1. مقدمه پس زمینه
استرپتاویدین یک پروتئین متصل به بیوتین است که از استرپتومایسس آویدینی مشتق شده است. اتصال غیر اختصاصی آن بسیار کمتر از آویدین است و در مقایسه با آویدین سفیده تخم مرغ که دارای بار مثبت خالص در PH خنثی است و حاوی حدود 7 درصد کربوهیدرات است، استرپتاویدین دارای خواص شیمیایی مطلوب تری مانند تقریبا بدون بار خالص در PH خنثی و بدون کربوهیدرات است. بنابراین، به طور گسترده ای به عنوان جایگزینی برای آویدین استفاده می شود.
2.ویژگی های محصول
ساختار تترامر: استرپتاویدین به عنوان یک هموتترامر با اندازه 66 کیلو دالتون وجود دارد.
میل ترکیبی بالا: هر مولکول استرپتاویدین می تواند به طور خاص به چهار مولکول بیوتین متصل شود که میل ترکیبی بسیار قوی بین آنها وجود دارد.
کاربردهای گسترده: ثابت تفکیک کمپلکس استرپتاویدین-بیوتین در محدوده نانومولاری قرار دارد، خاصیتی که معمولاً در کاربردهای زیست‌شناسی مولکولی استفاده می‌شود. در بیشتر کاربردها، می توان آن را به جای پروتئین های آنتی بادی استفاده کرد.
استخراج با کیفیت بالا: بدست آمده با تطهیر از استرپتومایسس آویدینی;
شکل 1. استرپتاویدین
محصول برنامه
کاربرد 1: رزین خالص شده با استرپتاویدین
1) اصل کاربردبر اساس برهمکنش بین استرپتاویدین و بیوتین، استرپتاویدین به شدت به آگارز 6 درصد متصل است و فرآیند آماده‌سازی منحصربه‌فرد به آن خواص فیزیکوشیمیایی بالاتری می‌دهد و به آن اجازه می‌دهد فشارهای بالاتری را تحمل کند. این می تواند به خالص سازی پروتئین هدف با نرخ جریان نسبتاً بالا دست یابد و آن را برای خالص سازی پروتئین صنعتی در مقیاس بزرگ مناسب تر می کند.
شکل 2. اصل خالص سازی رزین استرپتاویدین
2) Yeasen متعهد به ارائه محصولات با کارایی بالا برای خالص سازی پروتئین های کامل تر برای شما است.
شکل 3. پروتئین خالص شده توسط رزین استرپتاویدین
3) سوالات متداول| سوال | دلیل احتمالی | راه حل پیشنهادی |
| فشار برگشتی ستون خیلی زیاد است | بسته بندی مسدود شده است | رزین را تمیز کنید. |
| بافر لیز حاوی ذرات جامد کوچکی است، توصیه می شود قبل از بارگیری با غشای فیلتر 0.22μm یا 0.45μm فیلتر شود یا برای حذف سانتریفیوژ شود. | ||
| نمونه خیلی چسبناک است. | نمونه حاوی غلظت بالایی از اسیدهای نوکلئیک است، زمان لیز را تا کاهش ویسکوزیته افزایش دهید، یا DNase I (غلظت نهایی 5 میکروگرم بر میلی لیتر)، Mg را اضافه کنید.2+ (غلظت نهایی 1 میلی مولار)، به مدت 10-15 دقیقه روی یخ قرار دهید | |
| بافر خیلی چسبناک است | معرف های آلی یا معرف های تثبیت کننده پروتئین (مانند گلیسرول و غیره) ممکن است باعث افزایش فشار برگشتی، کاهش سرعت جریان عملیاتی شوند. | |
| پروتئین بدون هدف در جزء شستشو | برش بیش از حد پروتئین مورد نظر را دناتوره می کند | از شرایط لیز خفیف استفاده کنید. شرایط تجربی بر اساس تجربه است. |
| پروتئین هدف برای تولید رسوب تجمع می یابد | DTT را با غلظت نهایی 1-10 میلی مولار به محلول لیز پیش سلولی اضافه کنید. | |
| پروتئین هدف به طور کامل شسته نشده است | حجم شستشو خیلی کم است | حجم مایع شوینده را افزایش دهید و سرعت جریان شستشو را کاهش دهید. |
| pH بافر شستشو تغییر می کند | از شوینده تازه تهیه شده استفاده کنید | |
| زمان انکوباسیون مایع شوینده کافی نیست | زمان انکوباسیون بافر شستشو را با ژل افزایش دهید. |
کاربرد 2: گروه فلورسنت و مزدوج آنزیمی با برچسب استرپتاویدین.
شکل 4. استرپتاویدین های مزدوج مختلف
1) استرپتاویدین کونژوگه آنزیمی- استرپتاویدین کونژوگه پراکسیداز ترب کوهی (HRP).
