Hücre kültürü, ilaç geliştirmeden gen terapisine kadar birçok araştırma uygulamasının temel taşıdır. Ancak, doğru yaklaşım ve araçlar olmadan sağlıklı, çoğalan kültürleri sürdürmek zor olabilir. İster deneyimli bir bilim insanı olun, ister hücre kültürüne yeni başlayan biri olun, sürecin her adımını optimize etmek büyük fark yaratabilir. Bu kılavuzda, sindirimden kontaminasyon önlemeye kadar hücre kültürlerinizin gelişmesini sağlamak için beş temel ipucuyla size yol göstereceğiz.
1. Hücre Sindiriminizi Mükemmelleştirin
Hücre sindirimi, hücre kültürü deneylerinde hücrelerin kültür yüzeyinden ayrılmasını ve alt kültürleme ve sonraki analizler için tek hücre süspansiyonuna ayrılmasını kolaylaştıran önemli bir adımdır. Doğru sindirim enzimini seçmek, hücre ayırma verimliliğini artırabilir, hücre hasarını azaltabilir ve sorunsuz deneysel ilerlemeyi sağlayabilir. İhtiyaçlarınıza en uygun sindirim enzimini seçmenize yardımcı olmak için, yaygın olarak kullanılan birkaç enzim ürünü ve özellikleri hakkında bir kılavuz derledik. Hücre türüne, deneysel gereksinimlere ve alt akış uygulamalarına göre en uygun ürünü seçebilirsiniz.
Yaygın sindirim enzimleri
- Tripsin (hücreler arası proteinleri hidrolize etmek için kullanılır)
- Rekombinant Tripsin (hayvansal kökenli kontaminasyondan ari, biyofarmasötik uygulamalara uygun)
- Kolajenaz (kollajen liflerini parçalamak için kullanılır, doku sindirimi için idealdir)
- Kompozit Tripsin (hücre yüzey antijenlerini daha iyi koruyan Accutase gibi)
- Tripsin alternatifleri (örneğin serumsuz hücre kültürleri için mükemmel olan TrypLE™)
- Dispase II (çeşitli doku ve hücreleri ayırmak için).
Her enzimin kendine özgü uygulamaları ve avantajları vardır ve doğru olanı seçmek deneysel verimliliği ve sonuçlarınızın kalitesini önemli ölçüde artırabilir.
Ürün adı | Kedi numarası | Şartname |
Mükemmellik™l Tripsin-EDTA (%0,25), HAYIR Fenol kırmızısı | 40123ES60 | 100 ml |
PerfHücre™ Tripsin-EDTA yok (%0,25), fenol kırmızısı yok | 40124ES60 | 100 ml |
PerfHücre™ Tripsin (%0,25), fenol kırmızısı | 40126ES60 | 100 ml |
PerfHücre™ Tripsin-EDTA (0.%25), Fenol kırmızısı | 40127ES60 | 100 ml |
Tripsin 1:250(toz) | 40101ES25 | 25 gr |
PerfHücre™ Rekombinant Tripsin(toz) | 40512ES10/60 | 10 mg/100 mg |
20416ES60 | 100 μG | |
PerfCel Tryzyme™ Ekspres Enzim (1X), Fenol Kırmızısı | 40134ES60 | 100 ml |
PerfCel Tryzyme™ Ekspres Enzim (1X), HAYIR Fenol Kırmızısı | 40135ES60 | 100 ml |
ACCUTASE Hücre Ayrıştırma Çözeltisi | 40506ES60 | 100 ml |
Dağılma II | 40104ES60/80 | 100 mg/1 gr |
2. İdeal Kültür Ortamını Yaratmak
Sağlıklı bir kültür doğru ortamla başlar. Buna uygun sıcaklık, pH ve hücre tipiniz için en uygun ortam dahildir. Yeasen, çeşitli hücre hatlarını desteklemek için özel olarak formüle edilmiş bir dizi Hücre Kültürü Ortamı sunar ve onlara ihtiyaç duydukları temel besinleri ve büyüme faktörlerini sağlar.
Serumsuz hücre kültürü Biyolojik araştırmalarda tekrarlanabilirliği, tutarlılığı ve etik standartları garanti eden temel bir teknoloji olarak ortaya çıkmıştır. Geleneksel hücre kültürleri, deneysel sonuçlarda değişkenlik ve hayvansal kökenli etik riskler getiren fetal sığır serumuna (FBS) dayanır. Bu zorlukları ele almak için birçok araştırmacı giderek daha fazla serumsuz kültür ortamını tercih ediyor.
