Virus Demam Babi Afrika - Total Master Mix/Larutan Amplifikasi Langsung qPCR

Demam babi Afrika (ASF) adalah penyakit menular akut, parah, dan sangat menular yang disebabkan oleh virus demam babi Afrika (ASFV) yang menginfeksi babi domestik atau babi hutan. Morbiditas dan mortalitasnya dapat mencapai 100%, membahayakan industri babi global dan menyebabkan kerugian ekonomi yang tak terhitung. Organisasi Kesehatan Hewan Dunia (OIE) memasukkannya sebagai penyakit hewan yang wajib dilaporkan.

Saat ini, belum ada vaksin atau pengobatan yang efektif untuk demam babi Afrika. Diagnosis demam babi Afrika yang cepat dan akurat melalui metode diagnostik laboratorium sangat penting untuk mencegah penyebaran penyakit. qPCR sebagai alat utama untuk diagnosis rutin ASF direkomendasikan oleh OIE.

Yeasen adalah produsen dengan pengalaman yang kaya dalam R&D bahan baku IVD. Dalam menghadapi demam babi Afrika, Yeasen menanggapi secara positif dan bekerja sama dengan pelanggan untuk mengembangkan tiga solusi proses menyeluruh mulai dari ekstraksi hingga pendeteksian virus demam babi Afrika. Jadi, apa saja tiga solusi tersebut? Dan apa saja aplikasi dari solusi-solusi ini? Teruskan membaca...

Gambar 1. Yeasen Solusi deteksi Demam Babi Afrika

Solusi I: TaqMan Multiplex qPCR Master Mix (UDG plus)(pertanyaan)

YeasenTaqMan Multiplex qPCR Master Mix (UDG plus) (Cat#13171) adalah master mix yang dioptimalkan untuk deteksi ASFV yang berisi campuran enzim, Mg2+, dNTP, dan buffer. Master mix digunakan dalam langkah amplifikasi dan dikonfigurasi sebagai larutan pracampur dengan menambahkan primer dan probe. Master mix dirancang dengan faktor-faktor yang secara efektif dapat menghambat amplifikasi PCR nonspesifik dan meningkatkan efisiensi amplifikasi menjadi 4-plex.

Fitur Produk

👍Sistem anti polusi UDG, secara efektif mencegah risiko kontaminasi aerosol

👍Stabilitas jangka panjang dari larutan PCR pra-campuran (campuran utama + primer + probe) pada suhu ruangan, sangat menyederhanakan kesulitan deteksi

👍Efisiensi amplifikasi tinggi dan pengulangan yang baik

👍Cocok untuk multi-platform dan multi-sistem

Pertunjukan Kasus

👉Stabilitas jangka panjang dari larutan PCR yang telah dicampur sebelumnya
Cat#13171 digunakan untuk mengonfigurasi larutan PCR pracampur yang dapat ditempatkan pada suhu 37°C selama 7 hari, dan pembekuan dan pencairan berulang sebanyak 15 kali dalam amplifikasi sistem plasmid ASF. Hasil penelitian menunjukkan nilai Ct dan sensitivitas larutan PCR tidak berbeda secara signifikan setelah ditempatkan selama 7 hari pada suhu 37℃, dan nilai Ct tidak berubah secara signifikan setelah pembekuan dan pencairan berulang sebanyak 15 kali.

Gambar 2. Cat#13171 TaqMan Multiplex qPCR Master Mix (UDG plus)Menanyakan) digunakan dalam larutan PCR pra-campuran dengan stabilitas jangka panjang dalam amplifikasi sistem plasmid ASF. 2A-Nilai Ct pada suhu 37℃ selama 0 hari dan 7 hari 2B-Sensitivitas pada suhu 37℃ selama 0 hari dan 7 hari 2C-Stabilitas setelah pembekuan-pencairan 15 kali

👉Reagen yang Stabil dan Dapat Direproduksi
Empat kelompok berbeda dari Cat#13171 dipilih untuk mengulang percobaan amplifikasi sistem plasmid ASFV sebanyak 20 kali. Tidak ada perbedaan signifikan dalam nilai Ct, dengan CV kurang dari 1%.

Gambar 3.Uji pengulangan Yeasen Kucing #13171

👉Dapat diaplikasikan ke berbagai platform dan sistem
Yeasen Cat#13171 digunakan untuk mengamplifikasi plasmid ganda ASFV/ACT demam babi Afrika pada platform Bio-Rad CFX96, ABI Q5 dan Slan. Dapat dilihat bahwa Yeasen Cat#13171 cocok untuk berbagai jenis instrumen, dan datanya andal dan stabil.

