool

        18526ES20/50/70

        20 T/50 T/200 T

        Kit Pewarnaan Hematoksilin dan Eosin

        60524ES60

        2×100ml

        Kit Uji Darah Samar Urine dan Tinja

        60403ES60

        100T

        Larutan Pewarna Asam Periodik Biru Alcian-Schiff (AB-PAS)

        60534ES50/60

        6×50ml/6×100ml/

        Partikel yang diterbitkan dengan reagen kami

        Tahun 2024

        [1] Zhong D, Jin K, Wang R, ,et al. Hidrogel Berbasis Mikroalga untuk Penyakit Radang Usus dan Kecemasan serta Depresi yang Terkait dengannya. Adv Mater. 26 Januari 2024:e2312275. doi: 10.1002/adma.202312275. IF=29.4

        [2] Zhang Y, Tu S, Ji X, Wu J, Meng J, Gao J, Shao X, Shi S, Wang G, Qiu J, Zhang Z, Hua C, Zhang Z, Chen S, Zhang L, Zhu SJ. Dubosiella newyorkensis memodulasi toleransi imun pada kolitis melalui jalur AhR-IDO1-Kyn yang diaktifkan oleh L-lisin. Nat Commun. 2024 Feb 13;15(1):1333. doi: 10.1038/s41467-024-45636-x.IF= 16.6

        [3] Zhang XuanBahasa Indonesia: Xia GaoBahasa Indonesia: Xiangzhou Yi,et al. Nanopartikel berbasis inulin multi-target dengan cannabidiol untuk pencegahan kolitis ulseratif yang efektif[J]. Materials Today Bio.2024, 25100965. IF=8.2

        Tahun 2022

        [1] Mengmeng Xu, Ying Kong, Nannan Chen, dkk. Identifikasi Tanda Gen Terkait Imun dan Prediksi Jaringan CeRNA pada Kolitis Ulseratif Aktif [J]. Frontiers in Immunology. 2022; 13: 855645.JIKA=7.561

        [2] Lujuan Xing, Lijuan Fu, Songmin Cao,et al.Efek Anti-Inflamasi Peptida Berasal dari Gelatin Tulang Sapi pada RA yang Diinduksi LPSW264.7 Sel Makrofag dan Tikus C57BL/6 yang Diinduksi Dekstran Sulfat Natrium[J]. Nutrisi 2022, 14, 1479. JIKA=5.717

        [3] Wang S,  Huang J., ahli bedah plastik  Tan KS, dkk. Isosteviol Sodium Memperbaiki Kolitis Kronis yang Diinduksi Dekstran Natrium Sulfat melalui Pengaturan Profil Metabolik, Polarisasi Makrofag, dan Jalur NF-B[J]. Kedokteran Oksidatif dan Umur Panjang Seluler. 2022,4636618.JIKA=5.076

        [4] YuangengLi, PingYu, WenwenFu, et al. Polisakarida dari Panax ginseng CA Meyer meringankan IBD yang diinduksi DSS dengan menghambat jalur pensinyalan inflammasome JAK2/STAT1/NLPR3 pada tikus[J]. Jurnal Makanan Fungsional. 2022, 105013.JIKA=4.451

        [5] Lei-NingChen, TaoJing, Zi-BinLin, et al. Respon metabolomik dan transkriptomik testis tikus terhadap kolitis yang diinduksi natrium dekstran sulfat [J]. Toksikologi Reproduksi. 2022, Halaman 35-42.JIKA=3,143

        Tahun 2021

        [1] Li Zhao, Fei Wang, Zhengwei Cai, et al. Meningkatkan platform pemanfaatan obat dengan hidrogel mukoadhesif suntik untuk mengobati kolitis ulserativa [J]. Jurnal teknik kimia. 424 (2021) 130464.JIKA=16.744

        [2] Lingjun Tong, Haining Hao, Zhe Zhang, dkk. Vesikel ekstraseluler yang berasal dari susu meringankan kolitis ulserativa dengan mengatur kekebalan usus dan membentuk kembali mikrobiota usus [J]. Theranostics.2021; 11(17): 8570-8586 JIKA=11.556

        [3] Jingjing Gan, Yuxiao Liu, Lingyu Sun,et al.Partikel pengiriman nukleotida yang diberikan secara oral dari mikrofluida untuk pengobatan penyakit radang usus[J].Applied Materials Today.2021 Desember;25:101231 JIKA=10,041

        [4] JialiDong, YuanLi, HuiwenXiao, et al. Mikrobiota oral mempengaruhi kemanjuran dan prognosis radioterapi untuk kanker kolorektal pada model tikus [J]. Laporan sel. 2021, 109886.JIKA=9.423

        [5] Hao H,  Zhang X,  Tong L,  Liu Q,et al.Lactobacillus plantarumEfek Vesikel Ekstraseluler yang Berasal dari Q7 tentang Mikrobiota Usus dan Kolitis Ulseratif pada Tikus[J].Frontiers in Immunology.2021.777147 .JIKA=7.561

        [6] Yaohua Fan, Yanqun Fan, Kunfeng Liu, dkk. Sarang Burung Walet Memperbaiki Kolitis Ulseratif yang Diinduksi Dekstran Sulfat Natrium pada Tikus C57BL/6J dengan Mengembalikan Keseimbangan Sel Th17/Treg[J]. Frontiers in Pharmacology. 2021.632602.JIKA=7.561

        Tahun 2020

        [1] Li, Y., Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., dan Wang, B., Cui, M., & Fan, S. Asam valerat yang berasal dari usus melindungi dari cedera akibat radiasi. Mikroba Usus, .2020 .1–18.JIKA=10.245

        [2] Jia-Rong Huang, Sheng-Te Wang, Meng-Ning Wei, dkk. Piperlongumine Meredakan Kolitis Tikus dan Kanker Kolorektal Terkait Kolitis [J]. Frontiers in Pharmacology. 2020.586885.JIKA=7.561

        [3] Gao X, Fan W, Tan L, dkk. Isoflavon kedelai memperbaiki kolitis eksperimental dengan menargetkan jalur inflammasom ERα/NLRP3[J]. Jurnal Biokimia Nutrisi, 2020, 83.JIKA=6.048

        Pertanyaan