Makrofag memainkan peran unik dan penting di berbagai bagian tubuh, namun, penghilangan makrofag yang tepat telah menjadi alat penelitian utama untuk mempelajari lebih baik fungsi spesifik makrofag di area tertentu dan dampaknya terhadap perkembangan penyakit. Liposom Clodronate adalah salah satu alat yang paling terbukti, hemat biaya, dan ideal untuk penghilangan makrofag. Liposom Clodronate dapat diberikan secara intraperitoneal, di vena ekor, dan dengan berbagai cara lain untuk menghilangkan makrofag dari berbagai jaringan.

Berikut ini kami akan berbagi serangkaian topik untuk menunjukkan metode dan efektivitas penghilangan makrofag di berbagai tempat, dengan harapan dapat memberikan rujukan dan referensi yang bermanfaat bagi para peneliti.

Pengenalan metode injeksi

Injeksi vena ekor

Penyuntikan pada vena ekor mencapai deplesi maksimum setelah 24 jam. Perhatian harus diberikan pada titik waktu deteksi.

1、Tempatkan tikus dalam kotak makan siang terbalik, tarik ekornya dari lubang, ada dua arteri dan tiga urat di ekor tikus, dua arteri berada di sisi dorsal dan ventral ekor, dan tiga vena didistribusikan dalam pola zig-zag, umumnya sisi kiri dan kanan vena digunakan;

2. Rendam kain kasa dalam air hangat sekitar 70℃ (atau rendam dalam alkohol), keluarkan dan bungkus ekor, untuk mencapai tujuan vasodilatasi ekor dan melembutkan keratin epidermis;

3. Untuk penyuntikan intravena ekor, gunakan ibu jari dan telunjuk kiri sebelum dan sesudah memegang ekor tikus, sisakan bagian sekitar 2 cm, sehingga kulitnya tegang, pembuluh darahnya lebih penuh, tangan kanan memegang spuit jarum 1 mL, sehingga jarum dan pembuluh darahnya sejajar (sudut kurang dari 30°), dari 1/4 bagian bawah ekor ke dalam jarum, awal penyuntikan obat harus lambat, pengamatan cermat, jika tidak ada resistensi, tidak muncul dermatom putih, berarti pembuluh darah telah tertusuk dan dapat dilakukan penyuntikan obat secara formal.

4. Beberapa percobaan memerlukan penyuntikan vena ekor berulang selama beberapa hari, lokasi penyuntikan harus dimulai dari ujung ekor sejauh mungkin, dan bergerak ke pangkal ekor secara berurutan, dan mengubah posisi vaskular untuk penyuntikan. Setelah mencabut jarum, tekan lokasi penyuntikan dengan bola kapas selama 1 menit. - 2 menit untuk menghentikan pendarahan.

Injeksi intraperitoneal

Injeksi intraperitoneal mencapai deplesi maksimum setelah 48 jam - 72 jam. Perhatian harus diberikan untuk mendeteksi titik waktu.

1. Pertama-tama, gunakan metode dorsal bailing untuk menangkap tikus, sehingga kepala mereka sedikit miring ke belakang dan perut mereka menghadap ke atas, tungkai belakang kiri tikus difiksasi dengan jari kelingking, dan kemudian tempat suntikan disterilkan dengan bola kapas alkohol 75%.

2. Lokasi injeksi intraperitoneal pada tikus adalah 0,5 cm pada kedua sisi garis tengah perut bagian bawah (rata dengan pangkal paha). Untuk menghindari cedera pada organ, kepala tikus harus dimiringkan ke belakang saat membuang kotoran tikus, sehingga organ perut bagian bawah bergerak ke atas.

3. Tusuk jarum suntik ke dalam kulit, masukkan ke area subkutan, dorong jarum ke depan sepanjang area subkutan selama 2 menit. - 3 mm, lalu tusukkan ke rongga perut tikus pada sudut 45 derajat antara jarum dan kulit. Catatan: Setelah menembus peritoneum, resistansi ujung jarum menghilang.

4.Tarik kembali sumbat jarum, jika tidak ada darah atau cairan yang kembali, obat dapat disuntikkan.

5. Setelah penyuntikan, putar jarum secara perlahan, kemudian tarik spuit secara perlahan untuk menghindari kebocoran cairan.

Metode penyuntikan juga akan berbeda-beda untuk lokasi penelitian yang berbeda, seperti: penyuntikan subkutan, penyuntikan trakea, penyuntikan intrakranial, dan sebagainya. Anda harus merujuk pada literatur yang relevan dan berkonsultasi dengan Yeasen tim teknis sebelum eksperimen.

Siklus dosis dan dosis

Pemberian jangka pendek: suntikan tunggal liposom klorofosfat 200 µL (20 - Berat (25 g) pada waktu tertentu untuk mendeteksi efisiensi pembersihan makrofag atau untuk eksperimen hilir.

Pemberian jangka panjang: diperlukan waktu lebih dari satu minggu atau lebih untuk mencapai pembersihan makrofag. Pada tikus WT, misalnya, 200 µL (20 - Berat 25 g) biasanya diberikan sebagai dosis pertama, diikuti dengan 200 µL setiap 2 - 3 hari.

Protokol uji referensi

Organ/Makrofag

Dosis (20-25g/tikus)

Limpa/makrofag pulpa merah

Dosis tunggal: 200 µL/tikus (IV atau IP).
Deplesi jangka panjang: dosis pertama 200 µL/tikus, kemudian 200 µL/tikus dengan interval 2 - 3 hari

Sel hati/Kuffer

Dosis tunggal: 200 µL/tikus (IV atau IP).
Deplesi jangka panjang: dosis pertama 200 µL/tikus, kemudian 200 µL/tikus dengan interval 2 - 3 hari

Makrofag paru-paru/alveolar

IV (150-200 µL) dikombinasikan dengan intratrakeal atau intranasal (50 µL) memberikan hasil terbaik.

kelenjar getah bening

Suntikan (100-200 µL)/tikus, regimen dosis spesifik dapat ditemukan dalam literatur.

Otak/mikroglia

Masuknya intraserebroventrikular ke dalam cairan serebrospinal, 10 µL/tikus, 50 µL/tikus besar.

Darah/Monosit

150-200 µL/tikus (IV), Laju penipisan maksimum dicapai dalam waktu 24 jam, tetapi laju penipisan maksimum pada 1 - 7 hari bergantung pada strain.

Catatan: Di atas hanya untuk referensi, silakan merujuk ke literatur yang relevan dan berkonsultasi dengan Yeasen tim teknis sebelum percobaan.

Rekomendasi Produk

Nama Produk

Nomor barang

Spesifikasi

Liposom Clodronate (Dari Vrije Universiteit Amsterdam)

40337ES08

5 ml air

40337ES10

10 ml air

Liposom Kontrol (PBS)

40338ES08

5 ml air

40338ES10

10 ml air

Pertanyaan