วิธีการผลิตเอนไซม์โมเลกุลที่ปราศจากกลีเซอรอลที่ยอดเยี่ยม ?

เทคโนโลยีการวินิจฉัยทางโมเลกุลนั้นแตกต่างจากวิธีการตรวจจับอื่นๆ เนื่องจากมีความไวและความจำเพาะที่โดดเด่น อย่างไรก็ตาม น้ำยาวินิจฉัยทางของเหลวแบบเดิมนั้นมีข้อเสีย เช่น ค่าใช้จ่ายในการขนส่งที่สูงและอายุการเก็บรักษาที่จำกัด ซึ่งจำกัดการใช้งาน เพื่อตอบสนองต่อความต้องการของตลาดที่เปลี่ยนแปลงไปและความก้าวหน้าทางเทคโนโลยี จึงได้มีการคิดค้นน้ำยาทดสอบการวินิจฉัยทางโมเลกุลแบบแช่แข็งแห้งขึ้น ผลิตภัณฑ์ที่ผ่านการทำให้แห้งแบบแช่แข็งมีข้อดีหลายประการเหนือน้ำยาทดสอบแบบของเหลวแบบเดิม ได้แก่:

• มีเสถียรภาพที่อุณหภูมิห้อง - โครงสร้างสามมิติได้รับการแก้ไข ซึ่งช่วยให้มั่นใจได้ถึงความเสถียรของระบบเอนไซม์และปฏิกิริยาที่อุณหภูมิห้อง ไม่จำเป็นต้องขนส่งและจัดเก็บแบบโซ่เย็นในตู้เย็นหรือห้องเย็น ซึ่งสามารถยืดอายุการเก็บรักษาของผลิตภัณฑ์ได้
• ใช้งานง่าย- ไม่ต้องแช่แข็งและละลายน้ำแข็งซ้ำๆ ทั้งการจ่ายของเหลว ฯลฯ
• ลดต้นทุน- ไม่จำเป็นต้องขนส่งแบบควบคุมอุณหภูมิและการจัดเก็บแบบแช่แข็ง ทำให้ลดต้นทุนการขนส่งและการจัดเก็บได้อย่างมีประสิทธิภาพ
• ความแม่นยำสูง- ใช้ไมโครคอร์แช่แข็งแห้งหนึ่งตัวในการทำปฏิกิริยาหนึ่งครั้งเพื่อลดข้อผิดพลาดขององค์ประกอบในระหว่างการเตรียมสารเคมี ลดระยะเวลาการทำงาน ป้องกันการสูญเสียกิจกรรมทางชีวภาพในระหว่างการเตรียมของเหลว และปรับปรุงความแม่นยำให้ดีขึ้นอย่างแท้จริง
• การใช้งานที่ยืดหยุ่น- ไม่ถูกจำกัดด้วยจำนวนตัวอย่าง คุณสามารถโหลดตัวอย่างหนึ่งชิ้นได้เช่นกัน

เอนไซม์โมเลกุลทั่วไปหรือพรีมิกซ์มักผสมกลีเซอรีนความเข้มข้นสูงเป็นสารป้องกันการแข็งตัวและสารทำให้คงตัว อย่างไรก็ตาม การมีกลีเซอรีนอยู่ในรีเอเจนต์อาจทำลายความสมบูรณ์ของโครงสร้างของน้ำ ทำให้ยากต่อการกำจัดน้ำอย่างมีประสิทธิภาพ ซึ่งส่งผลเสียต่อโครงสร้างและความเสถียรของผลิตภัณฑ์ที่ผ่านการทำให้แห้งด้วยการแช่แข็ง ดังนั้น เมื่อเลือกใช้การทำให้แห้งด้วยการแช่แข็ง ควรเลือกรีเอเจนต์ที่ปราศจากกลีเซอรอล

นอกจากนี้ ในแอปพลิเคชันที่ไวต่อองค์ประกอบของรีเอเจนต์เป็นพิเศษ เช่น ดิจิทัล PCR การใช้เอนไซม์ที่ปราศจากกลีเซอรีนที่มีความเข้มข้นสูงสามารถลดอิทธิพลของกลีเซอรอลต่อปฏิกิริยาดิจิทัล PCR ได้อีก แนวทางนี้ไม่เพียงช่วยลดการรบกวนให้น้อยที่สุด แต่ยังขยายศักยภาพในการปรับปรุงระบบรีเอเจนต์ตรวจจับดิจิทัล PCR ให้เหมาะสมอีกด้วย

Yeasen ปราศจากกลีเซอรอล สารละลายเอนไซม์โมเลกุล

Yeasen ได้จัดตั้งแพลตฟอร์มการวิจัยและพัฒนาและการผลิตเอนไซม์โมเลกุลที่ไม่ใช่กลีเซอรีนที่ครอบคลุม และได้ประสบความสำเร็จในการผลิตเอนไซม์โมเลกุลที่ปราศจากกลีเซอรอลหลายชนิดในปริมาณมากผ่านการเลือกวัสดุ การควบคุมสภาพแวดล้อม การเพิ่มประสิทธิภาพกระบวนการ และการรับรองคุณภาพ

