1.Latar Belakang Pendahuluan

Streptavidin adalah protein pengikat biotin yang berasal dari Streptomyces avidinii. Pengikatan non-spesifiknya jauh lebih rendah daripada avidin, dan dibandingkan dengan avidin putih telur, yang memiliki muatan positif bersih pada pH netral dan mengandung sekitar 7% karbohidrat, streptavidin memiliki sifat kimia yang lebih baik seperti hampir tidak ada muatan bersih pada pH netral dan tidak ada karbohidrat. Oleh karena itu, streptavidin banyak digunakan sebagai alternatif avidin.

2. Fitur Produk

Struktur tetramer:Streptavidin ada sebagai homotetramer dengan ukuran 66KDa;

Afinitas tinggi:Setiap molekul streptavidin dapat mengikat secara spesifik empat molekul biotin, dengan afinitas yang sangat kuat di antara keduanya;

Aplikasi yang Luas: Konstanta disosiasi kompleks streptavidin-biotin berada dalam kisaran nanomolar, suatu sifat yang umum digunakan dalam aplikasi biologi molekuler; Dalam sebagian besar aplikasi, ia dapat digunakan secara bergantian dengan protein antibodi;

Ekstraksi Berkualitas Tinggi:Diperoleh dengan pemurnian dari Bakteri Streptomyces avidiniiBahasa Indonesia:

Gambar 1. Streptavidin

Produk Aplikasi

Aplikasi 1: Resin murni dengan streptavidin

1) Prinsip aplikasi

Berdasarkan interaksi antara streptavidin dan biotin, streptavidin sangat terikat silang dengan 6% agarosa, dan proses persiapan yang unik memberinya sifat fisikokimia yang lebih tinggi, yang memungkinkannya menahan tekanan yang lebih tinggi. Ia dapat mencapai pemurnian protein target pada laju aliran yang relatif tinggi, sehingga lebih cocok untuk pemurnian protein industri berskala besar.

Gambar 2. Prinsip pemurnian resin streptavidin

2)Yeasen berkomitmen untuk menyediakan produk efisiensi tinggi untuk memurnikan protein yang lebih sempurna bagi Anda.

Gambar 3. Protein yang dimurnikan dengan resin streptavidin

3)Pertanyaan yang Sering Diajukan

Pertanyaan

Kemungkinan alasan

Solusi yang disarankan

Tekanan balik kolom terlalu tinggi

Pengepakan diblokir

Bersihkan resin.

Buffer lisis mengandung partikel padat kecil, disarankan untuk menyaring dengan membran filter 0,22μm atau 0,45μm sebelum memuat, atau sentrifus untuk menghilangkannya.

Sampelnya terlalu kental.

Sampel mengandung konsentrasi asam nukleat yang tinggi, perpanjang waktu lisis hingga viskositas berkurang, atau tambahkan DNase I (konsentrasi akhir 5 μg/ml), Mg2+ (konsentrasi akhir 1 mM), inkubasi di atas es selama 10-15 menit

Buffer terlalu kental

Reagen organik atau reagen penstabil protein (seperti gliserol, dll.) dapat menyebabkan peningkatan tekanan balik, mengurangi laju aliran operasi.

Protein tanpa tujuan dalam komponen elusi

Pembelahan yang berlebihan akan mengubah sifat protein yang diinginkan

Gunakan kondisi lisis ringan. kondisi percobaan didasarkan pada pengalaman.

Protein target beragregat untuk menghasilkan presipitasi

Tambahkan DTT ke larutan pra-lisis sel pada konsentrasi akhir 1-10 mM.

Protein target tidak sepenuhnya terelusi

Volume elusi terlalu kecil

Tingkatkan volume eluen dan kurangi laju aliran elusi.

pH buffer elusi berubah

Gunakan eluen yang baru disiapkan

Waktu inkubasi eluen tidak cukup

Tingkatkan waktu inkubasi buffer elusi dengan gel.

Aplikasi 2: Gugus fluoresensi dan konjugat enzim berlabel streptavidin.

