DSS Modellemenin Gelişim Tarihi

İlaç geliştirme, etkinliği test etmek için hayvan modelleri gerektirir. 50 yılı aşkın geliştirme ve optimizasyonla, çeşitli hayvan modelleri arasında Dekstran Sülfat Sodyum Tuzu (DSS) ülseratif kolit (UC) modeli, inflamatuar bağırsak hastalığının (IBD) etiyolojisi ve patogenezini incelemek için yaygın olarak kullanılmaktadır.

Şekil 1. DSS ülseratif kolit modelinin geliştirilmesi

CUC modelinin özellikleri tarafından inşa edildi DSS

UC'nin birden fazla akut veya kronik semptomu tetiklenebilir, örneğin: ishal, mukus benzeri dışkı, dışkıda gizli kan, belirgin kanlı dışkı, kilo kaybı, aktivite azalması ve kötü tüy rengi, farklı DSS dozlarıyla.

Tablo 1 DSS kolit modelinin histolojik özellikleri

DSS kolit modeli kategorisi

akut kolit modeli

Kronik faz kolit modeli

histolojik değişiklikler

Kolon hiperemisi, ödem, kısalma, kırılganlık, ağırlık-uzunluk oranında artış

önemli ölçüde kısalmış kolon

Çeşitli derecelerde kolon ülserleri

Mukozal kalınlaşma, lenfadenopati

Mukozal ödem, goblet hücre kaybı, kript şişmesi ve yıkımı

kadeh hücre kaybı, kript kaybı

Mukoza ve submukozada farklı derecelerde inflamatuar hücre infiltrasyonu, epitel hücre hasarı

Az sayıda hayvanda adenomatöz polipler ve tümör benzeri değişiklikler

DSS UC Modelinin Avantajları

  1. Protokollerin uygulanması kolaydır.
  2. DSS UC modeli, yüksek tekrarlanabilirlik oranıyla insan UC semptomlarına oldukça benzemektedir.
  3. DSS UC modeline özgü olan uygulanan DSS dozunun kontrol edilmesiyle çeşitli karakteristik semptomlar ortaya çıkarılabilir.
  4. DSS UC modeli, fare, sıçan, zebra balığı, domuz, meyve sineği vb. gibi yaygın olarak kullanılan çeşitli model hayvanlarla oluşturulabilir.
  5. Azoksimetan (AOM)'ın birlikte kullanımıyla IBD kaynaklı kolit ilişkili kanser (CAC) modeli oluşturulabilir.

DSS UC model inşa örneği

  1. Fareler modelDetaylar için tıklayın

1) BALB/c fareleri, dişi, 6-8 hafta, 25 g;

2) %3 DSS içeren steril içme suyu ve 0,22 μm membranlı filtre;

3) DSS 7 gün süreyle uygulandı;

4) Kolon gibi iltihaplar HE boyama sonrası ödem ve konjesyon gözlendi.

Şekil 2 DSS akut kolit kesitlerinin HE boyama sonuçları [1]

  1. Zebra balığı modeliDetaylar için tıklayın
1) Zebra balığı embriyoları doğal yumurtlamadan elde edildi ve döllenmeden sonraki 1. güne (dpf) kadar 28 derecelik bir inkübatörde büyütüldü.5℃'lik devridaim suyunda (60 μg/mL hazır okyanus deniz tuzu) ve 1 dpf'ye kadar metilen mavisi ile desteklenmiştir;
2)1 dpf'den sonra, 3 dpf'ye kadar kültürlemek için metilen mavisi içermeyen E3 embriyo kültür ortamını kullanın;
3)E3 ortamıyla %10 DSS depolama solüsyonu hazırlayın;
4)DSS'yi kültür ortamıyla maksimum öldürücü olmayan doza kadar seyreltin (DSS konsantrasyon referansı: %0,5);
5) Zebrafish'lere 3 dpf'den 6 dpf'ye kadar %0,5'lik DSS uygulandı ve indeksler.

Şekil 3 DSS, zebra balığı karaciğerinde inflamatuar yanıtı tetikler [2]

3.Domuz modeliDetaylar için tıklayın

1) Yorkshire domuz yavruları, yaşlarında 4-5 günler;

2) DSS dozu: 1,25 g/kg, 5 gün süreyle oral yoldan alınır;

3) D-mannitol tutulum oranında artış gözlendi.

Şekil 4 Domuz yavrularında DSS kaynaklı D-mannitol konsantrasyonu kontrol grubundakinden daha yüksekti [3]

4.Drosophila modeliDetaylar için tıklayın

1) Drosophila, dişi, 5-10 günler;

2) Beslenme orta %3 DSS ve 25 μg/mL içeren %5 sakaroz çözeltisi ile hazırlandı bleomisin;

3) Drosophila, kültür şişesinin günlük olarak değiştirilmesiyle 29°C'de üç gün boyunca kültüre edildi;

4) DSS, ISC öncü hücrelerinin çoğalmasını indükledi ve drosophila üzerinde öldürücü etkiye sahipti.

