เทคโนโลยีการขยายกรดนิวคลีอิกแบบไอโซเทอร์มอลสามารถแบ่งประเภทได้เป็นหลายประเภทตามหลักการขยายที่แตกต่างกัน วิธีการที่ใช้กันทั่วไปและใช้กันอย่างแพร่หลายที่สุดคือเทคโนโลยีการขยายแบบไอโซเทอร์มอลแบบลูปมีเดียเต็ด (LAMP) ซึ่งพัฒนาโดยนักวิชาการชาวญี่ปุ่น รวมถึงโนโตมิในปี 2543 คุณลักษณะทางเทคนิคของ LAMP คือการออกแบบไพรเมอร์สี่ตัวที่กำหนดเป้าหมายที่หกบริเวณบนยีนเป้าหมาย โดยใช้โพลีเมอเรสดีเอ็นเอ Bst ชนิดที่เคลื่อนที่ได้เพื่อดำเนินปฏิกิริยาการขยายที่อุณหภูมิคงที่ 60~65°C วิธีนี้ทำให้ได้ไพรเมอร์ 10 ตัว9-1010-ขยายภาพได้ภายใน 15-60 นาที
เอนไซม์โพลีเมอเรส DNA Bst เป็นเอนไซม์หลักในเทคโนโลยีการขยายพันธุ์แบบอุณหภูมิคงที่ของ LAMP เอนไซม์นี้มีเสถียรภาพทางความร้อนสูง มีกิจกรรมการเคลื่อนตัวของสาย และกิจกรรมโพลีเมอเรส ทำให้สามารถขยายพันธุ์เทมเพลตได้อย่างรวดเร็ว มีประสิทธิภาพ และเฉพาะเจาะจงภายใต้สภาวะอุณหภูมิคงที่ ซึ่งแตกต่างจาก PCR ซึ่งต้องใช้รอบการเปลี่ยนสภาพทางความร้อนในการขยายพันธุ์ การทดลอง LAMP ทั้งหมดสามารถเสร็จสิ้นได้ภายในหนึ่งชั่วโมงโดยไม่จำเป็นต้องใช้รอบดังกล่าว
ข้อดีของผลิตภัณฑ์
เอนไซม์ที่ปราศจากกลีเซอรอล เหมาะสำหรับการทำให้แห้งแบบแช่แข็ง
การขนส่งอุณหภูมิแวดล้อม ลดต้นทุน
กิจกรรมการเคลื่อนตัวของเส้นใยที่แข็งแกร่ง มีความละเอียดอ่อนและมีเสถียรภาพ
การเติมน้ำอย่างรวดเร็ว ใช้งานง่าย
ไฮไลท์การดำเนินงาน
01 การประยุกต์ใช้วิธีการย้อมเรืองแสง
1、ความไวสูงและความจำเพาะที่ดี
ในระบบขยายสีย้อมเรืองแสง RT-LAMP ประสิทธิภาพการขยายของเค้กผงแห้ง 14405ES สอดคล้องกับเอนไซม์ Bst ของเหลว (รวมถึงกลีเซอรอลและปราศจากกลีเซอรอล) และทั้งสองอย่างสามารถตรวจจับได้ 100% ที่ความไว 50 สำเนา/T ความจำเพาะดี โดยไม่มีการตรวจจับใน 48 หลุมของ NTC (การควบคุมเทมเพลตเชิงลบ)
2、เสถียรภาพเร่งความร้อนที่ดี
ในระบบขยายสีย้อมเรืองแสง RT-LAMP ผงไลโอฟิไลซ์จะถูกนำไปเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 45°C เป็นเวลา 7 วัน 45°C เป็นเวลา 15 วัน และอุณหภูมิห้องเป็นเวลา 19 วันตามลำดับ หลังจากการเร่งด้วยความร้อน ประสิทธิภาพของผลิตภัณฑ์ยังคงสอดคล้องกับเอนไซม์ Bst เวอร์ชันของเหลวที่ปราศจากกลีเซอรอล และไม่พบจุดสูงสุดใน NTC (ตัวควบคุมเทมเพลตเชิงลบ)
3、รองรับการแช่แข็งซ้ำหลังจากการเร่งความเร็ว
