Son yıllarda moleküler biyoloji tekniklerinin hızla gelişmesiyle birlikte, Nükleik asit bazlı tanı yöntemleri, insan hastalıklarının laboratuvar testlerinde kapsamlı bir şekilde kurulmuş ve yaygın olarak uygulanmıştır. Diğer nükleik asit amplifikasyon teknikleriyle karşılaştırıldığında, izotermal amplifikasyon hızlı, etkili ve spesifik olma avantajlarını sunar ve özel ekipman gerektirmez. Bu nedenle, ortaya çıktığı günden bu yana, birçok bilim insanı tarafından PCR ile potansiyel olarak rekabet edebilecek bir tespit yöntemi olarak kabul edilmiştir.

Sonuç olarak, izotermal amplifikasyon teknolojisine dayalı tanı cihazları ve kitlerinin geliştirilmesi ve uygulanmasının, moleküler tanı alanında Nokta Hasta Testi (POCT) için yeni bir yön oluşturacağına inanılmaktadır.

Ana Akım İzotermal Amplifikasyon Teknolojilerinin Prensiplerine Giriş

1、Döngü Aracılı İzotermal Amplifikasyon

(LAMP) Teknolojisi

İlke：Döngü aracılı izotermal amplifikasyon (LAMP), zincir yer değiştirme aktivitesine sahip Bst DNA polimerazını kullanır. Hedef genin altı bölgesini hedefleyen dört tip spesifik primer tasarlar ve izotermal koşullar altında hedef dizinin etkili, hızlı ve spesifik amplifikasyonunu sağlar. Amplifikasyon, 60-65°C sabit sıcaklıkta ve 15-60 dakika içinde 10⁹ 10'a kadar¹⁰ zamanlar elde edilebilir.

Avantajları ve Uygulamaları：Dolayı hızlı tepkisi, yüksek özgüllüğü, basit ve kullanımı kolay ekipmanı ve yorumlanması kolay sonuçları, izotermal amplifikasyon, tespitinde uygulandı patojen bakteriler, parazitler, virüsler, hastalıklar ve genetiği değiştirilmiş ürünlerAyrıca klinik bulaşıcı hastalık tanısı, çevresel izleme, gıda güvenliği ve diğer alanlarda yaygın olarak kullanılması bekleniyor. Moleküler Bakım Noktası Testi için uygun ideal bir yöntem haline geldi (POCT) platformları.

Sınıflandırma：LAMP tespit yöntemleri türbidimetri, pH indikatör yöntemleri, floresan boyama yöntemleri (NHB, kalsein, SYBR Green, Syto vb.) ve floresan prob yöntemleri olmak üzere çeşitli türlere ayrılır.

2、Rekombinaz Polimeraz Amplifikasyon (RPA) Teknolojisi

İlke：Rekombinasyon enzimi, primerlere bağlandığında, çift sarmallı DNA içinde homolog dizileri arayabilen bir protein-DNA kompleksi oluşturur. Primerler homolog dizileri bulduktan sonra, bir zincir değişim reaksiyonu meydana gelir ve bu da DNA sentezinin oluşumuna ve başlatılmasına yol açar ve bu da şablondaki hedef bölgeyi üssel olarak çoğaltır. Yerinden oynatılan DNA zinciri, daha fazla yer değiştirmeyi önlemek için tek sarmallı bağlayıcı (SSB) proteine ​​bağlanır. Bu sistemde, bir sentez olayı, öncelikle rekombinasyon, Bsu enzimi ve SSB proteininin aktivitelerine dayanan iki zıt primer tarafından başlatılır. Teknoloji, 37 ila 42°C arasındaki sıcaklıklarda 10-30 dakika içinde ilgi duyulan hedefin hızlı bir şekilde tespit edilmesini sağlayabilir.

Avantajları ve Uygulamaları：RPA övünüyor yüksek hassasiyet, güçlü özgüllük, özel ekipmana düşük bağımlılıkve çeşitli tespit formatlarını entegre etme yeteneği. Özellikle taban seviyesinde ve saha ortamlarında bakım noktası testleri için uygundur. RPA, in vitro tanı, hayvan hastalıkları, gıda güvenliği, biyogüvenlik, tarım ve diğer alanlarda yaygın olarak uygulanabilir.

