پس زمینه

ترانسفرین که با نام ترانسفرین (TRF، Tf) نیز شناخته می شود، مسئول حمل آهن جذب شده توسط دستگاه گوارش و آهن آزاد شده در اثر تخریب گلبول های قرمز است. برای تولید گلبول های قرمز بالغ به شکل کمپلکس آهن سه ظرفیتی (Tf-Fe3+) وارد مغز استخوان می شود. ترانسفرین عمدتاً در پلاسما وجود دارد. ترانسفرین موجود در پلاسما آهن را برای اکثر بافت های بدن تامین می کند، در حالی که در مناطقی که نمی تواند به آن برسد، ترانسفرین سنتز شده توسط این بافت ها باعث انتقال آهن در ناحیه محلی می شود.

شکل 1. ساختار ترانسفرین

ترانسفرین انسانی عمدتاً در کبد سنتز می شود. این یک گلیکوپروتئین تک زنجیره ای است که از دو لوب در انتهای N و C-پایانه همولوگ تشکیل شده است. ترانسفرین انسانی حاوی 678 باقیمانده اسید آمینه، نقطه ایزوالکتریک 5.9 و وزن مولکولی 76 کیلو دالتون است. هر مولکول ترانسفرین می تواند 2 یون آهن سه ظرفیتی (Fe³⁺). تعامل بین ترانسفرین و آهن³⁺ به pH بستگی دارد در pH 7.4، ترانسفرین و Fe3+ به طور موثری متصل می شوند و این دو در pH اسیدی از هم جدا می شوند.

وجود

هولو ترانسفرین، ترانسفرین نیمه اشباع، آپو ترانسفرین

مکانیسم های عملکردی

ترانسفرین (Tf) آهن را با تعامل با گیرنده آن، گیرنده ترانسفرین 1 (TfR1) متصل می کند. TfR1 یک گلیکوپروتئین است که بر روی سطح سلول بیان می شود و از دو زیرواحد همودایمری که توسط پیوندهای دی سولفید به هم متصل شده اند تشکیل شده است. در سطح سلول، Tf با Fe3+ برای تشکیل holo-Tf تعامل می کند و به گیرنده TfR1 متصل می شود و تحت اندوسیتوز وارد آندوزوم می شود. در محیط اسیدی آندوزوم، Fe3+ از Tf جدا می‌شود و STEAP3 Fe3+ را به Fe2+ کاهش می‌دهد که توسط ناقل یون فلزی دو ظرفیتی 1 (DMT1) به سیتوپلاسم منتقل می‌شود. سپس، Tf که Fe3+ را آزاد می کند، یک کمپلکس Tf/TfR1 با TfR1 تشکیل می دهد و از طریق اگزوسیتوز به سطح سلول برمی گردد. در سطح سلول، ترانسفرین (Tf) از گیرنده TfR1 جدا می شود و به apo-Tf تبدیل می شود و سپس با Fe3+ دوباره پیوند می یابد تا در چرخه آهن شرکت کند. پس از تکمیل کل فرآیند، Tf و TfR1 بازیافت می شوند و وارد چرخه بعدی جذب آهن سلولی می شوند.

شکل 2. نمودار مکانیزم چرخه ترانسفرین^[1]

عملکرد اصلی ترانسفرین

1. از تولید رادیکال های آزاد جلوگیری کنید و از رشد سلولی محافظت کنید.
2. ضد باکتری، استریل کننده، سم زدایی
3. حفظ تکثیر و رشد سلولی
4. ذخیره و حمل و نقل آهن خارج سلولی را تقویت می کند