Ⅰ. تولید شده توسط استرپتاویدین با خلوص بالا و پراکسیداز ترب کوهی از طریق یک روش خاص کونژوگه.
Ⅱ فعالیت خاص پراکسیداز را حفظ می کند. کاربردها: ایمونوهیستوشیمی (IHC)، ایمونوسیتوشیمی (ICC)، هیبریداسیون درجا (ISH) و غیره.
غلظت توصیه شده: 0.01-0.1 میکروگرم در میلی لیتر برای WB (روش نورتابی شیمیایی). 1-2μg/mL برای ELISA، HC/ICC، WB (توسعه رنگ بستر)
- استرپتاویدین کونژوگه آلکالین فسفاتاز (AP).
Ⅰ. مناسب برای تجزیه و تحلیل فاز جامد، سیستم های رنگ آمیزی بافت/سلول، و کاربردهای بلات، با پیوند کووالانسی خاص.
Ⅱ. مزدوج پایدار و بسیار فعال است.
کاربردها: ایمونوهیستوشیمی (IHC)، ایمونوسیتوشیمی (ICC)، سنجش ایمونوسپات پیوندی با آنزیم (ELISPOT)، سنجش ایمونوسوربنت پیوندی با آنزیم (ELISA)، هیبریداسیون درجا (ISH)، و کاربردهای بلات.
غلظت توصیه شده: 1-2 میکروگرم در میلی لیتر برای ELISA، IHC/ICC. 0.1-1 میکروگرم در میلی لیتر برای WB
2) استرپتاویدین های کونژوگه فلوروفور- استرپتاویدین کونژوگه Fluor® Fluorescein
Ⅰ. توصیه شده برای ایمونوفلورسانس معمول.
Ⅱ.Highly خالص با ویژگی های اتصال غیر اختصاصی بسیار کم.
Ⅲ میل ترکیبی بالا برای بیوتین.
کاربردها: ایمونوفلورسانس (IF)، هیبریداسیون درجا (ISH)، فلوسیتومتری (Flow Cyt).
غلظت توصیه شده: 0.5-2 میکروگرم در میلی لیتر (IF)
- استرپتاویدین کونژوگه DyLight™ Dye
Ⅰ می تواند برای تشخیص آنتی بادی های دوم بیوتینیله و سایر مولکول های بزرگ در ایمونوفلورسانس، هیبریداسیون درجا، یا کاربردهای فلوسیتومتری استفاده شود.
Ⅱ.Highly خالص با ویژگی های اتصال غیر اختصاصی بسیار کم.
Ⅲ میل ترکیبی بسیار بالا برای بیوتین.
Ⅳ. پایداری نور بالا، غیر حساس به pH و فلورسانس روشن تر.
کاربردها: ایمونوفلورسانس (IF)، هیبریداسیون درجا (ISH)، فلوسیتومتری (Flow Cyt).
غلظت توصیه شده: 0.5-2 میکروگرم در میلی لیتر (IF)
اطلاعات محصول
| سری محصولات | شماره محصول | نام محصول | مشخصات |
| استرپتاویدین | 35099ES | استرپتاویدین (پودر) | 100 میلی گرم در 1 گرم |
| 35101ES | استرپتاویدین (5mg/ml) | 1 میلی گرم / 5 میلی گرم / 10 میلی گرم / 100 میلی گرم / 1 گرم | |
| استرپتاویدین های کونژوگه آنزیمی | 35105ES | HRP استرپتاویدین | 100 میکرولیتر |
| 35106ES | AP استرپتاویدین | 100 میکرولیتر | |
| استرپتاویدین با برچسب فلورسنت | 35102ES | DyLight 405™ استرپتاویدین | 100 میکرولیتر |
| 35103ES | YSFluorTM 488 استرپتاویدین کونژوگه | 100 میکرولیتر | |
| 35104ES | YSFluorTM 647-استرپتاویدین کونژوگه | 100 میکرولیتر | |
| 35107ES | YSFluorTM استرپتاویدین کونژوگه 584 | 100 میکرولیتر | |
| 35108ES | استرپتاویدین کونژوگه Cy3 | 1 میلی گرم | |
| سری تصفیه استرپتاویدین | 20512ES | استرپتاویدین آگاروز رزین 6FF | 5 میلی لیتر / 5 میلی لیتر × 5/100 میلی لیتر |
| 20513ES | ستون کروماتوگرافی BiotSep Streptavidin 6FF، 1ML | 1 میلی لیتر / 1 میلی لیتر × 5 | |
| 20514ES | ستون کروماتوگرافی BiotSep Streptavidin 6FF، 5ML | 5 میلی لیتر / 5 میلی لیتر × 5 |