ایجاد سولفات سدیم دکستران (DSS ، درجه کولیت) مدل کولیت اولسراتیو

تاریخچه توسعه مدلسازی DSS

توسعه دارو به مدل های حیوانی برای آزمایش اثربخشی نیاز دارد. با بیش از 50 سال توسعه و بهینه سازی، مدل کولیت اولسراتیو (UC) نمک سدیم سولفات دکستران (DSS) در میان مدل های حیوانی مختلف، به طور گسترده برای مطالعه علت و پاتوژنز بیماری التهابی روده (IBD) استفاده می شود.

شکل 1. توسعه مدل کولیت اولسراتیو DSS

سیویژگی های مدل UC ساخته شده توسط DSS

علائم متعدد حاد یا مزمن UC می تواند القا شود، مانند اسهال، مدفوع موکوس مانند، خون مخفی مدفوع، مدفوع خونی درشت، کاهش وزن، کاهش فعالیت و رنگ ضعیف پوششبا دوزهای مختلف DSS.

جدول 1 ویژگی های بافتی مدل کولیت DSS

دسته مدل کولیت DSS

مدل کولیت حاد

مدل کولیت فاز مزمن

تغییرات بافت شناسی

پرخونی روده بزرگ، ادم، کوتاه شدن، شکنندگی، افزایش نسبت وزن به قد

کولون به طور قابل توجهی کوتاه شده است

زخم روده بزرگ با درجات مختلف

ضخیم شدن مخاط، لنفادنوپاتی

ادم مخاطی، از بین رفتن سلول های جامی، تورم و تخریب دخمه

از دست دادن سلول جام، از دست دادن دخمه

درجات مختلف نفوذ سلول های التهابی در مخاط و زیر مخاط، آسیب سلول های اپیتلیال

پولیپ های آدنوماتوز و تغییرات تومور مانند در تعداد کمی از حیوانات

مزایای مدل DSS UC

  1. پیاده سازی پروتکل ها آسان است.
  2. مدل DSS UC شباهت زیادی به علائم UC انسان با تکرارپذیری بالا دارد.
  3. علائم مشخصه مختلفی را می توان از طریق کنترل دوز تجویز شده DSS، که برای مدل DSS UC منحصر به فرد بود، القا کرد.
  4. مدل DSS UC را می توان با انواع حیوانات مدل پرکاربرد مانند موش، موش صحرایی، گورخرماهی، خوک، مگس میوه و غیره تولید کرد.
  5. مدل سرطان مرتبط با کولیت ناشی از IBD (CAC) را می توان با استفاده ترکیبی از آزوکسی متان (AOM) ایجاد کرد.

نمونه ساخت مدل DSS UC

  1. موش ها مدل(برای جزئیات کلیک کنید)

1) موش BALB/c ماده، 6-8 هفته، 25 گرم.

2) آب آشامیدنی استریل با 3٪ DSS و فیلتر با غشای 0.22 میکرومتر.

3) DSS به مدت 7 روز اجرا شد.

4) التهاب، مانند روده بزرگ ادم و احتقان پس از رنگ آمیزی HE مشاهده شد.

شکل 2 نتایج رنگ آمیزی HE مقاطع کولیت حاد DSS [1]

  1. مدل گورخرماهی(برای جزئیات کلیک کنید)
1) جنین گورخرماهی از تخم ریزی طبیعی به دست آمد و تا 1 روز پس از لقاح (dpf) در انکوباتور در 28 سالگی پرورش یافت.5 ℃ در آب در حال گردش (60 میکروگرم در میلی لیتر نمک دریای فوری اقیانوس) و با متیلن بلو تا 1 dpf تکمیل شده است.
2) پس از 1 dpf، از محیط کشت جنین E3 بدون متیلن بلو برای کشت تا 3 dpf استفاده کنید.
3) محلول ذخیره سازی 10% DSS را با محیط E3 آماده کنید.
4) DSS را با محیط کشت تا حداکثر دوز غیر کشنده رقیق کنید (مرجع غلظت DSS: 0.5%).
5) گورخرماهی با 0.5% DSS از 3 dpf تا 6 dpf تیمار شد و شاخص‌ها شد.

