—จุดประกายเยื่อบล็อทของคุณที่ปลายนิ้วของคุณ!
ปัจจุบันรีเอเจนต์ ECL ซึ่งเรียกว่าสารตั้งต้นเรืองแสงเคมีสำหรับเอนไซม์ฮอร์สแรดิชเปอร์ออกซิเดส (HRP) เป็นรีเอเจนต์ที่มีความไวสูงที่สุดที่ใช้ในการตรวจจับแบบเวสเทิร์นบล็อต ปัญหาทั่วไปของรีเอเจนต์ ECL ที่วางจำหน่ายในท้องตลาด ได้แก่ การดับ แบ็คกราวด์สูง ความไม่เสถียร และความยากลำบากในการตรวจจับโปรตีนที่มีปริมาณน้อย ซึ่งอาจส่งผลต่อผลการทดลองขั้นสุดท้าย
คุณสมบัติผลิตภัณฑ์
- ความไวแสงที่ยอดเยี่ยม — การตรวจจับแอนติเจนตั้งแต่ระดับพิโกแกรมถึงเฟมโทแกรมต่ำ
- อัตราส่วนสัญญาณต่อสัญญาณรบกวนที่สูงขึ้น พื้นผิวเรืองแสงที่แม่นยำช่วยลดสัญญาณรบกวนพื้นหลัง
- แอนติบอดีมีประสิทธิภาพมากขึ้น — ระบบพื้นผิวที่ปรับให้เหมาะสมสำหรับความสัมพันธ์ในการจับกับแอนติบอดีที่สูงขึ้น
- อัตราส่วนต้นทุนต่อประสิทธิภาพสูง — ประสิทธิภาพที่สูงขึ้นในราคาที่ต่ำกว่า
- เสถียรภาพดีเยี่ยม สารออกซิไดเซอร์ชนิดใหม่ช่วยให้เก็บรักษาได้อย่างเสถียรที่อุณหภูมิ 4°C นานถึงหนึ่งปี

หลักการผลิตภัณฑ์
หลักการสำคัญของการตรวจจับรีเอเจนต์ ECL คือการเรืองแสงจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน ลูมินอล ซึ่งเป็นองค์ประกอบหลักของสารตั้งต้นเรืองแสง จะถูกออกซิไดซ์โดย H2O2 ในสภาวะด่างผ่านการเร่งปฏิกิริยาของเอนไซม์เปอร์ออกซิเดสจากพืชตระกูลฮอร์สแรดิช (HRP) ซึ่งจะสร้างสารตัวกลางสถานะกระตุ้นของกรด 3-อะมิโน-พาทาลิก เมื่อกลับสู่สถานะพื้นฐาน โฟตอนจะถูกปล่อยออกมา โดยมีความยาวคลื่นการปล่อยสูงสุดที่ 425 นาโนเมตร สัญญาณโฟตอนเหล่านี้สามารถจับภาพได้ด้วยฟิล์มเอกซเรย์หรืออุปกรณ์ถ่ายภาพ CCD

คำแนะนำในการเลือก
แล้วคุณควรเลือกผลิตภัณฑ์ใดสำหรับการทดลองของคุณ?
ตารางที่ 1.คู่มือการเลือกรีเอเจนต์ ECL
| ECL ที่ได้รับการปรับปรุง ประเภทที่ได้รับการปรับปรุง | ซุปเปอร์อีซีแอล ประเภทที่อ่อนไหวมาก | ซุปเปอร์ดูร่า ชนิดทนทาน | แม็กซี่ซิกแนล ประเภทความไวสูงพิเศษ |
ตัวอย่างที่สามารถนำไปใช้ได้ | เป้าหมายที่มีตัวอย่างโปรตีนจำนวนมากเป็นประจำ | เป้าหมายที่มีความอุดมสมบูรณ์ต่ำ ตัวอย่างจำกัด | เป้าหมายที่มีความอุดมสมบูรณ์ต่ำ ตัวอย่างจำกัด | เป้าหมายที่มีความอุดมสมบูรณ์ต่ำมาก ตัวอย่างอันมีค่า |
ความไวในการตรวจจับ | ระดับพิโกแกรมกลาง | ระดับพิโกแกรมต่ำ | ระดับเฟมโตแกรมกลาง | ระดับเฟมโตแกรมต่ำ |
ระยะเวลาสัญญาณ | < 2 ชม. | < 12 ชม. | < 24 ชม. | < 8 ชม. |
ระบบตรวจจับที่สามารถใช้งานได้ | สารเคมีทั้งหมดเหมาะสำหรับฟิล์มเอกซเรย์ อุปกรณ์สร้างภาพ CCD | |||
