برچسب آنتی بادی ها مقدمه
آنتی‌بادی‌های برچسب برای تشخیص و خالص‌سازی توالی‌های برچسب بر روی بردارهای بیان تجاری مختلف برای تجزیه و تحلیل و تعیین سطوح بیان و عملکرد پروتئین‌های هدف استفاده می‌شوند. اصل پشت استفاده از آنها واکنش آنتی ژن-آنتی بادی است، جایی که این آنتی بادی های برچسب می توانند به طور خاص به پروتئین های ذوب شده با برچسب مربوطه متصل شوند. در اینجا لیست مختصری از برخی برچسب های پروتئینی رایج مناسب برای استفاده با آنتی بادی های برچسب آورده شده است:
جدول 1. مقدمه ای بر برچسب های مختلف پروتئین
| برچسب بزنید | دنباله | ویژگی ها | سناریوهای قابل اجرا |
| پرچم | DYKDDDDK | 1. وزن مولکولی کوچک، عملکرد پروتئین فیوژن را تغییر نمی دهد، آب دوست تر از برچسب های مشابه است. 2. حاوی محل تشخیص انتروکیناز (DDDDK) است که برای حذف برچسب زمانی که در انتهای N پروتئین هدف ترکیب می شود، راحت است. | مناسب برای خالص سازی و تشخیص پروتئین های همجوشی با سطح بیان پایین در سیستم های بیان یوکاریوتی. |
| HA | YPYDVPDYA | مشتق شده از آنتی ژن سطحی هماگلوتینین ویروس آنفولانزا. از استفاده در آزمایشات مربوط به سلول های آپوپتوز خودداری کنید. | مناسب برای تصفیه و تشخیص پروتئین. |
| Myc | Glu-Gln-Lys-Leu-Ile-Ser-Glu-Glu-Asp-Leu | مشتق شده از پروتوآنکوژن انسانی Myc. از استفاده در آزمایشات مربوط به سلول های انسانی خودداری کنید. | به طور کلی برای خالص سازی پروتئین استفاده نمی شود، برای تشخیص مناسب است. |
محصولات خالص سازی تمایل آنتی بادی برچسب Yeasen از آنتی بادی های مونوکلونال IgG موش با کیفیت بالا به عنوان مواد خام ساخته شده اند. این آنتی‌بادی‌ها از طریق فرآیندی به نام «زوج کووالانسی» به‌طور جهت و کارآمد با ماتریس‌های آگارز یا سطوح دانه‌های نانومغناطیسی جفت می‌شوند. این نه تنها اتصال غیر اختصاصی پروتئین را کاهش می دهد، بلکه بار آنتی بادی بالاتری را در محیط ایجاد می کند. علاوه بر این، محصولات خالص سازی آنتی بادی برچسب مناسب برای نیازهای مختلف تصفیه، از جمله رزین های مختلف تصفیه آنتی بادی برچسب و دانه های ایمونومغناطیسی را فراهم می کند، که خالص سازی پروتئین های برچسب گذاری شده و آزمایش های رسوب ایمنی را با استفاده از روش های دستی یا خودکار تسهیل می کند.