شکل 3 DSS پاسخ التهابی را در کبد گورخرماهی القا می کند [2]

3.مدل خوک(برای جزئیات کلیک کنید)

1) خوکچه های یورکشایر در سنین 4-5 روز؛

2) دوز DSS: 1.25 گرم / کیلوگرم، مصرف خوراکی به مدت 5 روز.

3) افزایش نرخ جذب D-مانیتول مشاهده شد.

شکل 4 غلظت D-مانیتول ناشی از DSS در خوک‌ها بیشتر از گروه کنترل بود. [3]

4.مدل مگس سرکه(برای جزئیات کلیک کنید)

1) مگس سرکه، ماده، 5-10 روز؛

2) تغذیه متوسط با محلول ساکارز 5 درصد حاوی 3 درصد DSS و 25 میکروگرم بر میلی لیتر تهیه شد بلئومایسین؛

3) مگس سرکه در دمای 29 درجه سانتیگراد به مدت سه روز با تغییر روزانه بطری کشت کشت داده شد.

4) DSS باعث تکثیر سلول های پیش ساز ISC شد و اثر کشنده ای بر روی مگس سرکه داشت.

شکل 5 DSS باعث تکثیر سلول های پیش ساز ISC در مگس سرکه می شود [4] .

5.Cسرطان مرتبط با اولیتبرای جزئیات کلیک کنید)

1) موش BALB/c، نر، 7 هفته؛
2) در روز 1، موش ها را وزن کرده و علامت گذاری کنید. تزریق داخل صفاقی محلول AOM mg/kg 10 به موش ها.
3) منبع آشامیدنی قفس موش را با آب پر کنید. 7-10 میلی لیتر آب برای هر موش در روز محاسبه کنید. تغذیه به مدت یک هفته.
4) آب آشامیدنی را با 2.5% DSS به مدت یک هفته جایگزین کنید.
5) به مدت دو هفته با آب آشامیدنی معمولی تغذیه کنید.
6) مراحل 3-4 را برای 3 بار تکرار کنید.

    شکل 6 نمودار شماتیک CAC القا شده توسط AOM/DSS [5] .

    معیارهای ارزیابی مدل

    1. شاخص فعالیت بیماری ( امتیاز DAI)

    مدل با پارامترهای متعددی از جمله وزن بدن، ویسکوزیته مدفوع و خون مخفی ارزیابی شد که از طریق آن DAI کلی تولید می‌شود.

    جدول 2 قوانین امتیازدهی DAI

    نمره

    درصد کاهش وزن

    قوام مدفوع

    خون مخفی مدفوع

    0

    0

    عادی

    منفی

    1

    1-5٪

    مدفوع نرم

    آبی روشن

    2

    5-10٪

    مدفوع مخاطی

    آبی

    3

    10-20٪

    مدفوع شل

    آبی تیره

    4

    > 20%

    \

    مدفوع خونی درشت
    1. امتیاز تغییر بافت شناسی

    امتیازات برای شاخص های فوق بر اساس تغییرات بافت شناسی به استثنای تشکیل غدد لنفاوی برای مدل کولیت حاد داده شد. معرف های رنگ آمیزی HE مورد استفاده Cat#60524ES60 است.