İmmünolojik araştırmalarda, lenfosit kültürü özellikle bağışıklık tepkisi, aşı geliştirme ve kanser immünoterapisi alanlarında önemli bir rol oynar. Bağışıklık sisteminin merkezi bileşenleri olarak, lenfositler in vitro çoğalmak ve aktive olmak için belirli kültür koşullarına ihtiyaç duyar. Yeasen, lenfosit çoğalması ve aktivasyonu için özel olarak tasarlanmış, in vivo bağışıklık tepkilerini doğru bir şekilde simüle edebilen ve araştırmacıların T hücresi aktivasyonu, antikor üretimi ve hücresel immünoloji araştırmalarında daha güvenilir veriler elde etmesine yardımcı olabilen kültür ortamları sağlar.
Ek olarak, organoid kültür hücre kültürü teknolojisinde bir diğer önemli gelişmeyi temsil eder. Organoidler, insan dokularını ve organ fonksiyonlarını in vitro simüle edebilen üç boyutlu hücresel yapılardır ve hastalık modelleme, ilaç taraması ve rejeneratif tıp için yeni bir araştırma platformu sağlar. Organoidlerin üç boyutlu yapısı, insan organlarının karmaşıklığını ve fizyolojik fonksiyonlarını daha iyi taklit eder ve organ gelişimi, hastalık mekanizmaları ve terapötik tepkileri incelemek için önemli bir araç haline gelmiştir.
Ürün adı | Kedi numarası | Şartname |
CelCulSF™ Böcek Hücre Kültürü Ortamı(Serumsuz) | 40140ES | 1000 mL |
CelCulSF™ 293 Hücre Kültürü Ortamı(Serumsuz) | 40141ES | 1000 mL |
CelCulSF™ Lenfosit Kültür Ortamı(Serumsuz) | 40142ES | 1000 mL |
CelCulSF™ Hibridoma Hücre Kültürü Ortamı(Serumsuz) | 40143ES | 1000 mL |
CelCulSF Mezenkimal Kök Hücre(Yüksek Lisans)Kültür Ortamı(Serumsuz) | 40144ES | 500 ml |
CelCulSF™ Yapışkan Hücre Kültürü Ortamı(Serum azaltılmış) | 40145ES | 1000 mL |
Cebrary® Bağırsak Organoid Büyüme Ortamı (Fare) | 41426ES60/76 | l00/500 mL |
Cebrary® Bağırsak Kanseri Organoid Büyüme Ortamı (İnsan) | 41427ES50/60/76 | 50/100/500 mL |
Cebrary® Mide Kanseri Organoid Büyüme Ortamı (İnsan) | 41428ES50/60/76 | 50/100/500 mL |
Cebrary® Karaciğer Kanseri Organoid Büyüme Ortamı (İnsan) | 41429ES50/60/76 | 50/100/500 mL |
Cebrary® Meme Kanseri Organoid Büyüme Ortamı (İnsan) | 41430ES50/60/76 | 50/100/500 mL |
Cebrary® Akciğer Kanseri Organoid Büyüme Ortamı (İnsan) | 41431ES50/60/76 | 50/100/500 mL |
Cebrary® Yemek borusu Kanser Organoid Büyüme Ortamı (İnsan) | 41432ES50/60/76 | 50/100/500 mL |
Cebrary® Yumurtalık kanseri Organoid Büyüme Ortamı (İnsan) | 41433ES50/60/76 | 50/100/500 mL |
Cebrary® Pankreas kanseri Organoid Büyüme Ortamı (İnsan) | 41434ES50/60/76 | 50/100/500 mL |
3.Yüksek Kaliteli Gen İfadesi için Verimli Transfeksiyon
Hücre transfeksiyonu, gen ifadesi, susturma veya fonksiyonel çalışmalar için hücrelere ekzojen nükleik asitlerin (DNA, mRNA, siRNA ve miRNA gibi) sokulmasını sağlayan, biyomedikal araştırmalarda önemli bir tekniktir. Çeşitli hücre tipleri ve nükleik asitler ile doğru transfeksiyon reaktifinin seçilmesi başarılı deneyler için önemlidir.