ในระบบขยายสีย้อมเรืองแสง RT-LAMP ผงไลโอฟิไลเซชันจะถูกนำไปเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 45°C เป็นเวลา 7 วันและ 45°C เป็นเวลา 15 วันตามลำดับ ผงไลโอฟิไลเซชันหลังจากการบำบัดด้วยการเร่งความเร็วด้วยความร้อนจะถูกนำไปทำการไลโอฟิไลเซชันรอบที่สอง (รวมถึงเอนไซม์เดี่ยวและรีเอเจนต์ RT-LAMP) การทดลองแสดงให้เห็นว่าหลังจากการบำบัดด้วยการเร่งความเร็วและการไลโอฟิไลเซชันรอบที่สอง ประสิทธิภาพของผลิตภัณฑ์ยังคงสอดคล้องกับเอนไซม์ Bst ที่ไม่มีกลีเซอรอลในรูปแบบของเหลว และไม่พบจุดสูงสุดใน NTC (การควบคุมเทมเพลตเชิงลบ) ความเสถียรของผลิตภัณฑ์นั้นดี รองรับการไลโอฟิไลเซชันรองและการเร่งความเร็วหลังจากการไลโอฟิไลเซชันรอง
02 การประยุกต์ใช้วิธีการวัดค่า pH แบบสี
1、ความไวสูงและความจำเพาะที่ดี
ในระบบขยายสี pH ของ RT-LAMP ความไวในการขยายของเค้กผงแห้งแช่แข็ง 14405ES สามารถสูงถึง 50 สำเนา/T (อัตราการตรวจจับ 100%) และมีความจำเพาะดี โดยไม่มีการตรวจจับใน 24 หลุมของ NTC (ตัวควบคุมเทมเพลตเชิงลบ)
2、เสถียรภาพเร่งความร้อนที่ดี
ในระบบขยายสี pH ของ RT-LAMP ได้มีการตรวจสอบเสถียรภาพของผงแห้งแบบแห้ง 14405ES ที่เร่งด้วยความร้อนที่อุณหภูมิ 45°C เป็นเวลา 15 วัน เสถียรภาพหลังการแห้งแบบแห้งขั้นที่สองหลังจากการเร่งความเร็ว (การเติมน้ำกลับเข้าไปใหม่หลังจากการเร่งความเร็วที่อุณหภูมิ 45°C เป็นเวลา 7 วัน) และเสถียรภาพในการจัดเก็บหลังการเติมน้ำกลับเข้าไปใหม่ (เก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20°C เป็นเวลา 7 วันหลังจากการเติมน้ำกลับเข้าไปใหม่) การทดลองบ่งชี้ว่าผลิตภัณฑ์ 14405ES มีความเสถียรที่ดี โดยไม่มีผลกระทบต่อประสิทธิภาพของผลิตภัณฑ์หลังการเร่งความเร็วด้วยความร้อน และรองรับการแห้งแบบแห้งขั้นที่สองหลังจากการเร่งความเร็ว
คำแนะนำผลิตภัณฑ์เด่น
| ประเภทสินค้า | ฟังก์ชั่นผลิตภัณฑ์ | ชื่อสินค้า | หมายเลขสินค้า |
| RT-LAMP มิกซ์ | สีย้อมเรืองแสง | โคมไฟ RT ย้อม การวิเคราะห์ ชุดคิท（UDG บวก) | 13762ES |
| ตัวบ่งชี้ค่า pH | โคมไฟ RT พีเอช อ่อนไหว สีย้อม ชุด | 13906ES | |
| ตัวบ่งชี้ค่า pH แบบแช่เยือกแข็ง | โคมไฟ RT พีเอช อ่อนไหว ย้อม โครโมเจนิก เวอร์ชัน การทำให้แห้งด้วยการแช่แข็ง ชุด | 13920ES | |
| เอนไซม์ บีเอสที | กลีเซอรอล | ไฮเอฟ® บีเอสที พลัส ดีเอ็นเอ โพลิเมอเรส (40 หน่วยวัด:ยู/ลิตร) | 14402ES |
| ปราศจากกลีเซอรอล | แช่เยือกแข็ง บีเอสที พลัส ดีเอ็นเอ โพลิเมอเรส (60 U/μL, ปราศจากกลีเซอรอล) | 14405ES | |
| บัฟเฟอร์ | บัฟเฟอร์เบสิก(ปราศจากสีย้อม ฯลฯ) | 10× ไฮเอฟ® บีเอสที พลัส ดีเอ็นเอ โพลิเมอเรส บัฟเฟอร์ | 15441ES |