Sınıflandırma：RPA tespit yöntemleri jel elektroforezi, EXO prob yöntemi, Fpg prob yöntemi, yanal akışlı ölçüm çubuğu (LF-RPA) ve flokülasyon analizi gibi çeşitli türlere ayrılır.

Ürün Performans Vitrini

01 pH Hassas Boya RT-LAMP Reaktifleri

pH Duyarlı Boya RT-LAMP, sabit sıcaklıktaki su banyosu veya standart bir PCR makinesi kullanılarak tek adımlı RNA nükleik asit amplifikasyonunu tamamlamak için 60-65℃ izotermal koşullar altında hassas bir gösterge olarak görsel bir boya kullanır. Sadece 30 dakikada, reaksiyondan sonraki renk değişimi, daha sezgisel sonuçlarla (pozitif turuncu-sarı, negatif macenta) bir patojen enfeksiyonunun mevcut olup olmadığını belirlemek için kullanılabilir. Bu yöntem, büyük popülasyonların hızlı bir şekilde test edilmesi için uygundur.

Önerilen Ürünler：

RT-LAMP pH Hassas Boyarmadde Kiti（13906ES）
RT-LAMP pH Hassas Boya Kromojenik Versiyon Dondurularak Kurutulabilir Kit（13920ES）

Performans Sergisi：

1.RT-LAMP/RPA karışımı Seçim Kılavuzu

Ürün Sınıflandırması	RT-LAMP karışımı			RPA karışımı
Ürün Adı	RT-LAMP Boya Analizi Kiti (UDG plus)	RT-LAMP pH Hassas Boyarmadde Kiti	RT-LAMP pH Hassas Boya Kromojenik Versiyon Dondurularak Kurutulabilir Kit	Hızlı Sigorta Amplifikatörü
Ürün Ürün Numarası	13762ES	13906ES	13920ES	16702ES
Ürün Kategorisi	Floresan Boya	pH Hassas Boya	pH Hassas Boya	Sondaj
Ürün Bileşenleri	2 bileşen Tampon、Enzim karışımı	3 bileşen Tampon、RT Enzimi、Bst Enzimi	4 bileşen Tampon、RT Enzimi、Bst Enzimi、Lyoprotektan	4 bileşen Tampon、Enzim karışımı、Magnezyum Asetat
Dondurarak Kurutma Destekli	HAYIR	Evet, Liyoprotektan olmadan	Evet,Lyoprotektan içerir	HAYIR

2.LAMP/RT-LAMP Enzim Seçim Kılavuzu

Ürün Sınıflandırması	Bst Enzim		Ters Transkriptaz		UDG Enzimi
Ürün Adı	Bst Artı	Liyofilize Bst Plus	Ⅲ Ters Transkriptaz	III Ters Transkriptaz, Gliserol içermez	Udg	UDG, Gliserol İçermez
Ürün Ürün Numarası	14402ES	14405ES	11111ES	11297ES	14455ES	14001ES
Enzim aktivitesi	40 U/μL	60 U/μL	200 U/μL	600 U/μL	1 U/μL	1 U/μL
Ürün Bileşenleri	3 bileşen	2 bileşen	2 bileşen	tek bileşenli	Bekar- bileşen	tek bileşenli
Dondurarak Kurutma Destekli	HAYIR	Evet	HAYIR	Evet	HAYIR	Evet

3、RPA Enzim Seçim Kılavuzu

Ürün Sınıflandırması	Bsu	T4X	T4Y	SSB	ÇK	EKZO
Ürün Adı	Bsu	T4 UvsX	T4 UvsY	gp32	Kreatin Kinaz	Ekzonükleaz III
Ürün Ürün Numarası	11078ES	11079ES	11080ES	11081ES	14502ES	14525ES
Enzim aktivitesi	5 U/μL	2 μg/μL	2 μg/μL	5 μg/μL	2 μg/μL	100 U/μL
Ürün Bileşenleri	tek bileşenli	tek bileşenli	tek bileşenli	tek bileşenli	tek bileşenli	2 bileşen
Dondurarak Kurutma Destekli	HAYIR	HAYIR	HAYIR	HAYIR	HAYIR	HAYIR