İzotermal nükleik asit amplifikasyon teknolojisi, farklı amplifikasyon prensiplerine göre birçok türe ayrılabilir. En yaygın ve geniş çapta uygulanan yöntem, 2000 yılında Notomi de dahil olmak üzere Japon bilim insanları tarafından geliştirilen Döngü Aracılı İzotermal Amplifikasyon (LAMP) teknolojisidir. LAMP'ın teknik özelliği, hedef gen üzerindeki altı bölgeyi hedefleyen dört primerin tasarımıdır ve amplifikasyon reaksiyonunu sabit 60~65°C sıcaklıkta yürütmek için bir iplik yer değiştiren tip Bst DNA polimerazı kullanır. Bu, 109-1010-15-60 dakika içinde kat kat amplifikasyon.
Bst DNA polimerazı, LAMP izotermal amplifikasyon teknolojisindeki temel enzimdir. Güçlü termal stabiliteye, iplik yer değiştirme aktivitesine ve polimeraz aktivitesine sahiptir ve sabit sıcaklık koşulları altında şablonun hızlı, etkili ve spesifik amplifikasyonunu sağlar. Amplifikasyon için termal denatürasyon döngüleri gerektiren PCR'nin aksine, tüm LAMP deneyi bu tür döngülere ihtiyaç duyulmadan bir saat içinde tamamlanabilir.
Ürün Avantajları
Liyofilizasyona uygun, gliserol içermeyen enzim
Ortam sıcaklığında taşıma, maliyetleri düşürüyor
Güçlü iplik yer değiştirme aktivitesi, hassas ve kararlı
Hızlı rehidrasyon, kullanımı kolay
Performans Öne Çıkanlar
01 Floresan Boya Yöntemi Uygulaması
1、Yüksek duyarlılık ve iyi özgüllük
RT-LAMP floresan boya amplifikasyon sisteminde, liyofilize toz kek 14405ES'nin amplifikasyon performansı, sıvı Bst enziminin (gliserol ve gliserolsüz dahil) amplifikasyon performansıyla tutarlıdır ve her ikisi de 50 kopya/T duyarlılıkta %100 tespit edebilir. Özgüllük iyidir ve NTC'nin (Negatif Şablon Kontrolü) 48 kuyusunda tespit yoktur.
2、İyi termal hızlandırılmış kararlılık
RT-LAMP floresan boya amplifikasyon sisteminde, liyofilize toz sırasıyla 7 gün boyunca 45°C'de, 15 gün boyunca 45°C'de ve 19 gün boyunca oda sıcaklığında depolama işlemlerine tabi tutuldu. Termal hızlandırmadan sonra, ürün performansı gliserol içermeyen Bst enziminin sıvı versiyonuyla tutarlı kaldı ve NTC'de (Negatif Şablon Kontrolü) hiçbir tepe gözlenmedi.
3、Hızlanmadan sonra yeniden dondurmayı destekler
RT-LAMP floresan boya amplifikasyon sisteminde, liyofilize toz sırasıyla 7 gün boyunca 45°C'de ve 15 gün boyunca 45°C'de depolama işlemlerine tabi tutuldu. Termal hızlandırma işleminden sonra liyofilize toz daha sonra ikinci bir liyofilizasyon turuna tabi tutuldu (tek enzim ve RT-LAMP reaktifleri dahil). Deneyler, hızlandırılmış işlemden ve ikinci liyofilizasyondan sonra ürün performansının gliserol içermeyen Bst enziminin sıvı versiyonuyla tutarlı kaldığını ve NTC'de (Negatif Şablon Kontrolü) hiçbir tepe gözlemlenmediğini göstermektedir. Ürünün kararlılığı iyidir ve ikincil liyofilizasyonu ve ikincil liyofilizasyondan sonra hızlanmayı desteklemektedir.
02 pH Kolorimetrik Yöntem Uygulaması
1、Yüksek duyarlılık ve iyi özgüllük
RT-LAMP pH kolorimetrik amplifikasyon sisteminde, liyofilize toz keki 14405ES'nin amplifikasyon duyarlılığı 50 kopya/T'ye (yüzde 100 tespit oranı) ulaşabilir ve özgüllüğü iyidir, NTC'nin (Negatif Şablon Kontrol) 24 kuyusunda tespit yoktur.
2、İyi termal hızlandırılmış kararlılık
RT-LAMP pH kolorimetrik amplifikasyon sisteminde, liyofilize toz 14405ES'nin termal hızlandırılmış kararlılığı 15 gün boyunca 45°C'de, hızlandırma sonrası ikincil liyofilizasyon sonrası kararlılığı (7 gün boyunca 45°C'de hızlandırma sonrası rehidrasyon) ve rehidrasyon sonrası depolama kararlılığı (rehidrasyondan sonra 7 gün boyunca -20°C'de saklandı) araştırıldı. Deneyler, 14405ES ürününün termal hızlandırma sonrası ürün performansı üzerinde hiçbir etkisi olmadan iyi bir kararlılığa sahip olduğunu ve hızlandırma sonrası ikincil liyofilizasyonu desteklediğini göstermektedir.
Öne Çıkan Ürün Önerileri
| Ürün Türü | Ürün Fonksiyonu | Ürün Adı | Ürün Numarası |
| RT-LAMP Karışımı | Floresan Boya | RT-LAMBA Boya Deneme Kit (UDG) Artı) | 13762ES |
| pH Göstergesi | RT-LAMBA pH Hassas Boya maddesi Kit | 13906ES | |
| Liyofilize Edilebilir pH İndikatörü | RT-LAMBA pH Hassas Boya Kromojenik Sürüm Dondurularak kurutulabilir Kit | 13920ES | |
| Bst Enzim | Gliserol | Hieff® En iyi Artı DNA Polimeraz (40 (U/μL) | 14402ES |
| Gliserol içermez | Dondurularak kurutulmuş En iyi Artı DNA Polimeraz (60 U/μL，Gliserol İçermez) | 14405ES | |
| Tampon | Temel Tampon (boya vb. içermeyen) | 10× Hieff® En iyi Artı DNA Polimeraz Tampon | 15441ES |