1.Latar Belakang Pendahuluan
Streptavidin adalah protein pengikat biotin yang berasal dari Streptomyces avidinii. Pengikatan non-spesifiknya jauh lebih rendah daripada avidin, dan dibandingkan dengan avidin putih telur, yang memiliki muatan positif bersih pada pH netral dan mengandung sekitar 7% karbohidrat, streptavidin memiliki sifat kimia yang lebih baik seperti hampir tidak ada muatan bersih pada pH netral dan tidak ada karbohidrat. Oleh karena itu, streptavidin banyak digunakan sebagai alternatif avidin.
2. Fitur Produk
Struktur tetramer:Streptavidin ada sebagai homotetramer dengan ukuran 66KDa;
Afinitas tinggi:Setiap molekul streptavidin dapat mengikat secara spesifik empat molekul biotin, dengan afinitas yang sangat kuat di antara keduanya;
Aplikasi yang Luas: Konstanta disosiasi kompleks streptavidin-biotin berada dalam kisaran nanomolar, suatu sifat yang umum digunakan dalam aplikasi biologi molekuler; Dalam sebagian besar aplikasi, ia dapat digunakan secara bergantian dengan protein antibodi;
Ekstraksi Berkualitas Tinggi:Diperoleh dengan pemurnian dari Bakteri Streptomyces avidiniiBahasa Indonesia:

Gambar 1. Streptavidin
Produk Aplikasi
Aplikasi 1: Resin murni dengan streptavidin
1) Prinsip aplikasiBerdasarkan interaksi antara streptavidin dan biotin, streptavidin sangat terikat silang dengan 6% agarosa, dan proses persiapan yang unik memberinya sifat fisikokimia yang lebih tinggi, yang memungkinkannya menahan tekanan yang lebih tinggi. Ia dapat mencapai pemurnian protein target pada laju aliran yang relatif tinggi, sehingga lebih cocok untuk pemurnian protein industri berskala besar.
Gambar 2. Prinsip pemurnian resin streptavidin
2)
Gambar 3. Protein yang dimurnikan dengan resin streptavidin
3)Pertanyaan yang Sering Diajukan Pertanyaan | Kemungkinan alasan | Solusi yang disarankan |
Tekanan balik kolom terlalu tinggi | Pengepakan diblokir | Bersihkan resin. |
Buffer lisis mengandung partikel padat kecil, disarankan untuk menyaring dengan membran filter 0,22μm atau 0,45μm sebelum memuat, atau sentrifus untuk menghilangkannya. | ||
Sampelnya terlalu kental. | Sampel mengandung konsentrasi asam nukleat yang tinggi, perpanjang waktu lisis hingga viskositas berkurang, atau tambahkan DNase I (konsentrasi akhir 5 μg/ml), Mg2+ (konsentrasi akhir 1 mM), inkubasi di atas es selama 10-15 menit | |
Buffer terlalu kental | Reagen organik atau reagen penstabil protein (seperti gliserol, dll.) dapat menyebabkan peningkatan tekanan balik, mengurangi laju aliran operasi. | |
Protein tanpa tujuan dalam komponen elusi | Pembelahan yang berlebihan akan mengubah sifat protein yang diinginkan | Gunakan kondisi lisis ringan. kondisi percobaan didasarkan pada pengalaman. |
Protein target beragregat untuk menghasilkan presipitasi | Tambahkan DTT ke larutan pra-lisis sel pada konsentrasi akhir 1-10 mM. | |
Protein target tidak sepenuhnya terelusi | Volume elusi terlalu kecil | Tingkatkan volume eluen dan kurangi laju aliran elusi. |
pH buffer elusi berubah | Gunakan eluen yang baru disiapkan | |
Waktu inkubasi eluen tidak cukup | Tingkatkan waktu inkubasi buffer elusi dengan gel. |
Aplikasi 2: Gugus fluoresensi dan konjugat enzim berlabel streptavidin.