Gambar 4. Berbagai Streptavidin Terkonjugasi

1)Streptavidin Terkonjugasi Enzim
  • Streptavidin Terkonjugasi Peroksidase Lobak (HRP)

Ⅰ.Diproduksi oleh streptavidin kemurnian tinggi dan peroksidase lobak melalui teknik konjugasi khusus;

Ⅱ. Mempertahankan aktivitas spesifik peroksidase yang tinggi. Aplikasi: Imunohistokimia (IHC), Imunositokimia (ICC), Hibridisasi in situ (ISH), dll.

Konsentrasi yang Direkomendasikan: 0,01-0,1 µg/mL untuk WB (metode chemiluminescence); 1-2 µg/mL untuk ELISA, HC/ICC, WB (pengembangan warna substrat)

  • Alkali Fosfatase (AP) Terkonjugasi Streptavidin

Ⅰ.Cocok untuk analisis fase padat, sistem pewarnaan jaringan/sel, dan aplikasi blot, dengan ikatan kovalen spesifik;

Ⅱ. Konjugatnya stabil dan sangat aktif.

Aplikasi: Imunohistokimia (IHC), Imunositokimia (ICC), Uji Imunospot Tertaut Enzim (ELISPOT), Uji Imunosorben Tertaut Enzim (ELISA), Hibridisasi In Situ (ISH), dan aplikasi blot.

Konsentrasi yang Direkomendasikan: 1-2 µg/mL untuk ELISA, IHC/ICC; 0,1-1 µg/mL untuk WB

2)Streptavidin Terkonjugasi Fluorofor
  • Fluor® Fluorescein Terkonjugasi Streptavidin

Ⅰ.Direkomendasikan untuk imunofluoresensi rutin;

Ⅱ.Sangat dimurnikan dengan karakteristik pengikatan non-spesifik yang sangat rendah;

Ⅲ.Afinitas tinggi terhadap biotin;

Aplikasi: Imunofluoresensi (IF), Hibridisasi In Situ (ISH), Sitometri Aliran (Flow Cyt).

Konsentrasi yang Direkomendasikan: 0,5-2 µg/mL (IF)

  • Pewarna DyLight™ Streptavidin Terkonjugasi

Ⅰ.Dapat digunakan untuk mendeteksi antibodi kedua yang terbiotinilasi dan molekul besar lainnya dalam aplikasi imunofluoresensi, hibridisasi in situ, atau sitometri aliran;

Ⅱ.Sangat dimurnikan dengan karakteristik pengikatan non-spesifik yang sangat rendah;

Ⅲ.Afinitas yang sangat tinggi terhadap biotin;

Ⅳ.Fotostabilitas tinggi, tidak sensitif terhadap pH, dan fluoresensi lebih terang;

Aplikasi: Imunofluoresensi (IF), Hibridisasi In Situ (ISH), Sitometri Aliran (Flow Cyt).

Konsentrasi yang Direkomendasikan: 0.5-2 µg/mL (JIKA)

Informasi Produk

Seri Produk

Nomor Produk

Nama Produk

Spesifikasi

streptavidin

35099ES

Streptavidin (Serbuk)

100mg/1 gram

35101ES

Streptavidin (5 mg/ml)

1mg/5mg/10mg/100mg/1gram

Streptavidin Terkonjugasi Enzim

35105ES

HRP Streptavidin

100 mikroliter

35106ES

AP Streptavidin

100 mikroliter

Streptavidin berlabel fluoresensi

35102ES

DyLight 405™ Streptavidin

100 mikroliter

35103ES

YSFluorWaktu Standar Streptavidin terkonjugasi 488

100 mikroliter

35104ES

YSFluorWaktu Standar Streptavidin terkonjugasi 647

100 mikroliter

35107ES

YSFluorWaktu Standar Streptavidin terkonjugasi 584

100 mikroliter

35108ES

Streptavidin terkonjugasi Cy3

1 mg

Seri Pemurnian Streptavidin

20512ES

Resin Streptavidin Agarosa 6FF

5ml/5ml×5/100ml

20513ES

Kolom Kromatografi BiotSep Streptavidin 6FF, 1ML

1ml/1ml×5ml

20514ES

Kolom Kromatografi BiotSep Streptavidin 6FF, 5ML

5ml/5ml×5ml

Pertanyaan