    جدول 3 امتیاز تغییرات بافتی

    نمره

    زخم (ها)

    تغییرات اپیتلیال

    نفوذ التهابی

    گره(های) لنفاوی

    0

    0

    عادی

    هیچ کدام

    هیچ کدام

    1

    1

    از دست دادن سلول های جامی

    نفوذ رمزی

    1

    2

    2

    از دست دادن سلول های جامی

    نفوذ مخاط عضلانی

    2

    3

    3

    حذف دخمه

    انفیلتراسیون عمومی مخاط عضلانی، ضخیم شدن مخاط

    3

    4

    > 3

    از دست دادن گسترده کریپت یا بازسازی پولیپوید

    تهاجم زیر مخاطی

    > 3
    1. کولون طول
    طول کولون کوتاه شده یک فنوتیپ آشکار برای مدل کولیت مزمن بود، در حالی که تغییرات مشابهی را می توان در روز 8 برای مدل کولیت حاد تشخیص داد.
      4.خلاصه

      آزمایش های اولیه برای استفاده از مدل حیوانی DSS UC با کنترل مناسب توصیه می شود. 8-10 حیوان در هر گروه حداقل نیاز است.

      پیوندهایی به این منبع

      1) شیائونا گائو، و همکاران. مجله بیوشیمی تغذیه 83 (2020) 108438.
      2) جینگ ما، و همکاران، آبزی پروری و ماهیگیری (2021) 548-557.
      3) Connie J. Kim، و همکاران. مجله بیوشیمی تغذیه 21 (2010) 468-475.
      4) Fangfang Ren، و همکاران PNAS.2010.107 (49) 21064-21069.
      5) Jia-Rong Huang و همکارانش در فارماکولوژی. 2020.11:586885.

        مورد موفق برای مدل سازی با Yeasen DSS

        مدل‌های کولیت حاد موفق با Yeasen DSS (Cat#60316ES، MW: 36000~50000) در 7 روز با فنوتیپ برجسته همانطور که در جدول زیر نشان داده شده است، تولید می‌شوند.

        جدول 4 ساخت انواع مدل های آنتریت با DSS

        مدل

        نمونه های مدل سازی

        طرح مدلسازی

        نتایج مدلسازی

        از ارزیابی استفاده کنید

        کولیت حاد

        موش BALB/c ماده، 6-8 هفته، 25 گرم

        3 تا 5 درصد DSS به مدت 7 روز متوالی آزادانه می نوشید

        روز 5 ظاهر شد، طول روده بزرگ کوتاه شد، رنگ آمیزی HE، و التهاب آشکار بود.

        سرعت قالب گیری سریع و زمان کوتاه است. مطابق با ویژگی های مدل کولیت حاد

        موش C57BL/6، نر، 8 هفته، 20 گرم

        3-5% DSS با گاواژ، تجویز مداوم

        روز 5 رخ می دهد، کوتاه شدن روده بزرگ، کاهش وزن، وجود خون در مدفوع، اسهال

        سرعت قالب بالا و مدت زمان کوتاه. مطابق با ویژگی های مدل کولیت حاد

        کولیت مزمن

        ماوس C57BL/6، نر، 8 هفته، 22 گرم

        1-2٪ DSS با گاواژ، تجویز مداوم

        روز 40 ظاهر می شود، کوتاه شدن روده بزرگ، کاهش وزن، خون در مدفوع، اسهال

        سرعت قالب گیری بالا. مطابق با ویژگی های مدل کولیت مزمن

        سرطان روده بزرگ

        ماوس C57BL/6، نر، 8 هفته، 21 گرم

        1%-2% DSS بصورت آزاد به مدت 5 روز و به مدت 3 هفته

        14 هفته با کوتاه شدن طول کولون، کاهش وزن، رنگ آمیزی HE و التهاب آشکار

        سرعت قالب گیری بالا. مطابق با ویژگی های مدل سرطان کولون

        افAQs

        صرف نظر از مدل کولیت حاد DSS یا مدل کولیت مزمن DSS، شدت و موفقیت آنتریت به گونه‌های موش (زمینه‌های ژنتیکی مختلف)، غلظت DSS و چرخه دوز مرتبط است.

