Dalam beberapa tahun terakhir, dengan pesatnya perkembangan teknik biologi molekuler, Metode diagnostik berbasis asam nukleat telah banyak digunakan dan diaplikasikan dalam pengujian laboratorium penyakit manusia. Dibandingkan dengan teknik amplifikasi asam nukleat lainnya, amplifikasi isotermal menawarkan keuntungan karena cepat, efisien, dan spesifik, serta tidak memerlukan peralatan khusus. Oleh karena itu, sejak kemunculannya, metode ini telah dianggap oleh banyak ilmuwan sebagai metode deteksi yang berpotensi menyaingi PCR.

Hasilnya, diyakini bahwa pengembangan dan penerapan instrumen dan kit diagnostik berdasarkan teknologi amplifikasi isotermal akan mewakili arah baru untuk Pengujian Titik Perawatan (POCT) dalam diagnostik molekuler.

Pengantar Prinsip-prinsip Teknologi Amplifikasi Isotermal Arus Utama

1、Amplifikasi Isotermal yang Dimediasi Loop

Teknologi (LAMP)

Prinsip:Amplifikasi isotermal yang dimediasi loop (LAMP) menggunakan DNA polimerase Bst, yang memiliki aktivitas perpindahan untai. Ia merancang empat jenis primer spesifik yang menargetkan enam wilayah gen target, yang memungkinkan amplifikasi urutan target yang efisien, cepat, dan spesifik dalam kondisi isotermal. Amplifikasi dapat dilakukan pada suhu konstan 60-65°C, dan dalam waktu 15-60 menit, amplifikasi asam nukleat sebesar 10⁹ sampai 10¹⁰ waktu dapat tercapai.

Keuntungan dan Aplikasi:Karena reaksinya cepat, spesifisitasnya tinggi, peralatannya sederhana dan mudah dioperasikan, serta hasilnya mudah diinterpretasikan, amplifikasi isotermal telah diterapkan dalam deteksi bakteri patogen, parasit, virus, penyakit, dan produk rekayasa genetika. Metode ini juga diharapkan dapat digunakan secara luas dalam diagnosis penyakit menular klinis, pemantauan lingkungan, keamanan pangan, dan bidang lainnya. Metode ini telah menjadi metode ideal yang cocok untuk Pengujian Molekuler Point-of-Care (POCT) platform.

Klasifikasi:Metode deteksi LAMP diklasifikasikan menjadi beberapa jenis, termasuk turbidimetri, metode indikator pH, metode pewarna fluoresensi (seperti NHB, calcein, SYBR Green, Syto, dll.), dan metode probe fluoresensi.

2、Teknologi Amplifikasi Polimerase Rekombinase (RPA)

Prinsip:Enzim rekombinase, ketika terikat pada primer, membentuk kompleks protein-DNA yang dapat mencari urutan homolog dalam DNA untai ganda. Setelah primer menemukan urutan homolog, reaksi pertukaran untai terjadi, yang mengarah pada pembentukan dan inisiasi sintesis DNA, yang secara eksponensial memperkuat daerah target pada cetakan. Untai DNA yang dipindahkan mengikat protein pengikat untai tunggal (SSB) untuk mencegah perpindahan lebih lanjut. Dalam sistem ini, peristiwa sintesis dimulai oleh dua primer yang berlawanan, terutama bergantung pada aktivitas rekombinase, enzim Bsu, dan protein SSB. Teknologi ini dapat mencapai deteksi cepat target yang diinginkan dalam waktu 10-30 menit pada suhu berkisar antara 37 hingga 42°C.

Keuntungan dan Aplikasi:RPA membanggakan sensitivitas tinggi, spesifisitas kuat, ketergantungan rendah pada peralatan khusus, dan kemampuan untuk mengintegrasikan berbagai format deteksi. RPA sangat cocok untuk pengujian point-of-care di tingkat akar rumput dan di lapangan. RPA dapat diterapkan secara luas dalam diagnostik in vitro, penyakit hewan, keamanan pangan, biosafety, pertanian, dan bidang lainnya.