• การทดลองกระบวนการไดอะไลซิส

การเพิ่มประสิทธิภาพกระบวนการไดอะไลซิสเพื่อให้ได้เอนไซม์กลีเซอรีนที่มีปริมาตรคงที่:

1. การคัดกรองบัฟเฟอร์ไดอะไลซิสที่เหมาะสมสำหรับเอนไซม์โมเลกุลต่างๆ
2. การคัดกรองโซลูชันการจัดเก็บที่เสถียรสำหรับเอนไซม์โมเลกุลต่างๆ เพื่อให้สามารถจัดเก็บได้ในระยะยาวที่อุณหภูมิ 4℃ หรือ -20℃

• การขยายกระบวนการกรองการไหลแบบสัมผัส

จากการคัดกรองกระบวนการไดอะไลซิส เราสามารถกำหนดส่วนประกอบบัฟเฟอร์ไดอะไลซิสที่เหมาะสมและสารละลายจัดเก็บที่เหมาะสมได้ จากนั้นจึงสามารถใช้กระบวนการกรองการไหลแบบสัมผัส (เรียกอีกอย่างว่า UFDF) เพื่อทดแทนบัฟเฟอร์สารละลาย

ปัจจัยสำคัญในการพัฒนากระบวนการกรองแบบไหลสัมผัสเกี่ยวข้องกับการเลือกสูตรสารละลายในการจัดเก็บ สูตรสารละลายในการซักและการกรอง ตลอดจนแรงดันข้ามเมมเบรนและอัตราการไหลที่ใช้ในระหว่างการกรอง Yeasen ได้กำหนดแนวทางมาตรฐานสำหรับการกรองการไหลแบบสัมผัส ซึ่งช่วยให้สามารถกำหนดปริมาณการซักและการกรองและพารามิเตอร์เวลาได้อย่างรวดเร็วโดยอิงตามปริมาณกลีเซอรีนที่ต้องการในเอนไซม์โมเลกุลเป้าหมาย แนวทางนี้ช่วยประหยัดทั้งวัสดุและเวลา

• การควบคุมคุณภาพ

กระบวนการเตรียมต่างๆ ที่ระบุไว้ข้างต้นได้รับการออกแบบมาเพื่อรองรับความต้องการที่หลากหลายสำหรับปริมาณและประเภทผลิตภัณฑ์ที่แตกต่างกัน เพื่อประเมินเสถียรภาพของผลิตภัณฑ์ในชุดต่างๆ และภายในกระบวนการเดียวกัน Yeasen ได้พัฒนาระบบการจำแนกลักษณะพารามิเตอร์ประสิทธิภาพที่ครอบคลุม ระบบนี้ช่วยให้สามารถประเมินผลกระทบของมาตรการที่ปราศจากกลีเซอรอลจากมุมมองที่หลากหลายได้อย่างละเอียด วิธีการจำแนกลักษณะประกอบด้วย การวัดปริมาณโปรตีน การประเมินกิจกรรมของเอนไซม์ (อัตราการฟื้นตัว) การวิเคราะห์ปริมาณกลีเซอรีน การประเมินปริมาณสารป้องกัน และการประเมินประสิทธิภาพของเอนไซม์ เป็นต้น

Yeasen ผลิตภัณฑ์เอนไซม์โมเลกุลปราศจากกลีเซอรอล

Yeasen ได้นำกระบวนการเตรียมเอนไซม์โมเลกุลที่ปราศจากกลีเซอรอลมาใช้ในการผลิตเอนไซม์ที่ปราศจากกลีเซอรอลจากเอนไซม์ที่มีกลีเซอรอลเป็นส่วนประกอบในตอนแรก ปัจจุบัน เราสามารถจัดหาเอนไซม์ที่ปราศจากกลีเซอรอลในปริมาณมาก ซึ่งเหมาะสำหรับการใช้งาน qPCR/RT-qPCR และ LAMP/RT-LAMP วัตถุดิบเหล่านี้ได้รับการออกแบบมาเพื่อการทำให้แห้งด้วยการแช่แข็งในการทดสอบการวินิจฉัย โดยยังคงคุณภาพและประสิทธิภาพในระดับเดียวกันกับเอนไซม์ในรูปแบบของเหลว