Şekil 5 DSS, Drosophila'da ISC öncü hücrelerinin çoğalmasını sağlar [4] .

5.Colit ile ilişkili kanser(Detaylar için tıklayın

1) BALB/c fareleri, erkek, 7 haftalık;
2)1. günde fareleri tartın ve işaretleyin. Farelere intraperitoneal olarak 10 mg/kg AOM solüsyonu enjekte edin.
3) Fare kafeslerinin içme suyunu suyla doldurun. Fare başına günde 7-10 mL su hesaplayın. Bir hafta boyunca besleyin.
4) İçme suyunu bir hafta boyunca %2,5 DSS ile değiştirin;
5) İki hafta boyunca düzenli içme suyuyla besleyin;
6) 3-4. adımları 3 kez tekrarlayın.

    Şekil 6 CAC'nin şematik diyagramı AOM/DSS tarafından tetiklenen [5] .

    Model değerlendirme kriterleri

    1. Hastalık Aktivite İndeksi ( DAI puanı )

    Model, vücut ağırlığı, dışkı viskozitesi ve gizli kan gibi birden fazla parametre ile değerlendirildi ve bu parametreler aracılığıyla genel DAI oluşturuldu.

    Tablo 2 DAI puanlama kuralları

    Gol

    yüzde kilo kaybı

    dışkı kıvamı

    dışkıda gizli kan

    0

    0

    normal

    Negatif

    1

    %1-5

    yumuşak dışkı

    açık mavi

    2

    %5-10

    mukuslu dışkı

    mavi

    3

    %10-20

    gevşek dışkı

    koyu mavi

    4

    >%20

    \

    iğrenç kanlı dışkı

    1. Histolojik Değişim Puanı

    Yukarıdaki göstergeler için puanlar, akut kolit modeli için lenf nodu oluşumu hariç histolojik değişikliklere dayanarak verildi. Kullanılan HE boyama reaktifleri Cat#60524ES60'tır.

    Tablo 3 Histolojik değişim skoru

    Gol

    Ülser(ler)

    Epitel değişiklikleri

    iltihaplı infiltrat

    lenf düğümü(leri)

    0

    0

    normal

    hiçbiri

    hiçbiri

    1

    1

    kadeh hücre kaybı

    Perikript sızması

    1

    2

    2

    kadeh hücre kaybı

    Muskularis mukozanın infiltrasyonu

    2

    3

    3

    kripto silme

    Muskularis mukozanın genel infiltrasyonu, mukozanın kalınlaşması

    3

    4

    >3

    Geniş kript kaybı veya polipoid rejenerasyon

    submukoza invazyonu

    >3

    1. Kolon uzunluk
    Kronik kolit modelinde kolon uzunluğunun kısalması belirgin bir fenotip iken, akut kolit modelinde benzer değişiklikler 8. günde tespit edilebilmektedir.
      4.Özet

      DSS UC hayvan modeli kullanılarak uygun kontrol ile ön deneyler yapılması önerilir. Grup başına 8-10 hayvan minimum gereksinimdir.

      Bu kaynağa bağlantılar

      [1]Xiaona Gao ve diğerleri. Beslenme Biyokimyası Dergisi 83 (2020) 108438.
      [2]Jing Ma ve diğerleri. Su Ürünleri Yetiştiriciliği ve Balıkçılık (2021) 548–557.
      [3]Connie J. Kim ve diğerleri. Beslenme Biyokimyası Dergisi 21 (2010) 468–475.
      [4]Fangfang Ren, ve diğerleri.PNAS.2010.107 (49) 21064-21069.
      [5]Jia-Rong Huang ve diğerleri. Farmakolojide Sınırlar.2020.11:586885.

        Yeasen DSS ile modelleme için başarılı bir vaka

        Aşağıdaki tabloda gösterildiği gibi, 7 günde Yeasen DSS (Kat#60316ES, MW: 36000~50000) ile başarılı akut kolit modelleri belirgin fenotip ile oluşturulmuştur.