Kimyasal transfeksiyon reaktifleri, şunları içerir: lipozomal, PEI ve kalsiyum fosfat bazlı formülasyonlarHer biri kendine özgü avantajlar sunuyor. Yeasen Biology, DNA, siRNA, miRNA ve mRNA için yüksek verimli transfeksiyon dahil olmak üzere çeşitli transfeksiyon uygulamaları için optimize edilmiş çeşitli bir ürün yelpazesi geliştirdi ve 40'tan fazla hücre hattında doğrulanmış başarıya ulaştı. Bu reaktifler, yüksek transfeksiyon verimliliği, geniş uygulama senaryoları ve ticari üretim için GMP sınıfı ürünler sunarak araştırma ve endüstriyel uygulamalarda güvenilir ve etkili sonuçlar sağlar.
Kedi numarası | Ürün adı | Nükleik asit | Başvuru |
40802ES | DNA | Yüksek performanslı lipozom transfeksiyon reaktifi | |
40804ES | Yüksek gerilim | Lentiviral enfeksiyon yeteneğini arttırır. | |
40806ES | siRNA, miRNA, ASO | Yüksek baskılama etkinliğine sahip siRNA ve miRNA'ya özgü transfeksiyon reaktifleri. | |
40808ES | DNA, siRNA, miRNA | Çeşitli hücre tiplerinde DNA ve RNA transfeksiyonları gerçekleştirebilen ve transfeksiyonu zor hücrelerde bile iyi etkiler gösteren yükseltilmiş lipozom transfeksiyon reaktifi. | |
40809ES | mRNA | Çeşitli hücre tiplerinde yüksek transfeksiyon verimliliğine sahip mRNA-spesifik transfeksiyon reaktifi. | |
40815ES | DNA | Protein ekspresyonu ve viral paketleme (toz form) için yaygın olarak uygulanabilir. | |
40816ES | Hieff Trans® Polietilenimin Doğrusal (PEI) MW40000(hızlı lizis) | DNA | |
40820ES | DNA | AAV ve LV viral paketleme için daha yüksek verim elde edebilen, viral paketleme için özel transfeksiyon reaktifleri | |
40821ES | DNA | ||
40823ES | DNA | En yüksek transfeksiyon verimliliği. Özellikle süspansiyon kültüründe AAV üretimi için uygundur ve daha yüksek çıktılar sağlar. |
4. Hücrelerinizi Uzun Vadeli Kullanım İçin Kriyoprezervasyon
Hücre dondurma, hücrelerin uzun süreli korunması için önemli bir tekniktir ve kontaminasyonu önleme, deneysel tutarlılığı koruma, nakliyeyi kolaylaştırma ve hücre bankaları kurma gibi amaçlara hizmet eder. Dondurma sırasındaki birincil riskler şunlardır: buz kristali oluşumu ve çözelti hasarıBu riskleri azaltmak için yavaş dondurma ve hızlı çözme protokollerini kullanmak esastır. Gliserol veya dimetil sülfoksit (DMSO) gibi kriyoprotektanlar genellikle buz kristali oluşumunu ve ozmotik stresi azaltmak için kullanılır.
Yeasen, iki özel kriyoprezervasyon çözümü sunar: Memeli hücreleri için CellStore Dondurma ve böcek hücreleri için Böcek Hücre Depolama Dondurma. Her iki ürün de karmaşık soğutma prosedürleri olmadan -70°C'de doğrudan dondurmaya izin veren ve özellikle DMSO'ya duyarlı veya kümeleşme eğiliminde olan hücreler için çözülme sırasında yüksek hücre sağkalım oranları sağlayan benzersiz formüllere sahiptir. Bu çözümler serum veya protein bileşenlerinden arındırılmıştır, sığır kaynaklarından kontaminasyon olmamasını sağlar ve serumsuz kültürler için idealdir.