ผลิตภัณฑ์เอนไซม์โมเลกุลปราศจากกลีเซอรอล

พรีมิกซ์ qPCR ถูกเตรียมโดยใช้ Yeasen 14316ES E-Taq ดีเอ็นเอโพลิเมอเรส และเอนไซม์ปลอดกลีเซอรอลที่สอดคล้องกันตามลำดับ และเทมเพลตของ 10⁵, 10⁴ และ 10³ สำเนาต่อมล. ถูกขยายในเวลาเดียวกัน ผลการทดลองแสดงให้เห็นว่าผลการขยายของ 14316ES ที่ปราศจากกลีเซอรอลสอดคล้องกับผลการขยายของ 14316ES ที่ประกอบด้วยกลีเซอรีน คู่เทียบ การทดสอบเสถียรภาพแบบเร่งของ 14316ES ดำเนินการที่อุณหภูมิ 37℃ ผลการทดลองแสดงให้เห็นว่าประสิทธิภาพการขยายตัวของ 14316ES สอดคล้องกับการควบคุมที่ไม่มีการเร่งหลังจากการบำบัดแบบเร่งที่อุณหภูมิ 37℃ เป็นเวลา 54 วัน ผลการทดลองข้างต้นแสดงให้เห็นว่าไม่มีความแตกต่างในประสิทธิภาพของเอนไซม์ที่ปราศจากกลีเซอรอลและเอนไซม์ที่มีกลีเซอรีน คู่กันและมีเสถียรภาพดี

• ผลิตภัณฑ์แช่แข็งแห้งแบบ RT-qPCR: เร่งที่อุณหภูมิ 50℃ เป็นเวลา 25 วัน ผลิตภัณฑ์แช่แข็งแห้งมีสัณฐานวิทยาและประสิทธิภาพที่เสถียร

Yeasen 14316ES ถูกเตรียมลงในสารละลายพรีมิกซ์ RT-qPCR ซึ่งได้รับการทำให้แห้งแบบแช่แข็งและทดสอบความเสถียรที่เร่งขึ้นที่ 50℃ เป็นเวลา 25 วัน ในเวลาเดียวกัน 10⁵, 10⁴ และ 10³ สำเนา/มล. ของเทมเพลตไวรัสเทียมไวรัสโคโรนาสายพันธุ์ใหม่ได้รับการขยายผลการทดลองพบว่าสัณฐานวิทยาของผลิตภัณฑ์ ค่า Ct และค่าการเรืองแสงไม่มีการเปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญก่อนและหลังการทำให้แห้งแบบแช่แข็ง และผลิตภัณฑ์การทำให้แห้งแบบแช่แข็งมีความคงตัวที่ดี

• ผลิตภัณฑ์แช่แข็งแห้ง RT-LAMP: เร่งที่อุณหภูมิ 45℃ เป็นเวลา 30 วัน ผลิตภัณฑ์แช่แข็งแห้งมีสัณฐานวิทยาและประสิทธิภาพที่เสถียร

พรีมิกซ์ RT-LAMP ได้ถูกเตรียมด้วย Yeasen 14405ES และ 11297ES และการทดสอบประสิทธิภาพดำเนินการหลังจากการทำให้แห้งแบบแช่แข็ง รูปฏิกิริยาเชิงบวกเป็นสีส้มและรูปฏิกิริยาเชิงลบเป็นสีแดงอมม่วง ซึ่งแสดงให้เห็นถึงความแตกต่างอย่างมาก และผลลัพธ์ได้รับการตีความอย่างชัดเจน นอกจากนี้ สัณฐานวิทยาของผลิตภัณฑ์ที่ผ่านการทำให้แห้งแบบแช่แข็งไม่เปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญหลังจากเร่งที่อุณหภูมิ 45 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 วัน ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่าผลิตภัณฑ์ที่ผ่านการทำให้แห้งแบบแช่แข็งมีรูปร่างและประสิทธิภาพที่เสถียร

ข้อมูลสินค้า

การจำแนกประเภท	เอ็นเอเม	เลขที่แคตตาล็อก
ผลิตภัณฑ์เอนไซม์ปลอดกลีเซอรอลสำหรับ qPCR/RT-qPCR	ชุดตรวจ RT-qPCR แบบมัลติเพล็กซ์ Hifair™ Lyo -11831ES	11831ES
	Hieff UNICON® HotStart E-Taq DNA Polymerase ปราศจากกลีเซอรอล	14316ES
	Hifair® V Reverse Transcriptase ปราศจากกลีเซอรอล	11301ES
	ยูราซิลดีเอ็นเอไกลโคซิเลส (UDG) ปราศจากกลีเซอรอล	10707ES
	สารยับยั้ง RNase ของหนู (200 U/μL, ปราศจากกลีเซอรอล)	10703ES
ผลิตภัณฑ์เอนไซม์ปลอดกลีเซอรอลสำหรับ RT-LAMP	Hifair® III Reverse Transcriptase, 600U/μl, ปราศจากกลีเซอรอล	11297ES
	โพลิเมอร์ดีเอ็นเอ Bst Plus แบบแห้งเยือกแข็ง (60 U/μL ปราศจากกลีเซอรอล)	14405ES