بسته به ماهیت نمونه، ساخت کتابخانه NGS را می توان به ساخت کتابخانه DNA و ساخت کتابخانه RNA طبقه بندی کرد. آماده سازی کتابخانه DNA دارای پنج مرحله مولکولی استاندارد است که شامل تکه تکه شدن DNA، ترمیم انتهایی، dA-Tailing، بستن آداپتور و تقویت PCR. آماده سازی کتابخانه RNA دارای مراحل رونویسی معکوس اضافی و سنتز رشته های ثانویه است. آنزیم ها نقشی محوری در این آزمایشات به هم پیوسته دارند. بنابراین، کدام آنزیم های کلیدی در فرآیند ساخت کتابخانه نقش دارند؟
