Ringkasan
Coelenterazine adalah fluorescein alami yang melimpah di alam dan merupakan molekul penyimpanan energi cahaya dari sebagian besar organisme laut berpendar (lebih dari 75%). Coelenterazine dapat digunakan sebagai substrat untuk banyak enzim luciferase, seperti sea kidney luciferase (Rluc), Gaussia-secreted luciferase (Gluc), dan Photoprotein termasuk aequorin dan Obelia. Tidak seperti sistem luciferin/luciferase kunang-kunang, sistem Coelenterazine/luciferase tidak memerlukan adenosine triphosphate (ATP), sehingga memudahkan untuk mempelajari biofluoresensi in vivo. Oleh karena itu, Coelenterazine umumnya digunakan sebagai substrat berpendar untuk uji fluoresensi berdasarkan uji gen reporter dan uji hewan hidup.
Coelenterazine komersial utama yang saat ini digunakan adalah Coelenterazine asli. Ada juga banyak turunan coelenterin seperti Coelenterazine h, Coelenterazine 400a, Coelenterazine cp, Coelenterazine f, Coelenterazine hcp, Coelenterazine n yang disintesis. Secara teoritis, coelenterin ini dapat digunakan dalam percobaan yang sama, tetapi karena perbedaan panjang gelombang cahaya, permeabilitas membran sel, dan efisiensi kuantum cahaya, mereka menunjukkan efek eksperimen yang berbeda dalam aplikasi yang sama.
Spesies Coelenterazin
Dikenal juga sebagai asam bebas Coelenterazine. Zat ini merupakan substrat dari banyak enzim luciferase seperti Renilla luciferase (Rluc) dan Gaussia luciferase (Gluc), dan juga merupakan kofaktor protein luminescent ubur-ubur.
Skenario aplikasi: Deteksi konsentrasi ion kalsium dalam sel hidup, analisis laporan gen, studi BRET (Bioluminescent resonance Energy transfer), ELISA, HTS dan deteksi kemiluminesensi tingkat ROS dalam jaringan atau sel, dll.
Ini adalah substrat dari banyak enzim luciferase seperti Renilla luciferase (Rluc) dan Gaussia luciferase (Gluc), dan juga merupakan kofaktor protein luminescent ubur-ubur.
Skenario aplikasi: Intensitas cahayanya lebih dari 10 kali lebih tinggi daripada Coelenterazine Native, yang cocok untuk analisis gen reporter dan deteksi konsentrasi ion kalsium dalam sel hidup.
Coelenterazin hcp
Ini adalah salah satu turunan Coelenterazine Native. Intensitas fluoresensi kompleks Coelenterazine hcp-Aequorin adalah 190 kali lebih tinggi daripada kompleks Coelenterazine Native, dengan hasil kuantum yang tinggi dan Ca yang cepat.2+ laju reaksi, yang sangat cocok untuk mendeteksi kadar ion kalsium.
Skenario aplikasi: Cocok untuk mendeteksi kadar ion kalsium.
Dikenal juga sebagai DeepBlue CTM, merupakan salah satu turunan dari Coelenterazine Native. Zat ini merupakan substrat yang baik untuk Renilla luciferase (Rluc), dan panjang gelombang emisinya sekitar 400nm, yang memiliki sedikit gangguan terhadap sinyal protein reseptor GFP dan tidak dapat dioksidasi oleh Gaussia yang disekresikan luciferase (Gluc).
Skenario aplikasi: Ini adalah substrat Coelenterazine yang disukai untuk penelitian BRET (Bioluminescent resonance Energy Transfer).
Coelenterazin f (Kolentarazin)
Ini adalah substrat pilihan untuk aequorin, dan satu-satunya perbedaan struktural dari Coelenterazine Native adalah bahwa gugus hidroksil pada gugus fenol R-1 digantikan dengan fluor (F).Dibandingkan dengan jumlah total foton yang dihasilkan oleh kompleks Coelenterazine Native-Apoaequorin, kompleks ini hanya menghasilkan 80% energi foton. Keuntungannya adalah dibutuhkan waktu yang sangat sedikit untuk menghasilkan kompleks aequorin. Ketika bersentuhan dengan Ca2+, ia memancarkan cahaya dengan cepat dan dalam hasil tinggi, dengan intensitas produksi 20 kali lipat dari Coelenterazine Asli. Selain itu, ia memiliki permeabilitas sel yang baik.
Skenario aplikasi: Ketika kadar kalsium sangat tinggi2+ sensitivitas deteksi diperlukan untuk mempelajari eksperimen regenerasi protein ubur-ubur, penggunaan substrat direkomendasikan.
Coelenterazin cp
Ini adalah turunan dari Coelenterazine Native. Kompleks fotoprotein yang terbentuk dengan protein Apoaequorin 15 kali lebih bercahaya daripada Coelenterazine Native dan memiliki laju reaksi Ca yang lebih cepat.2+ laju reaksi.
Skenario aplikasi: Ini dapat digunakan untuk penyaringan obat-obatan reseptor protein-G (GPCR) berthroughput tinggi.
Coelenterazin n
Intensitas fluoresensinya lebih lemah di semua turunan Coelenterazine, dan laju reaksi terhadap Ca2+ secara signifikan lebih rendah dibandingkan dengan Coelenterazine Asli.