Klasifikasi:Metode deteksi RPA dikategorikan ke dalam beberapa jenis, termasuk elektroforesis gel, metode pemeriksaan EXO, metode pemeriksaan Fpg, dipstick aliran lateral (LF-RPA), dan analisis flokulasi, antara lain.

Pameran Kinerja Produk

Reagen Pewarna Sensitif pH 01 RT-LAMP

Pewarna Sensitif pH RT-LAMP menggunakan pewarna visual sebagai indikator sensitif, dalam kondisi isotermal 60-65℃, untuk menyelesaikan amplifikasi asam nukleat RNA satu langkah menggunakan penangas air bersuhu konstan atau mesin PCR standar. Hanya dalam 30 menit, perubahan warna setelah reaksi dapat digunakan untuk menentukan apakah ada infeksi patogen, dengan hasil yang lebih intuitif (positif berwarna oranye-kuning, negatif berwarna magenta). Metode ini cocok untuk pengujian cepat populasi besar.

Produk yang Direkomendasikan：

Kit Pewarna Sensitif pH RT-LAMP (13906ES)
RT-LAMP Pewarna Sensitif pH Versi Kromogenik Kit yang Dapat Dikeringkan Beku (13920ES)

Pertunjukan Pertunjukan：

1.Panduan Pemilihan Campuran RT-LAMP/RPA

Klasifikasi Produk	Campuran RT-LAMP			Campuran RPA
Nama Produk	Kit Uji Pewarna RT-LAMP (UDG plus)	Kit Pewarna Sensitif pH RT-LAMP	Kit Pewarna Sensitif pH RT-LAMP Versi Kromogenik yang Dapat Dikeringkan Beku	Penguat Sekering Cepat
Nomor Barang Produk	13762ES	13906ES	13920ES	16702ES
Kategori Produk	Pewarna Fluoresens	Pewarna Sensitif pH	Pewarna Sensitif pH	Menguji
Komponen Produk	2 komponen Penyangga, Campuran enzim	3 komponen Penyangga, Enzim RT, Enzim Bst	4 komponen Penyangga, Enzim RT, Enzim Bst, Lioprotektan	4 komponen Penyangga, Campuran enzim, Magnesium Asetat
Dukungan Pengeringan Beku	TIDAK	Ya, tanpa Lyoprotectant	Ya, Mengandung Lyoprotectant	TIDAK

2.Panduan Pemilihan Enzim LAMP/RT-LAMP

Klasifikasi Produk	Enzim Bst		Transkriptase Terbalik		Enzim UDG
Nama Produk	Bst Plus	Bst Plus yang diliofilisasi	Ⅲ Transkriptase Terbalik	III Transkriptase Balik, Bebas gliserol	UDG	UDG, Bebas Gliserol
Nomor Barang Produk	14402ES	14405ES	11111ES	11297ES	14455ES	14001ES
Aktivitas enzim	40 U/μL	60 U/L	200 U/μL	600 U/μL	1 unit/μL	1 unit/μL
Komponen Produk	3 komponen	2 komponen	2 komponen	komponen tunggal	lajang- komponen	komponen tunggal
Dukungan Pengeringan Beku	TIDAK	Ya	TIDAK	Ya	TIDAK	Ya

3、Panduan Pemilihan Enzim RPA

Klasifikasi Produk	Bahasa Inggris BSU	T4 X	T4 Y	SSB	CK	EXO
Nama Produk	Bahasa Inggris BSU	T4 UvsX	T4 UVS	gp32	Kreatin Kinase	Eksonuklease III
Nomor Barang Produk	11078ES	11079ES	11080ES	11081ES	14502ES	14525ES
Aktivitas enzim	5 U/μL	2 mg/L	2 mg/L	5 mg/μL	2 mg/L	100 U/μL
Komponen Produk	komponen tunggal	komponen tunggal	komponen tunggal	komponen tunggal	komponen tunggal	2 komponen
Dukungan Pengeringan Beku	TIDAK	TIDAK	TIDAK	TIDAK	TIDAK	TIDAK