راهنمای رایگان: 5 نکته برای کشت سلول های سالم تر

کشت سلولی سنگ بنای بسیاری از کاربردهای تحقیقاتی، از تولید دارو گرفته تا ژن درمانی است. با این حال، حفظ فرهنگ های سالم و در حال تکثیر بدون رویکرد و ابزار مناسب می تواند چالش برانگیز باشد. چه یک دانشمند کارکشته باشید و چه تازه کار در کشت سلولی، بهینه سازی هر مرحله از فرآیند می تواند تفاوت را ایجاد کند. در این راهنما، ما شما را از طریق پنج نکته ضروری برای اطمینان از رشد کشت های سلولی، از هضم تا پیشگیری از آلودگی، راهنمایی می کنیم.

1. کامل کردن هضم سلولی

هضم سلولی یک مرحله حیاتی در آزمایش های کشت سلولی است که جدا شدن سلول ها از سطح کشت و جداسازی آنها را به یک سوسپانسیون تک سلولی برای زیرکشت و تجزیه و تحلیل های بعدی تسهیل می کند. انتخاب آنزیم هضم مناسب می تواند کارایی جداسازی سلولی را بهبود بخشد، آسیب سلولی را کاهش دهد و پیشرفت آزمایشی را تضمین کند. برای کمک به شما در انتخاب مناسب‌ترین آنزیم هضم برای نیازهایتان، راهنمای چند محصول آنزیمی رایج و ویژگی‌های آن‌ها را گردآوری کرده‌ایم. شما می توانید مناسب ترین محصول را بر اساس نوع سلول، الزامات آزمایشی و کاربردهای پایین دستی انتخاب کنید.

آنزیم های گوارشی رایج

• تریپسین (برای هیدرولیز پروتئین های بین سلولی استفاده می شود)
• تریپسین نوترکیب (عاری از آلودگی با منشاء حیوانی، مناسب برای کاربردهای بیودارویی)
• کلاژناز (برای تجزیه الیاف کلاژن، ایده آل برای هضم بافت استفاده می شود)
• تریپسین کامپوزیتی (مانند آکوتاز که آنتی ژن های سطح سلولی را بهتر حفظ می کند)
• جایگزین های تریپسین (مانند TrypLE™، مناسب برای کشت سلولی بدون سرم)
• Dispase II (برای جداسازی بافت ها و سلول های مختلف).

هر آنزیم کاربردها و مزایای منحصر به فرد خود را دارد و انتخاب مناسب می تواند کارایی آزمایش و کیفیت نتایج شما را به میزان قابل توجهی بهبود بخشد.

نام محصول	شماره گربه	مشخصات
PerfCel™l تریپسین-EDTA (0.25%)، نه فنل قرمز	40123ES60	100 میلی لیتر
PerfCell™ تریپسین - بدون EDTA (0.25٪)، بدون فنل قرمز	40124ES60	100 میلی لیتر
PerfCell™ تریپسین (0.25%)، فنل قرمز	40126ES60	100 میلی لیتر
PerfCell™ تریپسین-EDTA (0.25٪، فنل قرمز	40127ES60	100 میلی لیتر
تریپسین 1:250 (پودر)	40101ES25	25 گرم
PerfCell™ تریپسین نوترکیب(پودر)	40512ES10/60	10 میلی گرم / 100 میلی گرم
تریپسین نوترکیب(MS-SAFE)	20416ES60	100 μg
PerfCel Tryzyme™ Express Enzyme (1X)، فنل قرمز	40134ES60	100 میلی لیتر
آنزیم اکسپرس PerfCel Tryzyme™ (1X)، نه فنل قرمز	40135ES60	100 میلی لیتر
محلول تفکیک سلولی ACCUTASE	40506ES60	100 میلی لیتر
Dispase II	40104ES60/80	100 میلی گرم در 1 گرم

2. ایجاد محیط فرهنگی ایده آل

فرهنگ سالم با محیط مناسب آغاز می شود. این شامل دمای مناسب، pH و محیط بهینه برای نوع سلول شما است. Yeasen طیف وسیعی از رسانه های کشت سلولی را ارائه می دهد که به طور خاص برای پشتیبانی از انواع رده های سلولی فرموله شده اند و مواد مغذی ضروری و فاکتورهای رشد مورد نیاز آنها را فراهم می کنند.

کشت سلولی بدون سرم به عنوان یک فناوری محوری در تحقیقات بیولوژیکی ظهور کرده است که تکرارپذیری، سازگاری و استانداردهای اخلاقی را تضمین می کند. کشت‌های سلولی سنتی بر سرم جنین گاوی (FBS) تکیه می‌کنند، که تنوع در نتایج تجربی و خطرات اخلاقی با منشاء حیوانی را به ارمغان می‌آورد. برای رسیدگی به این چالش ها، بسیاری از محققان به طور فزاینده ای محیط های کشت بدون سرم را انتخاب می کنند.