Ürün adı | Kedi numarası | Şartname |
Memeli Hücre Deposu Dondurma | 40128ES50 | 5×10 mL |
Memeli Hücre Deposu Dondurma | 40128ES60 | 100 ml |
Böcek hücresi Depolama Dondurma | 40129ES50 | 5×10 mL |
Böcek hücresi Depolama Dondurma | 40129ES60 | 100 ml |
Serumsuz Hücre Dondurma Ortamı | 40151ES | 50 mL/100 mL |
Serumsuz Hücre Dondurma Ortamı (DMSO'suz) | 40152ES | 100 ml |
Serumsuz Hücre Dondurma Ortamı (Kök Hücreler İçin) | 40153ES | 100 ml |
Serumsuz Hücre Dondurma Ortamı (Kök Hücreler İçin, DMSO İçermeyen) | 40154ES | 100 ml |
5. Sağlıklı Kültürler İçin Kontaminasyonu Önleme
Kontaminasyon, hücre kültüründe yaygın bir sorundur ve sıklıkla tehlikeye atılmış sonuçlara ve boşa harcanan araştırma zamanına yol açar. Çeşitli kontaminasyon tiplerini tanımak, etkili önleme ve iyileştirme için önemlidir.
Ortak hücre kirleticiler
- Bakteriler
- Mantarlar
- Mikoplazma
- Protozoa
- siyah noktalar
- Virüsler
- türler arası
Önleyici tedbirler arasında antibiyotik kullanımı, ekipmanın düzenli dezenfeksiyonu, steril tekniklere uyulması ve çalışma alanlarının temiz tutulması yer alır. Kirlenme tespit edildiğinde, nadir veya değerli olmadıkları sürece etkilenen kültürlerin atılması genellikle tavsiye edilir; bu gibi durumlarda, kirleticiyi ortadan kaldırmak için adımlar atılmalıdır. Yedek hücre hatları oluşturulması veya yeni kültürler edinilmesi önerilir.Belirli durumlarda, belirli kirleticileri hedef alan özel tedaviler hücre kültürlerinin geri kazanılmasına yardımcı olabilir. Uygun hijyeni korumak, ekipmanların sıkı bir şekilde ayrılmasını sağlamak ve steril bir ortamı sürdürmek, kontaminasyonu önlemek ve başarılı hücre kültürü deneyleri sağlamak için çok önemlidir.
Tip | Ürün adı | Kedi numarası | Şartname |
Antibakteriyel | Penisilin-Streptomisin (100×), Hücre Kültürü İçin Uygun | 60162ES76 | 100 ml |
60230ES07/60 | 3.2/100 gr | ||
Gentamisin Sülfat Tuzu | 60214ES03/08/25 | 1/5/25 gr | |
Metronidazol | 60223ES25/60 | 25/100 mg | |
Antifungal | Amfoterisin B | 60238ES01/03 | 100 mg/1 gr |
Nistatin | 60219ES08 | 5 gr | |
60231ES03/08 | 1/5 mg | ||
Mikoplazma Tespiti | 40601ES10/20 | 10 /20 deneme | |
40612ES25/60 | 25/100T | ||
Mikoplazma Temizleme | Benim Uzakta™ Sprey (Kullanıma hazır) | 40605ES02/03/08 | 1/2/10×500 ml |
Benim Uzakta™ Tedavi (1000)×) - Mikoplazma Eliminasyon Reaktifi | 40607ES03/08 | 1/5 mL | |
Benim Uzakta™ Profilaktik (2000)×) - Mikoplazma Önleme Reaktifi | 40608ES03/08 | 1/5 mL | |
40609ES60 | 100 ml | ||
40610ES60 | 100 ml |
Çözüm
Güvenilir ve tekrarlanabilir sonuçlar elde etmek için hücre kültürü süreçlerinin optimize edilmesi kritik öneme sahiptir.Sindirim için doğru enzimleri seçmekten kontaminasyonu önlemeye kadar, iş akışındaki her adım önemlidir. Yeasen'in yüksek kaliteli reaktiflerini ve tekniklerini dahil ederek daha sağlıklı, daha üretken hücre kültürleri elde edebilir, daha başarılı deneylere ve araştırma sonuçlarına ulaşabilirsiniz.
Daha Fazlasını Öğrenmek İster misiniz?
Ayrıntılı ürün kılavuzları ve hücre kültürü iş akışlarınızı iyileştirmek için daha fazla çözüm için web sitemizi ziyaret edin. Enzimlere, medyaya, transfeksiyon reaktiflerine veya kontaminasyon kontrolüne ihtiyacınız olsun, Yeasen gelişen hücre kültürleri için ihtiyacınız olan her şeye sahiptir.
Daha fazla bilgi veya satın alma için şu adresi ziyaret edin: resmi web sitesi.