Alat Penelitian RNA melingkar -Rnase r

Alat penelitian RNA sirkuler -RNAse R

—— Mempercepat pengembangan obat RNA sirkular

Dalam beberapa tahun terakhir, vaksin/obat mRNA secara bertahap telah memasuki visi publik. Vaksin/obat mRNA memiliki keunggulan desain cepat, biaya rendah dan produksi mudah, tetapi karena mRNA itu sendiri mudah terdegradasi, saat ini terutama meningkatkan stabilitas persiapan mRNA dengan menambahkan topi dan ekor, dan translasi mRNA yang dibantu. Dalam beberapa tahun terakhir, para peneliti telah menemukan jenis RNA baru - RNA Sirkular (Circular RNA, circRNA). RNA semacam itu adalah struktur cincin tertutup kovalen, yang tidak mudah terdegradasi. Dibandingkan dengan mRNA, circRNA lebih stabil dan dapat mencapai translasi yang tidak bergantung pada topi. Oleh karena itu, penemuan CIRCRNA memberikan kemungkinan untuk pengembangan vaksin dan obat RNA generasi baru dengan stabilitas yang lebih sederhana dan lebih baik.

Gambar 1: Proses pembuatan vaksin RNA 1

Proses produksi CIRCRNA meliputi: penyiapan template, transkripsi in vitro, penghilangan template DNA, sirkularisasi dan pemurnian. Setelah RNA disirkularisasi, perlu menggunakan ribonuclease R (Ribonuclease R, RNASE R) untuk mencerna RNA tak berawak tersebut guna mencapai tujuan pengayaan CirCRNA. Yeasen memiliki rekayasa enzimatik molekuler dan platform evolusi rasional. Hal ini memastikan kualitas produk pada saat yang sama. Yeasen Tim R&D berhasil mengembangkan Enzim RNASE R dengan kemurnian tinggi dan aktivitas tinggi.

RNASE R (Nomor katalog 14606ES) adalah eksonuklease asam ribonukleat 3'→5' ketergantungan Mg2+ yang berasal dari E. coli. Enzim ini dapat mencerna semua RNA linear dan tidak mencerna CirCRNA, RNA lariat. Enzim ini sering digunakan untuk menghilangkan molekul RNA linear dan mewujudkan tujuan pengayaan RNA non-linear seperti CirCRNA dan RNA lariat.

Fitur

Kemurnian protein (SDS-PAGE) ≥95%

Gambar 2: Deteksi kemurnian protein: Volume yang berbeda (1 μL, 2 μL, 3 μL) produk (Cat#14606ES) menunjukkan kemurnian tinggi ≥95%.

Tidak ada sisa eksonuklease

Gambar 3: 20 U RNASE R ditambahkan ke 0,5 μg λDNA-Hind III Digest, diinkubasi pada suhu 37 ℃ selama 4 jam. Hasilnya menunjukkan tidak ada residu eksonuklease terdeteksi dari produk RNASE R (CAT#14606ES).

Kemampuan pencernaan RNA linier dan Sirkulasi RNA

Gambar 4: RNASE R (CAT#14606ES) dapat mencerna molekul RNA linier
Gambar 5: CircRNA dapat menoleransi pengobatan RNASE R (CAT#14606ES).

Produk

Kucing

Ukuran

RNAse R (20U/μL)

14606ES

250U/2500U/10000U
RNase R (tingkat GMP, 20 U/μL) 14615ES 250U/2500U/10000U

Polimerase RNA T7 kelas GMP (250U/μL)

10625ES

10KU/100KU/2500KU
CleaScrip™ T7 RNA Polimerase (dsRNA rendah, 250 U/μL) 10628ES 10KU/100KU/2500KU

Referensi

  1. Qu L, Yi Z, Shen Y, dkk. Vaksin RNA sirkular terhadap SARS-CoV-2 dan varian yang muncul. Sel.2022;185(10):1728-1744.e16. doi:10.1016/j.cell.2022.03.044
  2. Chen L, Wang C, Sun H, dkk. Kotak peralatan bioinformatika untuk penemuan dan analisis circRNA. Ringkasan Bioinform. 2021;22(2):1706-1728. doi:10.1093/bib/bbaa001

Pertanyaan