راهنمای انتخاب محصول تصفیه آنتی بادی Yeasen Tag
| سری محصولات | سری رزین های تصفیه | سری مهره ایمونومغناطیسی | |||||
| شماره محصول | 20584ES | 20586ES | 20587ES | 20565ES | 20566ES | 20567ES | 20564ES |
| نام محصول | ضد HA MagBeads | ضد MycMagBeads | |||||
| لیگاندها | آنتی بادی های مونوکلونال IgG موش با کیفیت بالا | آنتی بادی های مونوکلونال ضد GFP/Flag/HA/Myc با کیفیت بالا | |||||
| ظرفیت اتصال پروتئین | ≥1.1 میلی گرم پروتئین فیوژن/میلی لیتر ژل پرچمدار ≥ 1.5 میلی گرم پروتئین فیوژن با برچسب HA / ژل در میلی لیتر ≥0.9 میلی گرم پروتئین فیوژن با برچسب Myc/ml ژل | ≥0.8 میلی گرم پروتئین فیوژن برچسب گذاری شده با GFP/mg مهره ها ≥0.6 میلی گرم پروتئین فیوژن با برچسب پرچم/mg دانه ≥0.4 میلی گرم پروتئین فیوژن برچسب HA/mg دانه ≥0.5 میلی گرم پروتئین فیوژن با برچسب Myc/mg مهره ها
| |||||
| ماتریس | ژل آگارز با پیوند متقابل 4٪ | مهره های مغناطیسی مبتنی بر سیلیس | |||||
| اندازه ذرات | 45-165 میکرومتر | 200 نانومتر | |||||
| مزایا | اتصال غیر اختصاصی کم، ظرفیت بالا | خلوص بالا، ظرفیت بالا، ویژگی بالا، استفاده راحت با قفسه مغناطیسی | |||||
| برنامه های کاربردی توصیه شده | خالص سازی میل ترکیبی پروتئین های فیوژن برچسب گذاری شده در هر مقیاس، رسوب ایمنی (IP) | رسوب ایمنی (IP)، رسوب ایمنی همزمان (COIP) | |||||
داده های تست
1.Yeasen Anti-Flag Affinity Gel (20584ES) در مقابل تست مقایسه خالص سازی برند S*.
شکل 1. Yeasen (a) در مقابل برند S* (b) تصویر ژل مقایسه ژل ضد پرچم
M: نشانگر پروتئین؛ 1: لیزات قبل از ستون پروتئین های Flag-N، M، C. 2: نفوذ پست ستونی از پروتئین های Flag-N، M، C. 3: شستشو (pH 2.7 شستشو); 4: شستشو (شرق با pH 12)
2. فلش های شکل زیر پروتئین های برچسب گذاری شده هدف را نشان می دهد و سه نوار از بالا به پایین پس از جوشاندن مستقیم دانه های مغناطیسی BSA، زنجیره سنگین آنتی بادی و زنجیره سبک آنتی بادی هستند.
شکل 2. ضد پرچم MagBeads تصفیه پروتئین های برچسب دار
1: E. coli lysate حاوی پروتئین Flag tagged 10 μL. 2: مایع رویی پس از انکوباسیون E. coli lysate حاوی پروتئین پرچمدار با دانه های مغناطیسی 10 میکرولیتر. 3: جوشاندن مستقیم پروتئین پرچمدار با ضد پرچم MagBeads 10 میکرولیتری. 4: جوشاندن مستقیم Magbeads Anti-Flag; 5: نشانگر
3.
شکل 3. ضد GFP MagBeads تصفیه پروتئین های دارای برچسب GFP
1: لیزات E. coli حاوی پروتئین با برچسب GFP 10 میکرولیتر. 2: مایع رویی پس از انکوباسیون E. coli lysate حاوی پروتئین با برچسب GFP با دانه های مغناطیسی 10 میکرولیتر. 3: جوشاندن مستقیم پروتئین با برچسب GFP با MagBeads Anti-GFP 10 میکرولیتر. 4: جوشاندن مستقیم MagBeads Anti-GFP. 5: نشانگر
اطلاعات محصول
| نام محصول | شماره محصول | مشخصات |
| 20584ES03/08/25 | 1 میلی لیتر/5 میلی لیتر / 25 میلی لیتر | |
| 20586ES03/08/25 | 1 میلی لیتر/5 میلی لیتر / 25 میلی لیتر | |
| 20587ES03/08/25 | 1 میلی لیتر/5 میلی لیتر / 25 میلی لیتر | |
| 20565ES03/08 | 1 میلی لیتر/5 میلی لیتر | |
| ضد HA MagBeads | 20566ES03/08 | 1 میلی لیتر/5 میلی لیتر |
| ضد Myc MagBeads | 20567ES03/08 | 1 میلی لیتر/5 میلی لیتر |
| 20564ES03/08 | 1 میلی لیتر/5 میلی لیتر |