—Parmaklarınızın ucundaki leke zarınızı aydınlatın!
Yaban turpu peroksidazı (HRP) için kemilüminesan substratlar olarak bilinen ECL reaktifleri, şu anda Western blotting tespitinde kullanılan en hassas reaktiflerdir. Piyasadaki ECL reaktifleriyle ilgili yaygın sorunlar arasında söndürme, yüksek arka plan, kararsızlık ve düşük miktarda proteinleri tespit etmede zorluk yer alır ve bu da nihai deneysel sonuçları etkileyebilir.
Yeasen Biotech, immünodektion alanında seçkin bilimsel araştırmacıları bir araya getirdi. Luminol ham maddelerinin kalitesini sıkı bir şekilde kontrol ederek ve güçlendiriciler ile stabilizatörlerin formülasyonunu sürekli iyileştirerek, farklı deneylerin ihtiyaçlarını karşılamak için dört tip ECL reaktifi geliştirdik. Bunlar arasında güçlendirilmiş, ultra hassas, dayanıklı ve ultra yüksek hassasiyetli ürünler yer alır. Bunlar yalnızca düşükten yükseğe kadar hedef proteinler için tespit gereksinimlerini karşılamakla kalmaz, aynı zamanda deneyi etkilemeden lüminesans yoğunluğunu da artırarak daha net görüntüler elde edilmesini sağlar.
Ürün Özellikleri
- Mükemmel Hassasiyet — Pikogramdan düşük femtogram seviyelerine kadar antijenlerin tespiti.
- Daha Yüksek Sinyal-Gürültü Oranı — Hassas lüminesans alt tabakalar arka plan gürültüsünü azaltır.
- Daha Antikor Verimli — Daha yüksek antikor bağlanma afinitesi için optimize edilmiş substrat sistemleri.
- Yüksek Maliyet-Performans Oranı — Daha düşük fiyata daha yüksek performans.
- Mükemmel Stabilite — Yeni oksidanlar, 4°C'de bir yıla kadar stabil depolamayı garantiliyor.
Ürün Prensibi
ECL reaktif tespitinin temel prensibi oksidasyon reaksiyonlarından gelen lüminesanstır: Lüminesan substratın ana bileşeni olan luminol, yaban turpu peroksidazının (HRP) katalizlenmesi yoluyla alkali koşullar altında H2O2 tarafından oksitlenir ve 3-amino-ftalik asidin uyarılmış durum ara maddesini oluşturur. Temel duruma döndüğünde, 425 nm'lik maksimum emisyon dalga boyuyla fotonlar yayılır. Bu foton sinyalleri X-ışını filmi veya CCD görüntüleme cihazları tarafından yakalanabilir.
Seçim Rehberi
Yeasen, kullanıcıların immunoblotting uygulamalarının ihtiyaçlarını tam olarak karşılamak amacıyla, her biri kendine özgü özelliklere sahip dört tip ECL ürünü sunuyor.
Peki, deneyiniz için hangi ürünü seçmelisiniz?
Tablo 1.ECL Reaktif Seçim Kılavuzu
| Yeasen | Geliştirilmiş ECL Gelişmiş Tip | Süper ECL Ultra Hassas Tip | SüperDura Dayanıklı Tip | MaxiSinyal Ultra Yüksek Hassasiyet Tipi |
| Uygulanabilir Örnekler | Yüksek bollukta hedef, rutin protein örnekleri | Düşük bolluğa sahip, sınırlı örnekli hedef | Düşük bolluğa sahip, sınırlı örnekli hedef | Çok düşük bolluğa sahip hedef, değerli örnekler |
| Algılama Hassasiyeti | Orta pikogram seviyesi | Düşük pikogram seviyesi | Orta femtogram seviyesi | Düşük femtogram seviyesi |
| Sinyal Süresi | < 2 saat | < 12 saat | < 24 saat | < 8 saat |
| Uygulanabilir Algılama Sistemi | Tüm reaktifler X-ışını filmi, CCD görüntüleme cihazları için uygundur | |||
| Birincil Antikor Seyreltme Konsantrasyonu | 1:1000-1:4000 | 1:1000-1:10.000 | 1:1000-1:50.000 | 1:5000-1:100.000 |
| İkincil Antikor Seyreltme Konsantrasyonu | 1:1000-1:4000 | 1:2000-1:10.000
| 1:50.000-1:250.000 | 1:100.000-1:500.000 |
| Önerilen Membran | NC membranı | NC membran veya PVDF membran | NC membran veya PVDF membran | NC membran veya PVDF membran |
| Depolama Stabilitesi | 1 yıl oda sıcaklığında | 1 yıl 4°C, yarım yıl oda sıcaklığı | ||
| Avantajları | Aynı hassasiyet seviyesindeki en güçlü sinyal | En yüksek maliyet-performans oranı, çoğu WB deneyi için uygundur | En uzun sinyal süresi, çoklu pozlamalar için son derece uygundur | Mükemmel hassasiyet, eser protein tespiti için son derece uygundur |
Not: Önerilen antikor seyreltme konsantrasyonu 1 mg/mL'lik antikor stok konsantrasyonuna dayanmaktadır.
Ürün Uygulaması
Yeasen ECL reaktifleri aynı seviyedeki diğer markaların ürünlerine kıyasla daha iyi kullanım etkilerine sahiptir.
Şekil 1. Yeasen ECL Ultra-Hassas Substrat Süper ve Brand T'nin eşdeğer substratı Pico arasındaki tespit etkilerinin karşılaştırılması.
Şekil 2. Yeasen ECL Ultra Yüksek Hassasiyetli Substrat MaxiSignal ile diğer markaların eşdeğer substratı West Femto arasındaki tespit etkilerinin karşılaştırılması.