Coelenterazin dan
Turunan dari Coelenterazine Native yang secara struktural memiliki satu gugus etil lebih banyak daripada Coelenterazine Native. Sebagai substrat untuk Renilla luciferase, intensitas fluoresensinya adalah 137% dari Coelenterazine Native. Coelenterazine e memiliki reaktivitas in vitro yang tinggi terhadap protein luminescent ubur-ubur dan puncak emisi ganda (405 & 465), yang memungkinkan penentuan Ca2+ konsentrasi dalam kisaran pCa5-7 dengan rasio panjang gelombang ganda. Metode ini tidak bergantung pada konsentrasi Coelenterazine, sehingga meningkatkan akurasi deteksi. Karena permeabilitas sel dari turunan ini buruk, ia tidak memiliki keuntungan ini untuk eksperimen terkait intraseluler.
Skenario aplikasi: Substrat yang sangat berguna untuk Ca2+ deteksi sensitivitas rendah.
Coelenterazine 2-metil
Senyawa ini merupakan antioksidan seluler yang kuat. Senyawa ini dapat bekerja secara efektif pada spesies oksigen reaktif intraseluler, seperti oksigen singlet dan anion superoksida, dan stres oksidatif merupakan mata rantai antara dalam proses apoptosis. Selain itu, senyawa ini memiliki karakteristik tidak beracun dan permeabilitas membran, sehingga dapat digunakan untuk mempelajari apoptosis.
Aplikasi Produk:
1) Sebagai alat penting untuk mempelajari apoptosis;
2) Dapat juga digunakan untuk chemiluminescence untuk mendeteksi kadar anion superoksida dan anion peroksinitrit.
| Nama Produk | Berat molekul | Rumus molekul | Di (nm) | RLC* | Intensitas Relatif | Waktu setengah naik (ms)** |
| Nomor telepon 423.46 |
| 466 | 1.00 | 1 | 6-30 | |
| 407.48 |
| 466 | 0,75 | 16 | 6-30 | |
| Coelenterazin hcp | 399.48 |
| 445 | 0,65 | 500 | 2-5 |
| Coelenterazin cp | 415.48 |
| 442 | 0.63 | 28 | 2-5 |
| 425.46 |
| 472 | 0.80 | 20 | 6-30 | |
| Coelenterazin n | 457.52 |
| 468 | 0,25 | 0,15 | 6-30 |
| Coelenterazin dan | 449.5 |
| 405 dan 465 | 0.5 | 4 | 0,15-0.3 |
| 2-metil Coelenterazin | 331.37 |
| / | / | / | / |
| 391.48 |
| 400 | / | / | / |
Informasi produk
| Nama Produk | Nomor katalog | Spesifikasi |
| 40901ES01/02/03/08 | 100mg/500mg/1g/5g | |
| 40902ES01/02/03/09 | 100mg/500mg/1g/5g | |
| 40903ES01/02/03 | 100mg/500mg/1 gram | |
| 40904ES02/03/08 | 1×500 μg/2×500 μg/5mg | |
| 40905ES02/03 | 1×500 μg/2×500 μg | |
| 40906ES02/03/08 | 1×500 μg/2×500 μg/5mg | |
| Nomor telepon 40908ES02/03 | 1×500 μg/2×500 μg |
Literatur yang diterbitkan dari pengguna (statistik tidak lengkap)
- Xie J, Zheng H, Chen S, Shi X, Mao W, Wang F. Desain Rasional Reporter yang Dapat Diaktifkan untuk Pencitraan Kuantitatif Penyambungan Abnormal RNA In Vivo. Mol Ther Methods Clin Dev. 2020;17:904-911. Diterbitkan 18 April 2020.
- Lin GY, Lin L, Cai XQ, dkk. Kampanye penyaringan berthroughput tinggi mengidentifikasi agonis molekul kecil dari reseptor peptida famili relaksin 4 [diterbitkan daring sebelum cetak, 31 Maret 2020]. Acta Pharmacol Sin. 2020;10.1038/s41401-020-0390-x.
- Shao L, Chen Y, Zhang S, Zhang Z, Cao Y, Yang D, Wang MW. Efek modulasi RAMP pada profil pensinyalan famili reseptor glukagon, Acta Pharmaceutica Sinica B.
- Haifeng Zheng, Si Chen, Xinan Wang, Jinrong Xie, Jie Tian, dan Fu Wang. Reporter Bioluminesensi Tertahan Intron untuk Pencitraan Real-Time Penyambungan Pra-mRNA pada Subjek Hidup. CAnal. Chem. 2019, 91, 12392−12398
- Peiyu Xu, Sijie Huang, Chunyou Mao, ..., Xi Cheng, Yan Zhang, H. Eric Xu. Struktur kompleks reseptor-Gi dopamin D3 manusia.2021, Sel Molekuler 81, 1147–1159
- Moxuan Ji, Xinan Wang, Haifeng Zheng, Wenjie Mao, Xiaorui Shi, Si Chen, Chu Tang, dan Fu Wang Ci. Reporter Rahasia untuk Pemantauan Darah Kematian Sel Piroptotik. Dubur. kimia.
- F Hu, Y Zhang, Q Liu, Z Wang. PurA memfasilitasi Edwardsiella piscicida untuk menghindari aktivasi sinyal NF-κB.Imunologi Ikan & Kerang, 2022 - Elsevier
- Haifeng Zheng, Xinan Wang, Si Chen, Xiaorui Shi, Jinrong Xie, Wenjie Mao, Jie Tian, dan Fu Wang. Bioimaging fungsional real-time dari dinamika mikroRNA spesifik neuron selama diferensiasi neuron menggunakan reporter dual luciferase. Kimia ACS. Neurosci.DOI: 10.1021/acschemneuro.8b00614