        Tablo 4 DSS ile farklı enterit modellerinin oluşturulması

        Örnek

        Modelleme örnekleri

        Modelleme planı

        Modelleme sonuçları

        Değerlendirmeyi kullan

        akut kolit

        BALB/c fareleri, dişi, 6-8 hafta, 25 g

        3%-5% DSS'yi 7 gün boyunca serbestçe içebilirsiniz

        5. gün ortaya çıktı, kolonun uzunluğu kısaldı, HE boyanması vardı ve iltihap belirgindi

        kalıplama hızı hızlıdır ve zaman kısadır. Akut kolit modelinin özellikleriyle tutarlıdır

        C57BL/6 fareler, erkek, 8 hafta, 20 g

        %3-%5 DSS gavajla, sürekli uygulama

        5. gün meydana gelir, kolon kısalması, kilo kaybı, dışkıda kan, ishal

        Yüksek küf oranı ve kısa süre. Akut kolit modelinin özelliklerine uygun

        kronik kolit

        C57BL/6 fare, erkek, 8 hafta, 22 g

        Gavaj yoluyla %1-2 DSS, sürekli uygulama

        40. gün belirir, kolon kısalması, kilo kaybı, dışkıda kan, ishal

        Yüksek kalıplama oranı. Kronik kolit modelinin özelliklerine uygun

        kolon kanseri

        C57BL/6 fare, erkek, 8 hafta, 21 g

        1%-2% DSS 3 hafta boyunca 5 gün boyunca isteğe bağlı

        14 hafta kolon uzunluğunda kısalma, kilo kaybı, HE lekelenmesi ve belirgin iltihaplanma

        Yüksek kalıplama oranı. Kolon kanseri model özelliklerine uygundur

        FAQ'lar

        Akut DSS kolit modeli veya kronik DSS kolit modeli fark etmeksizin, enteritin şiddeti ve başarısı fare türüne (farklı genetik geçmişlere), DSS konsantrasyonuna ve doz döngüsüne bağlıdır.

        Tablo 5 DSS kolit modellemesinin yaygın sorunları

        olası sorunlar

        olası sebep

        Önerilen çözüm

        farelerde yüksek ölüm oranı

        DSS konsantrasyonu çok yüksek

        Uygulanan DSS konsantrasyonunu azaltın

        Enterit belirtileri olmayan veya düşük düzeyde olan fareler

        DSS konsantrasyonu çok düşük

        DSS dozaj konsantrasyonunu artırın; döngü aralığını azaltın (10-14 gün)

        Aynı fare grubunda enterit belirtileri büyük ölçüde farklılık gösterir

        şişe kapağı tıkalı

        Fare içme şişesini her gün kontrol edin

        Pürün siparişi

        Çok satan bir ürünün fiyatının sadece 1/3'üne ihtiyacı vardır M* aynı verimlilikle, büyük bir stok bulunduruyoruz.

        Pürün Namin

        Amakale Nkoyu kahverengi

        Şartname

        ColitCare™ Dekstran Sülfat Sodyum Tuzu (DSS), Kolit Derecesi MW:36000~50000

        60316ES25/60/76/80

        25 gr/100 gr/500 gr/1 kg

        Azoksimetan (AOM)

        60751ES03/08/10

        1 mg/5 mg/10 mg

        MolSaf® Dışkı DNA Kiti

        18820ES08/50/70

        5 T/50 T/200 T

        MolSaf® Mag48 Toprak/Dışkı DNA Kiti FA

        18528ES48

        48T

        MolSaf®Mag Toprak/Dışkı DNA Kiti

        18526ES20/50/70

        20 T/50 T/200 T

        Hematoksilen ve Eozin Boyama Kiti

        60524ES60

        2×100 mL

        İdrar Dışkıda Gizli Kan Testi Kiti

        60403ES60

        100T

        Alcian Mavi Periyodik Asit-Schiff (AB-PAS) Boyama Çözeltisi

        60534ES50/60

        6×50 mL/6×100 mL/

        PReaktiflerimizle yayınlanmış makaleler

        2024

        [1] Zhong D, Jin K, Wang R, ve diğerleri. Enflamatuar Bağırsak Hastalığı ve İlişkili Anksiyete ve Depresyon için Mikroalg Bazlı Hidrojel. Adv Mater. 2024 Ocak 26:e2312275. doi: 10.1002/adma.202312275. IF=29.4

        [2] Zhang Y, Tu S, Ji X, Wu J, Meng J, Gao J, Shao X, Shi S, Wang G, Qiu J, Zhang Z, Hua C, Zhang Z, Chen S, Zhang L, Zhu SJ. Dubosiella newyorkensis, L-lizinle aktive edilen AhR-IDO1-Kyn yoluyla kolitte bağışıklık toleransını düzenler. Nat Commun. 2024 Şubat 13;15(1):1333. doi: 10.1038/s41467-024-45636-x.IF= 16.6

        [3] Xuan Zhang, Xia Gao, Xiangzhou Yi, ve diğerleri. Ülseratif kolitin etkili bir şekilde önlenmesi için kanabidiol içeren çoklu hedefli inülin bazlı nanopartiküller[J]. Materials Today Bio.2024, 25100965. IF=8.2