در تحقیقات ایمونولوژیک، کشت لنفوسیت نقش بسیار مهمی به ویژه در زمینه پاسخ ایمنی، ساخت واکسن و ایمونوتراپی سرطان دارد. به عنوان اجزای مرکزی سیستم ایمنی، لنفوسیت ها برای تکثیر و فعال شدن در شرایط آزمایشگاهی به شرایط کشت خاصی نیاز دارند. Yeasen محیط کشت را ارائه می دهد که به طور خاص برای تکثیر و فعال شدن لنفوسیت طراحی شده است، که می تواند پاسخ های ایمنی in vivo را به طور دقیق شبیه سازی کند و به محققان کمک کند تا داده های قابل اعتمادتری را در فعال سازی سلول های T، تولید آنتی بادی و تحقیقات ایمونولوژی سلولی به دست آورند.

علاوه بر این، کشت ارگانوئید نشان دهنده پیشرفت مهم دیگری در فناوری کشت سلولی است. ارگانوئیدها ساختارهای سلولی سه بعدی هستند که می‌توانند بافت‌ها و عملکرد اندام‌های انسان را در شرایط آزمایشگاهی شبیه‌سازی کنند و بستر تحقیقاتی جدیدی را برای مدل‌سازی بیماری، غربالگری دارو و پزشکی احیاکننده فراهم کنند. ساختار سه بعدی ارگانوئیدها پیچیدگی و عملکردهای فیزیولوژیکی اندام های انسان را بهتر تکرار می کند و به ابزار مهمی برای مطالعه رشد اندام ها، مکانیسم های بیماری و پاسخ های درمانی تبدیل شده است.

نام محصول	شماره گربه	مشخصات
محیط کشت سلولی حشرات CelCulSF™(بدون سرم)	40140ES	1000 میلی لیتر
محیط کشت سلولی CelCulSF™ 293(بدون سرم)	40141ES	1000 میلی لیتر
محیط کشت لنفوسیت CelCulSF™(بدون سرم)	40142ES	1000 میلی لیتر
محیط کشت سلولی هیبریدوما CelCulSF™(بدون سرم)	40143ES	1000 میلی لیتر
سلول های بنیادی مزانشیمی CelCulSF(MSC)محیط کشت(بدون سرم)	40144ES	500 میلی لیتر
محیط کشت سلولی چسبنده CelCulSF™(کاهش سرم)	40145ES	1000 میلی لیتر
Cebrary® محیط رشد ارگانوئید روده (موش)	41426ES60/76	l00/500 میلی لیتر
Cebrary® محیط رشد ارگانوئیدی سرطان روده (انسان)	41427ES50/60/76	50/l00/500 میلی لیتر
Cebrary® محیط رشد ارگانوئیدی سرطان معده (انسان)	41428ES50/60/76	50/l00/500 میلی لیتر
Cebrary® محیط رشد ارگانوئیدی سرطان کبد (انسان)	41429ES50/60/76	50/l00/500 میلی لیتر
Cebrary® محیط رشد ارگانوئیدی سرطان سینه (انسان)	41430ES50/60/76	50/l00/500 میلی لیتر
Cebrary® محیط رشد ارگانوئیدی سرطان ریه (انسان)	41431ES50/60/76	50/l00/500 میلی لیتر
Cebrary® مری محیط رشد ارگانوئیدی سرطان (انسان)	41432ES50/60/76	50/l00/500 میلی لیتر
Cebrary® سرطان تخمدان محیط رشد ارگانوئیدی (انسان)	41433ES50/60/76	50/l00/500 میلی لیتر
Cebrary® سرطان پانکراس محیط رشد ارگانوئیدی (انسان)	41434ES50/60/76	50/l00/500 میلی لیتر

3.انتقال کارآمد برای بیان ژن با کیفیت بالا

ترانسفکشن سلولی یک تکنیک حیاتی در تحقیقات زیست پزشکی است که امکان معرفی اسیدهای نوکلئیک اگزوژن (مانند DNA، mRNA، siRNA و miRNA) را به سلول‌ها برای بیان ژن، خاموش کردن یا مطالعات عملکردی می‌دهد. با انواع مختلف سلول ها و اسیدهای نوکلئیک، انتخاب معرف ترانسفکشن مناسب برای آزمایش های موفق ضروری است.