ความเข้มข้นของการเจือจางแอนติบอดีขั้นต้น | 1:1000-1:4000 | 1:1000-1:10,000 | 1:1000-1:50,000 | 1:5000-1:100,000 |
ความเข้มข้นของการเจือจางแอนติบอดีรอง | 1:1000-1:4000 | 1:2000-1:10,000
| 1:50,000-1:250,000 | 1:100,000-1:500,000 |
เมมเบรนที่แนะนำ | เมมเบรน NC | เมมเบรน NC หรือ เมมเบรน PVDF | เมมเบรน NC หรือ เมมเบรน PVDF | เมมเบรน NC หรือ เมมเบรน PVDF |
ความเสถียรในการจัดเก็บ | อุณหภูมิห้อง 1 ปี | 4°C เป็นเวลา 1 ปี อุณหภูมิห้องเป็นเวลาครึ่งปี | ||
ข้อดี | สัญญาณที่แรงที่สุดในระดับความไวเดียวกัน | อัตราส่วนต้นทุนต่อประสิทธิภาพสูงสุด เหมาะสำหรับการทดลอง WB ส่วนใหญ่ | สัญญาณมีระยะเวลายาวนานที่สุด เหมาะมากสำหรับการเปิดรับแสงหลายครั้ง | ความไวที่ยอดเยี่ยม เหมาะอย่างยิ่งสำหรับการตรวจจับโปรตีนร่องรอย |
หมายเหตุ: ความเข้มข้นของการเจือจางแอนติบอดีที่แนะนำนั้นขึ้นอยู่กับความเข้มข้นสต็อกแอนติบอดีที่ 1 มก./มล.
การประยุกต์ใช้ผลิตภัณฑ์

รูปที่ 1 การเปรียบเทียบผลการตรวจจับระหว่าง
รูปที่ 2 การเปรียบเทียบผลการตรวจจับระหว่าง
รูปที่ 3.การเปรียบเทียบผลการตรวจจับระหว่าง
วรรณกรรมตีพิมพ์
[1]Wang Z, Lu Z, Lin S และคณะ เซลล์ B ที่แสดงออกถึง Leucine-tRNA-synthase-2 มีส่วนช่วยในการหลีกเลี่ยงภูมิคุ้มกันต่อมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก Immunity. 2022;55(6):1067-1081.e8. doi:10.1016/j.immuni.2022.04.017(IF:43.474)
[2] Wu Z, Liu D, Pan D และคณะ โครงสร้างและวิศวกรรมของ Acidibacillus sulfuroxidans ขนาดเล็ก Cas12f1[J] Nature Catalysis, 2023, 6(8):695-709.DOI:10.1038/s41929-023-00995-4(IF:38)
[3] Yao J, Wu D, Zhang C และคณะ Macrophage IRX3 ส่งเสริมโรคอ้วนที่เกิดจากอาหารและการอักเสบของระบบเผาผลาญ Nat Immunol. 2021;22(10):1268-1279. doi:10.1038/s41590-021-01023-y (ถ้า:25.606)
[4] He X, Li J, Zhou G และคณะ การกำหนดประตูจังหวะฮิปโปแคมปัสและความจำโดยความยืดหยุ่นของซินแนปส์ในอินเตอร์นิวรอนยับยั้ง Neuron. 2021;109(6):1013-1028.e9. doi:10.1016/j.neuron.2021.01.014(IF:17.173)
ข้อได้เปรียบด้านราคา
รูปที่ 7.การเปรียบเทียบราคาของ
คำถามที่พบบ่อย
ปัญหาที่พบ | การวิเคราะห์สาเหตุ | โซลูชั่นที่แนะนำ |
ฟิล์มมีภาพกลับด้าน | ฟิล์มมีภาพกลับด้าน | ฟิล์มมีภาพกลับด้าน |
ฟิล์มมีแถบสีน้ำตาลหรือสีเหลือง | ||
การดับการเรืองแสง | เวลาใช้งานนานเกินไป เมมเบรนจะแห้งช้า | ป้องกันเมมเบรนไม่ให้แห้ง |
การปนเปื้อนของพลาสติกห่อ ดีเวลลอปเปอร์ หรือฟิกเซอร์ | พัฒนาพฤติกรรมการทดลองที่ดี | |
HRP ในระบบปฏิกิริยาไม่เพียงพอ | เพิ่มวัสดุที่มีฉลาก HRP | |
