Makrofajlar vücudun farklı bölgelerinde benzersiz ve kritik roller oynarlar, ancak hassas makrofaj uzaklaştırma, makrofajların belirli alanlardaki belirli işlevlerini ve hastalık gelişimi üzerindeki etkilerini daha iyi incelemek için önemli bir araştırma aracı haline gelmiştir. Clodronate Liposomlar, makrofaj uzaklaştırma için en kanıtlanmış, uygun maliyetli ve ideal araçlardan biridir. Clodronate Liposomlar, makrofajları farklı dokulardan uzaklaştırmak için intraperitoneal olarak, kuyruk damarına ve çeşitli diğer yollarla uygulanabilir.

Aşağıda, araştırmacılar için faydalı referanslar ve başvuru kaynağı sağlamayı umarak, makrofajların farklı bölgelerden uzaklaştırılmasının yöntem ve etkinliğini gösteren bir dizi konuyu paylaşacağız.

Enjeksiyon yöntemlerinin tanıtımı

Kuyruk damar enjeksiyonu

Kuyruk damarına yapılan enjeksiyon 24 saat sonra maksimum tükenmeye ulaşır. Tespit zamanına dikkat edilmelidir.

1、Fareleri ters çevrilmiş bir öğle yemeği kutusuna yerleştirin, kuyruğu delikten çıkarın, iki tane var atardamarlar ve üç farelerin kuyruğundaki damarlar, iki atardamarlar kuyruğun dorsal ve ventral taraflarındadır ve üçü damarlar zikzak şeklinde dağılmış olup, genellikle damarların sağ ve sol tarafları kullanılır;

2、Gazlı bezi yaklaşık 70℃ ılık suya batırın (veya alkole batırın), çıkarın ve kuyruğu sarın, böylece kuyruğun vazodilatasyonu ve epidermal keratinin yumuşatılması amacına ulaşılır;

3、Kuyruk intravenöz enjeksiyonu için, sıçanın kuyruğunu aşağı bastırmadan önce ve sonra sol baş parmak ve işaret parmağı ile, yaklaşık 2 cm'lik bir bölüm bırakarak, deri gergin, damarlar daha dolu olacak şekilde, sağ el 1 mL iğne şırıngası tutarak, iğne ve damar paralel (30°'den az açı) olacak şekilde, kuyruğun alt 1/4'ünden iğneye doğru, ilacın enjeksiyonunun başlangıcı yavaş ve dikkatli olmalıdır, eğer direnç yoksa, beyaz dermatomlar görünmüyorsa, kan damarlarının delinmiş olduğu ve ilaçların Resmi enjeksiyonu yapılabileceği anlamına gelir.

4、Bazı deneyler birkaç gün boyunca tekrarlanan kuyruk damarı enjeksiyonu gerektirir, enjeksiyon yeri mümkün olduğunca kuyruk ucundan başlamalı ve sırayla kuyruk köküne doğru hareket etmeli ve enjeksiyon için damar pozisyonunu değiştirmelidir. İğneyi çıkardıktan sonra, enjeksiyon yerine 1 saniye boyunca bir pamuk topuyla bastırın - Kanamayı durdurmak için 2 dakika.

İntraperitoneal enjeksiyon

İntraperitoneal enjeksiyon 48 saat sonra maksimum azalmaya ulaşır - 72 saat. Zaman noktalarının tespitine dikkat edilmelidir.

1、Öncelikle fareleri yakalamak için dorsal balyalama yöntemini kullanın, böylece başları hafifçe arkaya doğru eğilir ve karınları yukarı bakar, farenin sol arka bacağı serçe parmakla sabitlenir ve ardından enjeksiyon yeri %75 alkollü pamuk topuyla sterilize edilir.

2、Farelerde intraperitoneal enjeksiyonun yeri 0,5'tir Alt karın orta çizgisinin her iki yanında cm (uyluk köküyle aynı hizada). Organlara zarar vermemek için, fareyi çıkarırken farenin başı arkaya doğru eğilmeli, böylece alt karın organları yukarı doğru hareket etmelidir.

3、Şırınga iğnesini deriye batırın, deri altı bölgeye girin, iğneyi deri altı bölge boyunca 2 saniye boyunca ileri doğru itin - 3 mm ve daha sonra iğne ile deri arasında 45 derecelik bir açıyla farenin karın boşluğuna batırılır. Not: Peritonu deldikten sonra iğne ucunun direnci kaybolur.

4、İğne tıpasını geri çekin, kan veya sıvı geri dönmezse ilaç enjekte edilebilir.

5、Enjeksiyondan sonra iğneyi yavaşça döndürün, ardından sıvı sızıntısını önlemek için şırıngayı yavaşça dışarı çekin.

Ayrıca farklı çalışma alanları için farklı enjeksiyon yöntemleri de olacak: deri altı enjeksiyon, trakeal uygulama, intrakraniyal enjeksiyon vb. Deney yapmadan önce ilgili literatüre başvurmalı ve Yeasen teknik ekibine danışmalısınız.

Dozaj döngüsü ve dozaj

Kısa süreli uygulama: 200 µL klorofosfat lipozomlarının tek bir enjeksiyonu (20 - Makrofaj temizleme verimliliğini tespit etmek veya ileri seviye deneyler için belirli bir zamanda 25 g ağırlığındaki numuneler kullanılır.

Uzun vadeli uygulama: Makrofaj temizliğini sağlamak için bir haftadan fazla veya daha fazla süre gerekir. Örneğin WT farelerinde 200 µL (20 - 25 g ağırlığında) genellikle ilk doz olarak verilir, ardından 200 µL verilir her 2 - 3 günde bir.

Referans test protokolü

Organ/Makrofaj

Dozaj (20-25g/fare)

Dalak/Kırmızı pulpa makrofajları

Tek doz: 200 µL/fare (IV veya IP).
Uzun vadeli tükenme: İlk doz 200 µL/fare, ardından 2 - 3 günlük aralıklarla 200 µL/fare

Karaciğer/Kuffer hücreleri

Tek doz: 200 µL/fare (IV veya IP).
Uzun vadeli tükenme: İlk doz 200 µL/fare, ardından 2 - 3 günlük aralıklarla 200 µL/fare

Akciğer/alveolar makrofajlar

En iyi sonuçlar intratrakeal veya intranazal (50 µL) ile birlikte IV (150-200 µL) ile elde edilir.

lenf düğümü

Enjeksiyon (100-200 µL)/fare, spesifik doz rejimleri literatürde bulunabilir.

Beyin/mikroglia

Beyin omurilik sıvısına intraserebroventriküler giriş, 10 µL/fare, 50 µL/sıçan.

Kan/Monositler

150-200 µL/fare (IV), Maksimum tükenme oranına 24 saat içinde ulaşılır, ancak 1 - 7 gündeki maksimum tükenme oranı suşa bağlıdır.

Not: Yukarıdaki bilgiler sadece referans amaçlıdır, lütfen deney yapmadan önce ilgili literatüre bakın ve Yeasen teknik ekibine danışın.

Ürün Önerisi

Ürün adı

Ürün numarası

Şartname

Klodronat Lipozomları (Vrije Universiteit Amsterdam'dan)

40337ES08

5 ml

40337ES10

10 ml

Kontrol Lipozomları (PBS)

40338ES08

5 ml

40338ES10

10 ml

Sorgu