معرف های ترانسفکشن شیمیایی، از جمله فرمولاسیون لیپوزومال، PEI و بر پایه فسفات کلسیم، هر کدام مزایای منحصر به فردی را ارائه می دهند. Yeasen زیست شناسی خط تولید متنوعی را توسعه داده است که برای کاربردهای مختلف ترانسفکشن بهینه شده است، از جمله ترانسفکشن با کارایی بالا برای DNA، siRNA، miRNA، و mRNA، با موفقیت تایید شده در بیش از 40 رده سلولی. این معرف‌ها راندمان انتقال بالا، سناریوهای کاربرد گسترده و محصولات با درجه GMP را برای تولید تجاری ارائه می‌کنند که نتایج قابل اعتماد و مؤثر در تحقیقات و کاربردهای صنعتی را تضمین می‌کنند.

شماره گربه	نام محصول	اسید نوکلئیک	برنامه
40802ES	معرف ترانسفکشن لیپوزومی Hieff Trans®	DNA	معرف ترانسفکشن لیپوزوم با کارایی بالا
40804ES	Hieff Trans®Polybrene (هگزادیمترین بروماید) (10 میلی گرم در میلی لیتر)	LV	افزایش قابلیت عفونت عدسی ویروسی
40806ES	معرف انتقال in vitro siRNA/miRNA Hieff Trans®	siRNA، miRNA، ASO	معرف‌های ترانسفکشن اختصاصی siRNA و miRNA با راندمان شکست بالا.
40808ES	معرف ترانسفکشن جهانی Hieff Trans®	DNA، siRNA، miRNA	معرف ترانسفکشن لیپوزوم ارتقا یافته که می تواند ترانسفکشن های DNA و RNA را در انواع مختلف سلول انجام دهد و هنوز هم اثرات خوبی بر روی سلول های ترانسفکشن دشوار نشان می دهد.
40809ES	معرف انتقال mRNA Hieff Trans®	mRNA	معرف ترانسفکشن اختصاصی mRNA با راندمان انتقال بالا در انواع مختلف سلول.
40815ES	Hieff Trans®Polyethylenimine Linear (PEI) MW25000	DNA	به طور گسترده برای بیان پروتئین و بسته بندی ویروسی (شکل پودر) قابل استفاده است.
40816ES	Hieff Trans®Polyethylenimine Linear (PEI) MW40000(لیز سریع)	DNA
40820ES	معرف ترانسفکشن PEI	DNA	معرف های انتقال اختصاصی برای بسته بندی ویروسی، قادر به دستیابی به بازده بالاتر برای بسته بندی ویروسی AAV و LV
40821ES	معرف انتقال PEI -GMP	DNA
40823ES	معرف ترانسفکشن Ultra PEI-AAV	DNA	بالاترین راندمان انتقال مخصوصاً برای تولید AAV در کشت سوسپانسیون مناسب است که خروجی های بالاتری را به همراه دارد.

4. سلول های خود را برای استفاده طولانی مدت انجماد کنید

انجماد سلولی یک تکنیک حیاتی برای حفظ طولانی مدت سلول ها است که به اهدافی مانند جلوگیری از آلودگی، حفظ ثبات تجربی، تسهیل حمل و نقل و ایجاد بانک های سلولی کمک می کند. خطرات اولیه در هنگام انجماد عبارتند از تشکیل کریستال یخ و آسیب محلول. برای کاهش این خطرات، استفاده از پروتکل های انجماد آهسته و ذوب سریع ضروری است. محافظ های سرمایی مانند گلیسرول یا دی متیل سولفوکسید (DMSO) معمولاً برای کاهش تشکیل کریستال یخ و استرس اسمزی استفاده می شوند.

Yeasen دو راه حل تخصصی انجماد ارائه می دهد: CellStore Freezing برای سلول های پستانداران و Insect Cell Store Freezing برای سلول های حشرات. هر دو محصول دارای فرمولاسیون منحصر به فردی هستند که اجازه انجماد مستقیم در دمای 70- درجه سانتیگراد را بدون فرآیندهای خنک کننده پیچیده می دهد و نرخ بقای سلولی بالایی را پس از ذوب شدن فراهم می کند، به ویژه برای سلول هایی که به DMSO حساس هستند یا تمایل به جمع شدن دارند. این محلول‌ها عاری از اجزای سرم یا پروتئین هستند و از عدم آلودگی ناشی از منابع گاوی اطمینان می‌دهند و برای کشت‌های بدون سرم ایده‌آل هستند.