Gambar 4. Berbagai Streptavidin Terkonjugasi
1)Streptavidin Terkonjugasi Enzim- Streptavidin Terkonjugasi Peroksidase Lobak (HRP)
Ⅰ.Diproduksi oleh streptavidin kemurnian tinggi dan peroksidase lobak melalui teknik konjugasi khusus;
Ⅱ. Mempertahankan aktivitas spesifik peroksidase yang tinggi. Aplikasi: Imunohistokimia (IHC), Imunositokimia (ICC), Hibridisasi in situ (ISH), dll.
Konsentrasi yang Direkomendasikan: 0,01-0,1 µg/mL untuk WB (metode chemiluminescence); 1-2 µg/mL untuk ELISA, HC/ICC, WB (pengembangan warna substrat)
- Alkali Fosfatase (AP) Terkonjugasi Streptavidin
Ⅰ.Cocok untuk analisis fase padat, sistem pewarnaan jaringan/sel, dan aplikasi blot, dengan ikatan kovalen spesifik;
Ⅱ. Konjugatnya stabil dan sangat aktif.
Aplikasi: Imunohistokimia (IHC), Imunositokimia (ICC), Uji Imunospot Tertaut Enzim (ELISPOT), Uji Imunosorben Tertaut Enzim (ELISA), Hibridisasi In Situ (ISH), dan aplikasi blot.
Konsentrasi yang Direkomendasikan: 1-2 µg/mL untuk ELISA, IHC/ICC; 0,1-1 µg/mL untuk WB
2)Streptavidin Terkonjugasi Fluorofor- Fluor® Fluorescein Terkonjugasi Streptavidin
Ⅰ.Direkomendasikan untuk imunofluoresensi rutin;
Ⅱ.Sangat dimurnikan dengan karakteristik pengikatan non-spesifik yang sangat rendah;
Ⅲ.Afinitas tinggi terhadap biotin;
Aplikasi: Imunofluoresensi (IF), Hibridisasi In Situ (ISH), Sitometri Aliran (Flow Cyt).
Konsentrasi yang Direkomendasikan: 0,5-2 µg/mL (IF)
- Pewarna DyLight™ Streptavidin Terkonjugasi
Ⅰ.Dapat digunakan untuk mendeteksi antibodi kedua yang terbiotinilasi dan molekul besar lainnya dalam aplikasi imunofluoresensi, hibridisasi in situ, atau sitometri aliran;
Ⅱ.Sangat dimurnikan dengan karakteristik pengikatan non-spesifik yang sangat rendah;
Ⅲ.Afinitas yang sangat tinggi terhadap biotin;
Ⅳ.Fotostabilitas tinggi, tidak sensitif terhadap pH, dan fluoresensi lebih terang;
Aplikasi: Imunofluoresensi (IF), Hibridisasi In Situ (ISH), Sitometri Aliran (Flow Cyt).
Konsentrasi yang Direkomendasikan: 0.5-2 µg/mL (JIKA)
Informasi Produk
Seri Produk | Nomor Produk | Nama Produk | Spesifikasi |
streptavidin | 35099ES | Streptavidin (Serbuk) | 100mg/1 gram |
35101ES | Streptavidin (5 mg/ml) | 1mg/5mg/10mg/100mg/1gram | |
Streptavidin Terkonjugasi Enzim | 35105ES | HRP Streptavidin | 100 mikroliter |
35106ES | AP Streptavidin | 100 mikroliter | |
Streptavidin berlabel fluoresensi | 35102ES | DyLight 405™ Streptavidin | 100 mikroliter |
35103ES | YSFluorWaktu Standar Streptavidin terkonjugasi 488 | 100 mikroliter | |
35104ES | YSFluorWaktu Standar Streptavidin terkonjugasi 647 | 100 mikroliter | |
35107ES | YSFluorWaktu Standar Streptavidin terkonjugasi 584 | 100 mikroliter | |
35108ES | Streptavidin terkonjugasi Cy3 | 1 mg | |
Seri Pemurnian Streptavidin | 20512ES | Resin Streptavidin Agarosa 6FF | 5ml/5ml×5/100ml |
20513ES | Kolom Kromatografi BiotSep Streptavidin 6FF, 1ML | 1ml/1ml×5ml | |
20514ES | Kolom Kromatografi BiotSep Streptavidin 6FF, 5ML | 5ml/5ml×5ml |