Diyabetik hastalara daha fazla tedavi seçeneği sunmak için, 21. yüzyılın başlarında glukagon benzeri peptid-1 (GLP-1) analogları gibi bazı yeni diyabet ilaçları ortaya çıktı. GLP-1 analoglarının temsili ilaçlarından biri olan semaglutid, çeşitli oral hipoglisemik ilaçlarla birleştirildiğinde kan şekerini etkili bir şekilde kontrol ettiği çok sayıda klinik çalışmayla kanıtlanmıştır ve hastaların kilo vermesine, sistolik basıncı düşürmesine ve pankreas β hücresi işlevini iyileştirmesine yardımcı olabilir. Üç formülasyonu (hipoglisemik enjeksiyon Ozempic, oral hipoglisemik ilaç Rybelsus ve kilo verme enjeksiyonu Wegovy) 2023'te 20 milyar doları aşan satış rakamına ulaştı. kan şekerinin düşürülmesi ve kilo kaybıSektör, Semaglutide'in bir süre daha güçlü satış ivmesini sürdüreceğini ve birçok firmanın düzen için rekabet edeceğini düşünüyor!
Semaglutide'in ana zincir yapısı 29 amino asitlik ara polipeptit Arg34GLP-1(9-37) veya 27 amino asitlik ara polipeptit Arg34GLP-1(11-37)'dir. Bu ara polipeptidin üretimi ve imalatı esas olarak kimyasal sentez ve biyopreparasyon yöntemlerini içerir. Kimyasal senteze kıyasla, biyopreparasyon kapasite darboğazını aşmış ve büyük ölçekli sürekli üretim için daha uygundur, bu da üretim maliyetlerini daha da düşürebilir ve daha önemli ekonomik faydalar sağlayabilir.
Tablo 1. Semaglutid ara polipeptitleri için biyopreparasyon yöntemlerine örnekler
| Biyopreparasyon yöntemi (Örnek 1)
| Biyopreparasyon yöntemi (Örnek 2)
| |
| Gen Sentezi | Bir füzyon peptidi, enterokinaz kesme bölgesi ve hedef ana molekül dizisi de dahil olmak üzere bir füzyon protein dizisi sentezleyin | GLP-1(9-37) gen dizisiyle bir tandem ifade dizisi sentezleyin |
| Mühendislik Bakteri İnşaatı | Rekombinant tasarlanmış bakteriler oluşturmak için E. coli'ye sokulur | Rekombinant tasarlanmış bakteriler oluşturmak için E. coli'ye sokulur |
| Füzyon Protein Ekspresyonu | Füzyon peptit dizisinin optimize edilmesi, proteinin izoelektrik noktasının ve hidrofilikliğinin değiştirilmesi vb. ile füzyon proteininin ifadesi etkili bir şekilde artırılır.
| Yüksek yoğunluklu fermantasyon indüksiyonundan sonra, GLP-1(9-37) ifade eden bir tandem ifade inklüzyon gövdesi proteini elde edilir ve yeniden katlama, çözünür bir protein verir |
| Ara Peptit Edinimi | Füzyon proteini enterokinaz bölünmesi, saflaştırma ve diğer adımlardan geçtikten sonra, semaglutid ara polipeptidi Arg34GLP-1(9-37) elde edilebilir | Çözünebilir protein, Kex2 enzimi ve karboksipeptidaz B ile iki aşamalı enzim parçalanması ve semaglutid ara polipeptidi GLP-1(9-37) elde etmek için saflaştırma adımlarından geçtikten sonra elde edilebilir. |
Enterokinaz veya Kex2 enzimi, karboksipeptidaz B ile birlikte Semaglutid'in ana peptit zinciri için anahtar bir enzimdir (biyopreparasyon yöntemi) ve enzim kesme etkisi ve maliyeti üretim için kritik öneme sahiptir.Yisheng Biyoloji, ilaç şirketlerine istikrarlı enzim hammaddeleri sağlamaya, müşterilerin üretim kapasitesini ve parti istikrarını iyileştirmelerine, maliyetleri düşürmelerine ve hızla pazara girmelerine yardımcı olmak için yüksek kaliteli enzimler ve eksiksiz kalite kontrol standartları sunmaya kendini adamıştır. Pazar.
Yeasen Semaglutide için genel çözüm
1.Rekombinant Enterokinaz
Rekombinant enterokinaz (rEK) doğal olarak ekstrakte edilmiş enterokinaz ile aynı spesifik kesme enzim aktivitesine sahip, Asp-Asp-Asp-Asp-Lys kesme bölgesine sahip, proteinin N-terminusunda bulunan füzyon proteinini gereksiz füzyon etiketlerini çıkarmak için kaldırabilen ve N-terminal füzyon için yaygın olarak seçilen bir proteaz olan yüksek saflıkta bir sığır bağırsak enterokinaz hafif zincir alt birimidir. Diğer kalıntılarda düşük düzeyde düzensiz kesmeye sahiptir.