ไม่มีแบนด์หรือสัญญาณอ่อนบนฟิล์ม | ประสิทธิภาพการถ่ายโอนต่ำ | ปรับปรุงประสิทธิภาพการถ่ายโอน ใช้มาร์กเกอร์ที่ย้อมสีไว้ล่วงหน้าเพื่อการตัดสิน |
แอนติเจน/แอนติบอดีไม่เพียงพอหรือไม่ตรงกัน | เพิ่มปริมาณแอนติเจน/แอนติบอดี หรือเลือกแอนติเจน/แอนติบอดีให้เหมาะสม | |
ปัญหาฟิล์มเอกซเรย์ | หากฟิล์มเอกซเรย์เป็นสีดำสนิท (ไม่โปร่งใส) หลังจากการฉายแสง แสดงว่าฟิล์มได้รับการฉายแสงเต็มที่แล้ว ให้ใช้ฟิล์มเอกซเรย์ใหม่ | |
ปัญหาของผู้พัฒนา/ผู้แก้ไข | เปิดรับแสงฟิล์มก่อนเพื่อตรวจสอบ หากมีปัญหา ให้เปลี่ยนด้วยน้ำยาล้างฟิล์ม/น้ำยาซ่อมใหม่ | |
HRP ที่มากเกินไปในระบบปฏิกิริยา | วัสดุที่มีฉลาก HRP เจือจาง | |
พื้นหลังสูง | ความเข้มข้นของแอนติบอดีปฐมภูมิและทุติยภูมิสูงเกินไป | ลดความเข้มข้นของแอนติบอดี ขยายเวลาการบล็อก |
แอนตี้บอดีไม่ได้ทำความสะอาดอย่างทั่วถึง | เพิ่มจำนวนครั้งในการซัก | |
การบล็อคไม่สมบูรณ์ | เพิ่มประสิทธิภาพเงื่อนไขการบล็อค | |
ใช้สารบล็อคผิดประเภท | ใช้ตัวแทนการบล็อกที่แตกต่างกัน | |
การเปิดรับแสงมากเกินไป | ลดเวลาการเปิดรับแสง | |
ความจำเพาะของแอนติบอดีต่ำ | ทดแทนด้วยแอนติบอดีคุณภาพสูง | |
HRP ที่มากเกินไปในระบบปฏิกิริยา | วัสดุที่มีฉลาก HRP เจือจาง | |
วงดนตรีที่มีจุดว่าง | ความเข้มข้นของแอนติเจนและแอนติบอดีรองสูง | เจือจางตัวอย่างและรันเจลอีกครั้ง หรือทำให้สารละลายโครโมเจนิกที่ผสมเย็นลงและทาบนเมมเบรนเพื่อการพัฒนาอย่างรวดเร็วทันที |
รูปทรงแถบไม่เรียบ | ฟองอากาศระหว่างการถ่ายโอนหรือการเติมความชื้นที่ไม่สม่ำเสมอด้วยเมทานอล (สำหรับเมมเบรน PVDF) | เพิ่มประสิทธิภาพเงื่อนไขการถ่ายโอน |
จุดภาพยนต์ | มวลรวมของวัสดุที่มีฉลาก HRP | กรองวัสดุที่มีฉลาก HRP ด้วยเมมเบรน 0.2μm |
แบนด์ไม่เฉพาะเจาะจง | HRP ที่มากเกินไปในระบบปฏิกิริยา | วัสดุที่มีฉลาก HRP เจือจาง |
SDS ทำให้จับโปรตีนแบบไม่จำเพาะ | ห้ามใช้ SDS ในขั้นตอนการทดลอง | |
ความจำเพาะของแอนติบอดีต่ำ | ทดแทนด้วยแอนติบอดีคุณภาพสูง | |
การบล็อคไม่เพียงพอ | เพิ่มเวลาการบล็อคหรือใช้ตัวแทนการบล็อคอื่น |
ข้อมูลการสั่งซื้อ
ชื่อสินค้า | หมายเลขสินค้า | ข้อมูลจำเพาะ |
น้ำยาตรวจจับ Super ECL | 36208ES60/76 | 100มล./50มล. |
ชุดสารตั้งต้นเรืองแสงเคมี ECL ที่ได้รับการปรับปรุง | 36222ES60/76 | 100มล./500มล. |
สารตั้งต้นระยะเวลาขยาย SuperSignal SuperDura | 36223ES10/60/70/76 | 10มล./100มล./200มล./500มล. |
SuperSignal MaxiSignal สารตั้งต้นที่มีความไวสูงสุด | 36224ES10/60/70/76 | 10มล./100มล./200มล./500มล. |