        جدول 5 مشکلات رایج مدل سازی کولیت DSS

        مشکلات احتمالی

        دلیل احتمالی

        راه حل پیشنهادی

        مرگ و میر بالا در موش

        غلظت DSS خیلی بالاست

        غلظت DSS تجویز شده را کاهش دهید

        موش‌هایی که علائم آنتریت ندارند یا کم هستند

        غلظت DSS خیلی کم است

        افزایش غلظت دوز DSS. کاهش فاصله چرخه (10-14 روز)

        در همان گروه از موش ها، علائم آنتریت بسیار متفاوت است

        درب بطری مسدود شده است

        بطری نوشیدنی موش را روزانه چک کنید

        پسفارش محصول

        محصول پرفروش فقط به 1/3 قیمت نیاز دارد M* با همان کارایی، و ما یک انبار بزرگ نگه می داریم.

        پمحصول نآمی

        الفمقاله نعجب

        مشخصات

        نمک سدیم سولفات دکستران (DSS)، کولیت درجه MW: 36000 تا 50000

        60316ES25/60/76/80

        25 گرم / 100 گرم / 500 گرم / 1 کیلوگرم

        آزوکسی متان (AOM)

        60751ES03/08/10

        1 میلی گرم / 5 میلی گرم / 10 میلی گرم

        مول پور® کیت DNA مدفوع

        18820ES08/50/70

        5 T/50 T/200 تی

        مول پور® Mag48 خاک/مدفوع DNA کیت FA

        18528ES48

        48 ت

        مول پور®کیت DNA خاک/مدفوع Mag

        18526ES20/50/70

        20 T/50 T/200 تی

        کیت رنگ آمیزی هماتوکسیلین و ائوزین

        60524ES60

        2×100 میلی لیتر

        کیت آزمایش خون مخفی مدفوع ادرار

        60403ES60

        100T

        محلول رنگ آمیزی اسید دوره ای آلسین بلو (AB-PAS).

        60534ES50/60

        6×50 میلی لیتر/6×100 میلی لیتر/

        پمقالات منتشر شده با معرف های ما

        2024

        • [1] ژونگ دی، جین ک، وانگ آر، و همکاران. هیدروژل مبتنی بر میکروجلبک برای بیماری التهابی روده و اضطراب و افسردگی مرتبط با آن. Adv Mater. 26 ژانویه 2024:e2312275. doi: 10.1002/adma.202312275. IF=29.4
        • [2]ژانگ یی، تو اس، جی ایکس، وو جی، منگ جی، گائو جی، شائو ایکس، شی اس، وانگ جی، کیو جی، ژانگ زی، هوآ سی، ژانگ زی، چن اس، ژانگ ال، ژو اس جی.Dubosiella newyorkensis تحمل ایمنی در کولیت را از طریق مسیر AhR-IDO1-Kyn فعال شده با L-lysine تعدیل می کند. Nat Commun. 2024 فوریه 13; 15 (1): 1333. doi: 10.1038/s41467-024-45636-x.IF= 16.6
        • [3] ژوان ژانگ، شیا گائو، شیانگژو یی، و همکاران نانوذرات چند هدفه مبتنی بر اینولین با کانابیدیول برای پیشگیری موثر از کولیت اولسراتیو [J]. Materials Today Bio.2024, 25100965. IF=8.2