        2022

        [1] Mengmeng Xu, Ying Kong, Nannan Chen, ve diğerleri. Aktif Ülseratif Kolitte Bağışıklık İlgili Gen İmzasının Belirlenmesi ve CeRNA Ağının Tahmini[J]. İmmünolojideki Sınırlar.2022; 13: 855645.EĞER=7.561

        [2] Lujuan Xing, Lijuan Fu, Songmin Cao ve diğerleri. LPS kaynaklı RA'da Sığır Kemiği Jelatininden Elde Edilen Peptitlerin Anti-İnflamatuar EtkisiW264.7 Makrofaj Hücreleri ve Dekstran Sülfat Sodyum İndüklenmiş C57BL/6 Fareleri[J]. Besinler 2022, 14, 1479. EĞER=5.717

        [3] Wang S,  Huang J,  Tan KS ve diğerleri.İzosteviol Sodyum, Metabolik Profilleme, Makrofaj Polarizasyonu ve NF-B Yolunun Düzenlenmesi Yoluyla Dekstran Sodyum Sülfat Kaynaklı Kronik Koliti İyileştirir[J].Oksidatif Tıp ve Hücresel Uzun Ömür. 2022,4636618.EĞER=5.076

        [4] YuangengLi, PingYu, WenwenFu, ve diğerleri. Panax ginseng CA Meyer'den elde edilen polisakkaritler, farelerde JAK2/STAT1/NLPR3 inflamasom sinyal yolunu inhibe ederek DSS kaynaklı IBD'yi hafifletti[J].Journal of Functional Foods.2022, 105013.EĞER=4.451

        [5] Lei-NingChen,TaoJing,Zi-BinLin,vd.Fare testislerinin dekstran sülfat sodyum kaynaklı kolite karşı metabolik ve transkriptomik tepkileri[J].Üreme Toksikolojisi.2022, Sayfalar 35-42.EĞER=3.143

        2021

        [1] Li Zhao, Fei Wang, Zhengwei Cai, ve diğerleri. Ülseratif kolit tedavisinde enjekte edilebilir mukoadezif hidrojel ile ilaç kullanım platformunun iyileştirilmesi [J].chemical engineering journal.424(2021)130464.EĞER=16.744

        [2] Lingjun Tong, Haining Hao, Zhe Zhang ve diğerleri. Süt kaynaklı ekstraselüler veziküller, bağırsak bağışıklığını düzenleyerek ve bağırsak mikrobiyotasını yeniden şekillendirerek ülseratif koliti hafifletir[J].Theranostics.2021; 11(17): 8570-8586 EĞER=11.556

        [3] Jingjing Gan, Yuxiao Liu, Lingyu Sun, ve diğerleri. Mikroakışkanlardan oral yoldan uygulanan nükleotid taşıma parçacıkları, inflamatuar bağırsak hastalığının tedavisi için[J].Applied Materials Today.2021 Aralık;25:101231 EĞER=10.041

        [4] JialiDong,YuanLi,HuiwenXiao,vd.Ağız mikrobiyotası, fare modellerinde kolorektal kanser için radyoterapinin etkinliğini ve prognozunu etkiler[J].Hücre raporları.2021, 109886.EĞER=9.423

        [5] Hao H,  Zhang X,  Tong L,  Liu Q ve diğerleri. Lactobacillus plantarum'dan Türetilen Ekstraselüler Veziküllerin Etkisi Farelerde Bağırsak Mikrobiyotası ve Ülseratif Kolit Üzerine S7[J].Frontiers in Immunology.2021.777147 .EĞER=7.561

        [6] Yaohua Fan, Yanqun Fan, Kunfeng Liu, ve diğerleri. Yenilebilir Kuş Yuvası, Th17/Treg Hücre Dengesini Geri Kazandırarak C57BL/6J Farelerinde Dekstran Sülfat Sodyum Kaynaklı Ülseratif Koliti İyileştirir[J]. Farmakolojideki Sınırlar.2021.632602.EĞER=7.561

        2020

        [1] Li, Y., Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M. ve Fan, S. Bağırsak komensal kaynaklı valerik asit radyasyon yaralanmalarına karşı koruma sağlar. Bağırsak Mikropları,.2020 .1–18.EĞER=10.245

        [2] Jia-Rong Huang, Sheng-Te Wang, Meng-Ning Wei, ve diğerleri. Piperlongumin Fare Kolitini ve Kolitle İlişkili Kolorektal Kanseri Hafifletir[J]. Farmakolojideki Sınırlar.2020.586885.EĞER=7.561

        [3] Gao X, Fan W, Tan L, ve diğerleri. Soya izoflavonları, ERα/NLRP3 inflamazom yollarını hedef alarak deneysel koliti iyileştirir[J]. Beslenme Biyokimyası Dergisi, 2020, 83.EĞER=6.048

        Sorgu