Yisheng şu anda müşterilerinin seçim yapabilmesi için farklı kaynaklardan, farklı derecelerden ve His etiketli olsun veya olmasın rekombinant enterokinazlar sunuyor.
Yeasen Rekombinant Sığır Enterokinaz, His, Mayada Ekspresyon, Pichia pastoris salgısıyla ekspresyonlanan yüksek saflıkta, yüksek aktiviteli ve oldukça spesifik bir sığır enterokinazıdır. Geniş bir pH aralığında (4,5-9,5) ve geniş bir sıcaklık aralığında füzyon proteinlerini etkili bir şekilde parçalayabilir ve çeşitli deterjanlar ve denatüranlar altında hala kısmi aktiviteye sahiptir. Bu ürünün, Ni ile kolayca çıkarılabilen bir His etiketi vardır2+ Kesme reaksiyonundan sonra afinite kolonu, sonraki saflaştırma sürecini büyük ölçüde basitleştirir.
Özellikler
Yüksek özgüllük: Dört aspartik asit içeren lizinin karboksil ucunu kesen spesifik bir proteaz: Asp-Asp-Asp-Asp-Lys;
Yüksek saflık: Başka proteaz yok, spesifik olmayan kesme yok;
Hayvansal kökenli değil: Rekombinant üretim, ekzojen viral kontaminasyon yok, üretim sürecinde hiçbir hayvansal hammadde kullanılmıyor;
İstikrarlı kalite: Parti üretimi, istikrarlı ve sürekli parti üretimini garanti eder; partiden partiye fark yoktur, istikrarlı kalite;
Yeterli kapasite: 500L fermentör ~50 MU enterokinaz elde edebilir, Yeasen, ürün partisi gereksinimleri için farklı aşamalarda farklı müşteri gereksinimlerini karşılamak üzere 5L-1500L farklı sistem fermentörlerine sahiptir;
Farklı sınıf ürün temini: Ar-Ge sınıfı (20395ES), GMP sınıfı (20396ES), GMP sınıfı ürünlerimiz ISO 13485 kalite yönetim sistemine uygundur.
Test Verileri
Enterokinaz aktivite testi:
Şekil 1. Enzim kesme etkisi Yeasen enterokinaz (20395ES) tutarlıdır Rakip N
Not: Pozitif substrat (20391ES), DDDDK (enterokinaz tanıma ve kesme bölgesi) ile bağlanan iki spesifik protein dizisinden oluşan, yaklaşık 64,6 kDa genel moleküler ağırlığa sahip bir füzyon proteinidir ve enterokinaz tarafından sırasıyla yaklaşık 27,9 kDa ve 36,6 kDa moleküler ağırlıklara sahip iki bağımsız protein parçasına spesifik olarak kesilebilir. Bu ürün, bir enterokinaz substratı olarak, rekombinant veya doğal enterokinazın yarı-kantitatif veya kalitatif enzim aktivitesi tespiti için kullanılabilir.
Enterokinaz saflık testi:
Not: Enterokinazın teorik değeri 22,7 kDa'dır. Pichia pastoris'te ifadeden sonra glikozilasyon etkisi nedeniyle, SDS-PAGE hedef proteinin moleküler ağırlığının yaklaşık 40 kDa olduğunu gösterir. Genellikle, glikozile edilmiş bantlar yukarı doğru uzanan hafifçe dağınık bir bant olacaktır (sağdaki şekilde gösterildiği gibi). Şirketimiz ayrıca müşterilerin deglikozile etmesi ve saflığı ölçmek için jel çalıştırması için deglikozilasyon enzimi Endo H (Cat#20414) sağlayabilir (soldaki şekilde gösterildiği gibi).
Enterokinaz kesme özgüllük testi:
Şekil 3. Yeasen enterokinaz (20395ES) ithalatçı Rakip N'den daha az spesifik olmayan kesmeye sahiptir
Not: Aynı koşullar altında, Yeasen enterokinaz (20395ES) ve ithal rakip N'nin enterokinaz enzim kesme testleri için kullanıldı. Sonuçlar, saflaştırmadan sonra, enzim kesme safsızlıklarının spesifik olmayan kesme safsızlıklarının Yeasen enterokinaz (20395ES) ithal rakip N'ninkinden önemli ölçüde daha düşüktür.
Enterokinaz tekrarlı dondurma-çözme, hızlandırılmış stabilite testi:
Şekil 4. Yeasen enterokinaz (20395ES) tekrarlanan dondurma-çözme, hızlandırılmış stabilite testi enzim aktivitesinin önemli ölçüde değişmediğini göstermektedir.