        2022

        • Mengmeng Xu, Ying Kong, Nannan Chen, et al.Identification of Immune Related Gene Signature and Prediction of CeRNA Network in Active Ulcerative Colitis [J].Frontiers in Immunology.2022; 13: 855645.IF=7.561
        • Lujuan Xing، Lijuan Fu، Songmin Cao، و همکاران. اثر ضد التهابی پپتیدهای مشتق شده از استخوان گاو از ژلاتین در RA ناشی از LPSW264.7 سلول های ماکروفاژها و سولفات دکستران ناشی از سدیم C57BL/6 موش [J]. مواد مغذی 2022، 14، 1479. IF=5.717
        • وانگ اس،  هوانگ جی،  قهوهای مایل به زرد KS، و همکاران Isosteviol Sodium کولیت مزمن ناشی از سولفات سدیم دکستران را از طریق تنظیم پروفایل متابولیک، پلاریزاسیون ماکروفاژها و مسیر NF-B [J] بهبود می بخشد. پزشکی اکسیداتیو و طول عمر سلولی. 2022,4636618.IF=5.076
        • YuangengLi، PingYu، WenwenFu، و همکاران. پلی ساکاریدهای Panax ginseng CA Meyer با مهار مسیر سیگنالینگ التهابی JAK2/STAT1/NLPR3 در موش، IBD ناشی از DSS را کاهش دادند[J].Journal of Functional Foods.IF=4.451
        • Lei-NingChen، TaoJing، Zi-BinLin، و همکاران. پاسخ های متابولیک و رونویسی بیضه موش به کولیت ناشی از سدیم سولفات دکستران [J]. Reproductive Toxicology. 2022، صفحات 35-42.IF=3.143

        2021

        • Li Zhao، Fei Wang، Zhengwei Cai، و همکاران. بهبود پلت فرم استفاده از دارو با هیدروژل مخاط چسبی تزریقی برای درمان کولیت اولسراتیو [J]. ژورنال مهندسی شیمی. 424(2021)130464.IF=16.744
        • Lingjun Tong, Haining Hao, Zhe Zhang, et al. وزیکول های خارج سلولی مشتق از شیر با تنظیم ایمنی روده و تغییر شکل میکروبیوتای روده کولیت اولسراتیو را کاهش می دهند.Theranostics.2021; 11 (17): 8570-8586 IF=11.556
        • Jingjing Gan، Yuxiao Liu، Lingyu Sun، و همکاران. ذرات تحویل نوکلئوتیدی خوراکی از میکروسیالات برای درمان بیماری التهابی روده [J]. Applied Materials Today. 2021 دسامبر؛ 25:101231 IF=10.041
        • JialiDong، YuanLi، HuiwenXiao، و همکاران. میکروبیوتای دهانی بر اثربخشی و پیش آگهی رادیوتراپی برای سرطان کولورکتال در مدل‌های موش تأثیر می‌گذارد[J]. Cell گزارش می‌دهد. ۲۰۲۱، ۱۰۹۸۸۶.IF=9.423
        • هائو H  ژانگ X،  تانگ L،  لیو Q، و همکاران. Q7 در مورد میکروبیوتای روده و کولیت اولسراتیو در موش [J].Frontiers in Immunology.2021.777147.IF=7.561
        • Yaohua Fan, Yanqun Fan, Kunfeng Liu, et al.Edible Bird's Nest کولیت اولسراتیو ناشی از سدیم سولفات دکستران را در موش های C57BL/6J با بازگرداندن تعادل سلولی Th17/Treg[J].Frontiers در فارماکولوژی بهبود می بخشد.2021.IF=7.561

        2020

        • لی، یی، دونگ، جی، شیائو، اچ، ژانگ، اس.، وانگ، بی، کوی، ام.، و فن، اس.اسید والریک مشتق شده از روده در برابر آسیب های ناشی از تشعشع محافظت می کند. میکروب های روده، 2020 0.1-18.IF=10.245
        • Jia-Rong Huang، Sheng-Te Wang، Meng-Ning Wei، و همکاران. Piperlongumine کولیت موش و سرطان کولورکتال مرتبط با کولیت [J] را کاهش می دهد. مرزها در فارماکولوژی.2020.586885.IF=7.561
        • گائو ایکس، فن دبلیو، تان ال، و همکاران. ایزوفلاون های سویا با هدف قرار دادن مسیرهای التهابی ERα/NLRP3 [J] کولیت تجربی را بهبود می بخشد. مجله بیوشیمی تغذیه، 2020، 83.IF=6.048

        تحقیق