نام محصول	شماره گربه	مشخصات
انجماد سلول پستانداران	40128ES50	5×10 میلی لیتر
انجماد سلول پستانداران	40128ES60	100 میلی لیتر
انجماد فروشگاه سلول حشرات	40129ES50	5×10 میلی لیتر
انجماد فروشگاه سلول حشرات	40129ES60	100 میلی لیتر
محیط انجماد سلولی بدون سرم	40151ES	50 میلی لیتر / 100 میلی لیتر
محیط انجماد سلولی بدون سرم (بدون DMSO)	40152ES	100 میلی لیتر
محیط انجماد سلولی بدون سرم (برای سلول های بنیادی)	40153ES	100 میلی لیتر
محیط انجماد سلولی بدون سرم (برای سلول های بنیادی، بدون DMSO)	40154ES	100 میلی لیتر

5. جلوگیری از آلودگی برای فرهنگ های سالم

آلودگی یک مسئله رایج در کشت سلولی است که اغلب منجر به نتایج به خطر افتاده و اتلاف وقت تحقیق می شود. شناخت انواع مختلف آلودگی برای پیشگیری و درمان موثر ضروری است.

سلول مشترک آلاینده ها

• باکتری ها
• قارچ
• مایکوپلاسما
• تک یاخته
• لکه های سیاه
• ویروس ها
• متقابل گونه ها

اقدامات پیشگیرانه شامل استفاده از آنتی بیوتیک ها، ضدعفونی منظم تجهیزات، رعایت تکنیک های استریل و تمیز نگه داشتن مناطق کار می باشد. پس از تشخیص آلودگی، به طور کلی توصیه می‌شود که کشت‌های آسیب‌دیده را دور بیندازید، مگر اینکه نادر یا ارزشمند باشند. در چنین مواردی باید اقدامات لازم برای از بین بردن آلاینده انجام شود. ایجاد خطوط سلولی پشتیبان یا به دست آوردن کشت های جدید توصیه می شود.در شرایط خاص، درمان‌های تخصصی با هدف قرار دادن آلاینده‌های خاص ممکن است به بازیابی کشت‌های سلولی کمک کند. حفظ بهداشت مناسب، حصول اطمینان از جداسازی دقیق تجهیزات و حفظ محیط استریل برای جلوگیری از آلودگی و تضمین موفقیت آمیز آزمایش های کشت سلولی ضروری است.

تایپ کنید	نام محصول	شماره گربه	مشخصات
آنتی باکتریال	پنی سیلین-استرپتومایسین (100×) مناسب برای کشت سلولی	60162ES76	100 میلی لیتر
	تیمنتین	60230ES07/60	3.2/100 گرم
	نمک سولفات جنتامایسین	60214ES03/08/25	1/5/25 گرم
	مترونیدازول	60223ES25/60	25/100 میلی گرم
ضد قارچ	آمفوتریسین B	60238ES01/03	100 میلی گرم در 1 گرم
	نیستاتین	60219ES08	5 گرم
	اورئوباسیدین A	60231ES03/08	1/5 میلی گرم
تشخیص مایکوپلاسما	کیت تست مایکوپلاسما GMyc-PCR	40601ES10/20	سنجش 10/20
	کیت تشخیص مایکوپلاسما یک مرحله ای MycAway™ Plus-Color	40612ES25/60	25/100 T
حذف مایکوپلاسما	MycAway™ اسپری (آماده مصرف)	40605ES02/03/08	1/2/10×500 میلی لیتر
	MycAway™ درمان (1000×) - معرف حذف مایکوپلاسما	40607ES03/08	1/5 میلی لیتر
پیشگیری از مایکوپلاسما	MycAway™ پروفیلاکتیک (2000×) - معرف پیشگیری از مایکوپلاسما	40608ES03/08	1/5 میلی لیتر
	MycGuard™-1 راه حل (100×)	40609ES60	100 میلی لیتر
	MycGuard™-2 راه حل (500×)	40610ES60	100 میلی لیتر

نتیجه گیری

بهینه سازی فرآیندهای کشت سلولی برای تولید نتایج قابل اعتماد و قابل تکرار حیاتی است.از انتخاب آنزیم های مناسب برای هضم تا جلوگیری از آلودگی، هر مرحله در جریان کار مهم است. با ترکیب معرف‌ها و تکنیک‌های باکیفیت از Yeasen، می‌توانید به کشت‌های سلولی سالم‌تر و سازنده‌تر دست پیدا کنید که منجر به آزمایش‌ها و نتایج تحقیقاتی موفق‌تر می‌شود.

می خواهید بیشتر بدانید؟
برای راهنمایی های دقیق محصول و راه حل های بیشتر برای بهبود گردش کار کشت سلولی، از وب سایت ما دیدن کنید. خواه به آنزیم ها، رسانه ها، معرف های ترانسفکشن یا کنترل آلودگی نیاز داشته باشید، Yeasen همه چیزهایی را که برای رشد کشت های سلولی نیاز دارید، دارد.

برای اطلاعات بیشتر یا خرید به ما مراجعه کنید وب سایت رسمی.