منابع ترانسفرین

	منبع	ایمنی	تفاوت دسته ای
ترانسفرین استخراج شده طبیعی	عصاره پلاسمای انسان و گاو	ایمنی ضعیف، محصول نهایی ممکن است حاوی عوامل بیماری زا باشد	ترانسفرین از دسته های مختلف سرم انسانی یا سرم گاوی استخراج می شود و عملکرد آن بسیار متفاوت است.
ترانسفرین نوترکیب	از سلول های پروکاریوتی و یوکاریوتی بیان می شود	ایمنی خوب، محصول نهایی حاوی عوامل بیماری زا نیست	هر دسته با استفاده از یک خط سلولی با عملکرد پایدار بیان می شود

ویژگی های محصول

ایمنی خوب: این محصول چندین لایه بازرسی و آزمایش کیفیت را پشت سر گذاشته است و از آلودگی توسط عوامل بیماری زا جلوگیری می کند.

سمیت کم: سمیت سلولی بسیار کم است و هیچ تاثیری بر آزمایش های بعدی ندارد.

عملکرد پایدار: هر دسته از یک رده سلولی با حداقل تفاوت عملکرد و خلوص پروتئین بالا بیان می شود

کارکرد آسان: به سادگی محصول را به پایه اضافه کنید.

به طور گسترده قابل اجرا: می تواند برای پرورش انواع مختلف سلول استفاده شود.

سوالات متداول

Q1: آیا ترانسفرین استخراج شده یا ترانسفرین نوترکیب باید به محیط کشت بدون سرم اضافه شود؟

پاسخ: ترانسفرین استخراج شده دارای نقص هایی مانند ایمنی ضعیف و تفاوت های بزرگ دسته به دسته است. به ویژه، هنگامی که ترانسفرین استخراج شده برای کشت سلولی به محیط کشت عاری از سرم اضافه می شود، ممکن است پاتوژن های انسانی یا حیوانی (مانند ویروس بیماری جنون گاوی، ویروس کروتسفلد-جاکوب و سایر پاتوژن های ناشناخته) را وارد سلول ها کرده و سلول ها را آلوده کند. ترانسفرین نوترکیب به طور کامل از احتمال آلودگی پاتوژن جلوگیری می کند، بنابراین ترانسفرین نوترکیب باید به محیط کشت عاری از سرم اضافه شود.

س 2: آیا ترانسفرین اشباع از آهن (Holo) یا ترانسفرین آپو (Apo) باید به محیط کشت اضافه شود؟

پاسخ: هنگامی که محیط کشت حاوی آهن نیست یا محتوای آهن آن کم است، ترانسفرین اشباع شده با آهن (Holo) را انتخاب کنید. هنگامی که محیط کشت غنی از آهن است، آپو ترانسفرین را انتخاب کنید.

Q3: کدام یک بهتر است، ترانسفرین اشباع از آهن (Holo) یا Apo (Apo) ترانسفرین؟

پاسخ: استنباط نظری از تأثیر این دو غیرممکن است و نیاز به آزمایش تجربی است.

Q4: غلظت ترانسفرین در محیط کشت بدون سرم چقدر است؟

پاسخ: غلظت ترانسفرین مربوط به نوع سلول است. غلظت خاص مربوط به وضعیت سلولی، غلظت سلولی و هدف آزمایشی است.سلول های اولیه عمومی: 5-100 میلی گرم در لیتر. سلول های تخمدان همستر چینی: 10-50 میلی گرم در لیتر. سلول های هیبریدوم و ورو: 5-20 میلی گرم در لیتر

اطلاعات سفارش

نام محصول	شماره محصول	مشخصات
ترانسفرین گاوی (APO)	40102ES60/80	100 میلی گرم
ترانسفرین گاوی (HOLO)	40103ES60/80	100 میلی گرم در 1 گرم
ترانسفرین انسانی (مشتق شده از پلاسمای انسان)	40133ES60/76/80	100 میلی گرم / 500 میلی گرم / 1 گرم
هولو ترانسفرین نوترکیب انسانی	92288ES60/76/80	100 میلی گرم / 500 میلی گرم / 1 گرم
پروتئین نوترکیب انسانی آپو ترانسفرین	92289ES60/76/80	100 میلی گرم/5