Şekil 3.Yeasen ECL Dayanıklı Substrat SuperDura ile diğer markaların eşdeğer substratı West Dura arasındaki tespit etkilerinin karşılaştırılması.
Yayımlanmış Literatür
[1]Wang Z, Lu Z, Lin S, ve diğerleri. Lösin-tRNA-sentaz-2 ekspresyonlu B hücreleri kolorektal kanser immüno-kaçınmasına katkıda bulunur. Bağışıklık. 2022;55(6):1067-1081.e8. doi:10.1016/j.immuni.2022.04.017(IF:43.474)
[2] Wu Z, Liu D, Pan D ve diğerleri. Minyatür Acidibacillus sulfuroxidansCas12f1'in yapısı ve mühendisliği[J]. Nature Catalysis, 2023, 6(8):695-709.DOI:10.1038/s41929-023-00995-4(IF:38)
[3] Yao J, Wu D, Zhang C, ve diğerleri. Makrofaj IRX3, diyet kaynaklı obeziteyi ve metabolik inflamasyonu teşvik eder. Nat Immunol. 2021;22(10):1268-1279. doi:10.1038/s41590-021-01023-y (EĞER:25.606)
[4] He X, Li J, Zhou G, ve diğerleri. İnhibitör internöronlarda sinaptik plastisite ile hipokampal ritimlerin ve hafızanın kapılanması. Nöron. 2021;109(6):1013-1028.e9. doi:10.1016/j.neuron.2021.01.014(IF:17.173)
Fiyat Avantajı
Şekil 7.Yeasen ECL ürünlerinin aynı seviyedeki diğer markaların ürünleriyle fiyat karşılaştırması
Sıkça Sorulan Sorular
| Karşılaşılan Sorunlar | Neden Analizi | Önerilen Çözümler |
| Filmde ters görüntüler var | Filmde ters görüntüler var | Filmde ters görüntüler var |
| Filmde kahverengi veya sarı bantlar var | ||
| Floresan söndürme | Çalışma süresi çok uzun, membran yavaş yavaş kuruyor | Membranın kurumasını önleyin |
| Plastik ambalaj, geliştirici veya sabitleyicinin kirlenmesi | İyi deneysel alışkanlıklar geliştirin | |
| Reaksiyon sisteminde yetersiz HRP | HRP etiketli materyali artırın | |
| Filmde bant yok veya sinyal zayıf | Düşük transfer verimliliği | Transfer verimliliğini artırın, yargılama için önceden boyanmış Marker kullanın |
| Yetersiz veya uyumsuz antijen/antikor | Antijen/antikor miktarını artırın veya uygun antijen/antikoru seçin | |
| X-ışını filmi sorunları | X-ışını filmi pozlamadan sonra tamamen siyahsa (şeffaf değilse), bu filmin tamamen pozlandığını gösterir; yeni bir X-ışını filmi kullanın | |
| Geliştirici/düzeltici sorunları | Kontrol etmek için filmi önceden hazırlayın; sorunlar varsa yeni bir geliştirici/düzeltici ile değiştirin | |
| Reaksiyon sisteminde aşırı HRP | HRP etiketli materyali seyreltin | |
| Yüksek Arka Plan | Birincil ve ikincil antikor konsantrasyonları çok yüksek | Antikor konsantrasyonunu azaltın, blokaj süresini uzatın |
| Antikorlar iyice temizlenmemiş | Yıkama sayısını artırın | |
| Eksik blokaj | Engelleme koşullarını optimize edin | |
| Yanlış engelleme aracı kullanıldı | Farklı bir engelleme aracı kullanın | |
| Aşırı pozlama | Maruz kalma süresini azaltın | |
| Zayıf antikor özgüllüğü | Yüksek kaliteli antikorlarla değiştirin | |
| Reaksiyon sisteminde aşırı HRP | HRP etiketli materyali seyreltin | |
| Boş noktalara sahip bantlar | Yüksek antijen ve sekonder antikor konsantrasyonu | Örneği seyreltin ve jeli tekrar çalıştırın veya karıştırılmış kromojenik solüsyonu soğutun ve hemen hızlı gelişim için membrana uygulayın. |
| Düzensiz bant şekli | Transfer sırasında hava kabarcıkları veya metanol ile düzensiz hidrasyon (PVDF membranlar için) | Transfer koşullarını optimize edin. |
| Film noktaları | HRP etiketli materyalin agregaları | HRP etiketli materyali 0,2 μm membranla filtreleyin |
| Belirsiz bantlar | Reaksiyon sisteminde aşırı HRP | HRP etiketli materyali seyreltin |
| Spesifik olmayan protein bağlanmasına neden olan SDS | Deneysel prosedürde SDS kullanmayın | |
| Zayıf antikor özgüllüğü | Yüksek kaliteli antikorlarla değiştirin | |
| Yetersiz engelleme | Engelleme süresini artırın veya farklı bir engelleme aracı kullanın |
Sipariş Bilgileri
| Ürün Adı | Ürün Numarası | Şartname |
| Süper ECL Algılama Reaktifi | 36208ES60/76 | 100 ml/50 ml |
| Geliştirilmiş ECL Kemilüminesans Substrat Kiti | 36222ES60/76 | 100 mL/500 mL |
| SuperSignal SuperDura Uzun Süreli Alt Tabaka | 36223ES10/60/70/76 | 10 mL/100 mL/200 mL/500 mL |
| SuperSignal MaxiSignal Maksimum Hassasiyet Alt Tabakası | 36224ES10/60/70/76 | 10 mL/100 mL/200 mL/500 mL |