1.Arka Plan Girişi
Streptavidin, Streptomyces avidinii'den türetilen bir biyotin bağlayıcı proteindir. Spesifik olmayan bağlanması avidinden çok daha düşüktür ve nötr pH'ta net pozitif yüke sahip olan ve yaklaşık %7 karbonhidrat içeren yumurta akı avidiniyle karşılaştırıldığında, streptavidin nötr pH'ta neredeyse hiç net yük olmaması ve karbonhidrat içermemesi gibi daha elverişli kimyasal özelliklere sahiptir. Bu nedenle, avidine alternatif olarak yaygın olarak kullanılır.
2.Ürün Özellikleri
Tetramer yapısı:Streptavidin 66KDa büyüklüğünde bir homotetramer olarak bulunur;
Yüksek yakınlık:Streptavidinin her molekülü, aralarında son derece güçlü bir afinite bulunan dört biyotin molekülüne son derece özgül bir şekilde bağlanabilir;
Geniş Uygulamalar: Streptavidin-biyotin kompleksinin ayrışma sabiti, moleküler biyoloji uygulamalarında yaygın olarak kullanılan bir özellik olan nanomolar aralıktadır; çoğu uygulamada antikor proteinleriyle birbirinin yerine kullanılabilir;
Yüksek Kaliteli Çıkarım: Arıtma yoluyla elde edildi Streptomyces avidinii;
Şekil 1. Streptavidin
Ürün Başvuru
Uygulama 1: Streptavidin ile saflaştırılmış reçine
1)Uygulama ilkesiStreptavidin ve biotin arasındaki etkileşime dayanarak, streptavidin %6 agaroza yüksek oranda çapraz bağlıdır ve benzersiz hazırlama süreci ona daha yüksek fizikokimyasal özellikler kazandırarak daha yüksek basınçlara dayanmasını sağlar. Nispeten yüksek akış hızlarında hedef proteinin saflaştırılmasını sağlayabilir ve bu da onu büyük ölçekli endüstriyel protein saflaştırması için daha uygun hale getirir.
Şekil 2. Streptavidin reçinesinin saflaştırma prensibi
2）Yeasen, sizin için daha mükemmel proteinleri saflaştırmak için yüksek verimli ürünler sunmaya kendini adamıştır.
Şekil 3. Streptavidin reçinesi ile saflaştırılan protein
3）Sıkça Sorulan Sorular| Soru | Olası sebep | Önerilen çözüm |
| Kolonun geri basıncı çok yüksek | Paketleme engellendi | Reçineyi temizleyin. |
| Lizis tamponu küçük katı parçacıklar içerdiğinden, yüklemeden önce 0,22 μm veya 0,45 μm filtre membranı ile filtrelenmesi veya santrifüjlenerek uzaklaştırılması önerilir. | ||
| Numune çok viskoz. | Örnek yüksek konsantrasyonda nükleik asit içeriyorsa, viskozite azalıncaya kadar lizis süresini uzatın veya DNase I (son konsantrasyon 5 μg/ml) ve Mg ekleyin2+ (1 mM'lik son konsantrasyon), 10-15 dakika buz üzerinde inkübe edin | |
| Tampon çok viskoz | Organik reaktifler veya protein dengeleyici reaktifler (gliserol vb.) geri basıncın artmasına, çalışma akış hızının azalmasına neden olabilir. | |
| Elüsyon bileşeninde amaçsız protein | Aşırı kesme, ilgi duyulan proteini denatüre eder | Hafif lizis koşulları kullanın. Deneysel koşullar deneyime dayanmaktadır. |
| Hedef protein çökelti üretmek için toplanır | Ön hücre lizis solüsyonuna son konsantrasyonu 1-10 mM olacak şekilde DTT ekleyin. | |
| Hedef protein tamamen elüe edilmemiştir | Elüsyon hacmi çok küçük | Eluent hacmini artırın ve elüsyon akış hızını azaltın. |
| Elüsyon tamponunun pH'ı değişir | Taze hazırlanmış eluent kullanın | |
| Eluent inkübasyon süresi yeterli değil | Elüsyon tamponunun inkübasyon süresini jel ile artırın. |
Uygulama 2: Floresan grubu ve enzim konjugatı işaretli streptavidin.