Not: Yeasen enterokinaz (20395ES) rastgele seçilen 2 partide, dondurma-çözme işlemi 10 kez tekrarlandıktan sonra 20 kez tekrarlandığında, enzim aktivitesi başlangıç enzim aktivitesine göre önemli ölçüde değişmedi.
25°C’de 7, 16, 32 gün, 37°C’de 7, 14 gün depolama sonucunda enzim aktivitesi başlangıç enzim aktivitesine göre önemli ölçüde değişmedi.
2.Rekombinant Kex2 Enzimi, Karboksipeptidaz B
Tablo 2. Yeasen Rekombinant Kex2 Enzimi, Karboksipeptidaz B Ürün Seçim Kılavuzu
| Ürün Numarası | 20418ES | 20417ES |
| Ürün İsim | Mayada İfade Edilen Rekombinant Kex2 Proteaz
| Rekombinant CPB, E.coli'de ifade edilir
|
| Ürün sınıfı | GMP sınıfı | GMP sınıfı |
| Kaynak | Pichia pastoris'ten rekombinant ifade | E. coli'den rekombinant ekspresyon. koli basili |
| Etkinlik | ≥10,0 birim/mg pro
| ≥170 USP birimleri/mg pro
|
| Bölünme Yeri | Arg-Arg, Lys-Arg gibi dibazik amino asitlerin karboksilik asit terminalindeki peptit bağlarını özel olarak tanır ve keser | Özellikle temel amino asitlerin (lizin, arginin, histidin) C-terminustaki amino-terminal tarafındaki proteinleri hidrolize eder |
| Ürün Uygulaması | 1. Peptid ilaç üretiminde enzim parçalanması işlemi. 2. Proteinlerin enzimatik sindirimi ve peptit haritalaması, dizilenmesi vb. | 1. Rekombinant insülin ve analoglarının üretimi. 2.Proteinlerin C-terminusundaki aminoasitlerin belirlenmesi. 3. Proteinlerin C-terminusundaki histidin etiketlerinin çıkarılması. 4. Diğer rekombinant peptit maddelerinin üretimi. 5. Bazı özel bileşiklerin enzimatik sentezi. |
Karboksipeptidaz B ile birleştirilmiş Kex2 enzimi: Tandem ekspresyon prosesi gereksinimleri, enzim kesimi sonrasında yüksek semaglutid ara ürünü verimi
Senkolaylaştırmak GMP Sınıfı Enzim Üretim Üssü
ISO Sertifikalı Ultra Temiz Moleküler Enzim Üretim Üssü - UCF.ME, endüstriyel sınıf AKTA arıtma ve fizikokimyasal analiz ekipmanları, yüz litrelik yüksek yoğunluklu fermantasyon üniteleri, on bin dereceli standart temiz atölyeler ve otomatik üretim hatları ile donatılmıştır. 5L, 10L, 30L, 100L, 500L ve 1.500L dahil olmak üzere çeşitli özelliklerde fermantasyon ve arıtma sistemlerine sahiptir ve moleküler enzim endüstrileşmesi alanında üretimi 5L'den 1.500L'ye ölçeklendirme kapasitesine sahiptir ve araştırma ve geliştirme, pilot ölçek ve büyük ölçekli üretim gibi farklı aşamalarda alt akış müşterilerinin temel enzim hammadde ihtiyaçlarını tam olarak karşılar.
Yeasen, güçlü bir Ar-Ge ekibine ve gelişmiş enzim üretim üssüne sahiptir; sürekli teknolojik yenilik ve optimizasyon yoluyla semaglutid üretimi için temel enzimlerin (rekombinant enterokinaz) kalitesini ve kapasitesini sürekli olarak iyileştirir, müşterilerin farklı üretim aşamalarındaki çeşitli ihtiyaçlarını karşılamak için farklı özellikler için kademeli fiyatlandırma sunar.
Promosyon ürün bilgisi
| Ürün Adı | Ürün Numarası | Şartname | Liste Fiyatı($） | Promosyon Fiyat($) |
| Mayada Ekspresyon Gösteren Rekombinant Sığır Enterokinazı, His | 20395ES60/76/90/ 92/94 | 100 500 yaş altı 5000 Sen/ 100 KU/ 1 MU(1000 KU) | 45/115/ 825/ 12000/ 360000 | 45/115/ 585/ 5600/ 19600 |
İlgili ürün bilgisi
| Ürün Adı | Ürün Numarası | Şartname |
| 20391ES03/11 | 1 mg/4 mg | |
| Mayada İfade Edilen Rekombinant Kex2 Proteaz | 20418ES60 | 100 mikrogram |
| 20417ES03/10 | 1 mg/10 mg | |
| 20414ES92/97 | 10000 TL/50000 TL |