Şekil 4. Farklı Konjuge Streptavidinler
1) Enzim Konjuge Streptavidinler- Yaban Turpu Peroksidaz (HRP) Konjuge Streptavidin
Ⅰ. Yüksek saflıkta streptavidin ve yaban turpu peroksidazından özel bir konjugasyon tekniği ile üretilir;
Ⅱ. Peroksidazın yüksek özgül aktivitesini korur. Uygulamalar: İmmünohistokimya (IHC), İmmünositokimya (ICC), In situ Hibridizasyon (ISH), vb.
Önerilen Konsantrasyon: WB için 0,01-0,1 µg/mL (kemilüminesans yöntemi); ELISA, HC/ICC, WB için 1-2 µg/mL (substrat renk gelişimi)
- Alkalen Fosfataz (AP) Konjuge Streptavidin
Ⅰ. Özel kovalent bağ ile katı faz analizi, doku/hücre boyama sistemleri ve blot uygulamaları için uygundur;
Ⅱ. Konjugat stabil ve oldukça aktiftir.
Uygulamalar: İmmünohistokimya (IHC), İmmünositokimya (ICC), Enzim Bağlantılı İmmünospot Testi (ELISPOT), Enzim Bağlantılı İmmünosorbent Testi (ELISA), In Situ Hibridizasyon (ISH) ve blot uygulamaları.
Önerilen Konsantrasyon: ELISA, IHC/ICC için 1-2 µg/mL; WB için 0,1-1 µg/mL
2）Florofor Konjuge Streptavidinler- Fluor® Florescein Konjuge Streptavidin
Ⅰ.Rutin immünofloresan için önerilir;
Ⅱ.Çok düşük spesifik olmayan bağlanma özelliklerine sahip, yüksek oranda saflaştırılmış;
Ⅲ.Biyotine karşı yüksek afinite;
Uygulamalar: İmmünofloresan (IF), In situ Hibridizasyon (ISH), Akış Sitositometrisi (Flow Cyt).
Önerilen Konsantrasyon: 0,5-2 µg/mL (IF)
- DyLight™ Boya Konjuge Streptavidin
Ⅰ. İmmünofloresan, in situ hibridizasyon veya akış sitometrisi uygulamalarında biyotinlenmiş ikinci antikorların ve diğer büyük moleküllerin tespiti için kullanılabilir;
Ⅱ.Çok düşük spesifik olmayan bağlanma özelliklerine sahip, yüksek oranda saflaştırılmış;
Ⅲ.Biyotine karşı son derece yüksek afinite;
Ⅳ.Yüksek fotostabilite, pH duyarsızlığı ve daha parlak floresans;
Uygulamalar: İmmünofloresan (IF), In situ Hibridizasyon (ISH), Akış Sitositometrisi (Flow Cyt).
Önerilen Konsantrasyon: 0.5-2 µg/mL (IF)
Ürün Bilgileri
| Ürün Serisi | Ürün Numarası | Ürün Adı | Şartname |
| Streptavidin | 35099ES | Streptavidin (Toz) | 100 mg/1 gr |
| 35101ES | Streptavidin (5mg/ml) | 1 mg/5 mg/10 mg/ 100 mg/1 gr | |
| Enzim Konjuge Streptavidinler | 35105ES | HRP Streptavidin | 100 μL |
| 35106ES | AP Streptavidin | 100 μL | |
| Floresanla işaretlenmiş streptavidin | 35102ES | DyLight 405™ Streptavidin | 100 μL |
| 35103ES | YS FlorT.M. 488-konjuge Streptavidin | 100 μL | |
| 35104ES | YS FlorT.M. 647-konjuge Streptavidin | 100 μL | |
| 35107ES | YS FlorT.M. 584-konjuge Streptavidin | 100 μL | |
| 35108ES | Cy3-konjuge Streptavidin | 1 mg | |
| Streptavidin Saflaştırma Serisi | 20512ES | Streptavidin Agaroz Reçine 6FF | 5 mL/5mL×5/100mL |
| 20513ES | BiotSep Streptavidin 6FF Kromatografi Kolonu, 1ML | 1 mL/1mL×5 | |
| 20514ES | BiotSep Streptavidin 6FF Kromatografi Kolonu, 5ML | 5 mL/5 mL×5 |