Gambar 4. Sistem PCR Real-Time Bio-Rad CFX96


Gambar 5. Sistem PCR Real-Time ABI Q5

Gambar 6. Sistem PCR Real-Time Slan

Solusi II:Campuran induk qPCR multipleks TaqMan universal

YeasenCampuran induk qPCR multipleks Universal TaqMan (Cat#11211) dioptimalkan secara mendalam untuk amplifikasi templat konsentrasi rendah yang efisien menggunakan polimerase DNA Taq Hot-Start yang dimodifikasi antibodi dan penyangga multipleks yang cocok. Produk ini mendukung hingga reaksi PCR 4-pleks dalam tabung tunggal dan ideal untuk analisis genotipe dan qPCR multipleks.

Fitur Produk

👍Toleransi yang kuat terhadap kotoran darah, dapat digunakan dengan Yeasen reagen ekstraksi asam nukleat Cat#13720 Reagen Pelepasan Asam Nukleat V2, ideal untuk qPCR langsung
👍Sensitivitas sangat tinggi terhadap 3 salinan/reaksi, sangat meningkatkan akurasi deteksi
👍Stabilitas jangka panjang dari larutan PCR pra-campuran (campuran utama + primer + probe) pada suhu ruangan, sangat menyederhanakan kesulitan deteksi

Pertunjukan Kasus

👉Toleransi yang kuat terhadap kotoran darah
Dibandingkan dengan produk sejenis dari merek lain, Yeasen Cat#11211 memiliki toleransi yang lebih tinggi terhadap inhibitor dalam sampel darah. Hasil penelitian menunjukkan bahwa Yeasen Cat#11211 memiliki toleransi yang tinggi terhadap EDTA dan natrium sitrat, dan dapat menahan 0,5% darah utuh.

Gambar 7. Cat#11211 Campuran induk qPCR multipleks TaqMan Universal dan campuran utama dari berbagai merek digunakan untuk larutan qPCR ASF yang dilengkapi dengan 3 mM EDTA (3A), 6 mM natrium sitrat (3B), 0,5% darah (3C).

👉Sensitivitas sangat tinggi terhadap 3 salinan/reaksi

Amplifikasi plasmid ASFV dengan 20 kali ulangan dilakukan berdasarkan produk dari berbagai merek. Hasil percobaan menunjukkan bahwa tingkat deteksi Yeasen produknya lebih tinggi.

Gambar 8. Perbandingan tingkat deteksi di antara produk serupa dari berbagai merek (3 salinan dalam sistem akhir)

👉Stabilitas jangka panjang, stabil selama 7 hari pada suhu kamar

Larutan PCR sistem plasmid ganda ASFV/ACT dapat mempertahankan kinerja yang stabil setelah 7 hari pada suhu 4℃, 25℃, dan 37℃. Dapat dilihat bahwa nilai Ct dan nilai fluoresensi tidak berubah secara signifikan.

Gambar 9. Stabilitas larutan PCR

Solusi III: Amplifikasi Isotermal

YeasenProduk mendukung teknologi amplifikasi isotermal yang membantu melakukan deteksi ASF dengan lebih cepat dan lebih efisien. Cat# 14402 Hieff™ Bst Plus DNA Polimerase (40 U/μL) berasal dari DNA Polimerase I Geobacillus sp Termofilik, yang tidak memiliki aktivitas eksonuklease 5'-3'.Produk ini memiliki aktivitas polimerase DNA 5'-3' yang lebih kuat, aktivitas perpindahan untai dan toleransi dUTP, yang lebih cocok untuk reaksi amplifikasi isotermal anti-polusi, seperti LAMP, CPA, dll.

Fitur Produk

👍Efisiensi amplifikasi tinggi

👍Amplifikasi Hasil Tinggi

👍Toleransi dUTP, dapat digunakan dalam kombinasi dengan Cat#10303 Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG)Menanyakan), tidak tahan panas, 1 U/μL untuk mencegah risiko kontaminasi aerosol

Pertunjukan Kasus

👉Alternatif yang lebih unggul untuk produk merek N* impor

Proses amplifikasi dilakukan dengan menggunakan DNA polimerase Bst dari Yeasen dan Perusahaan N*. Tidak ada perbedaan signifikan dalam nilai Ct dan intensitas fluoresensi antara berbagai merek.

Gambar 10. Kurva amplifikasi berbagai merek

Memesan produk

Yeasen menyediakan berbagai produk untuk mendeteksi ASFV dalam tiga solusi di atas. Produk yang dijelaskan dan produk terkait tercantum dalam tabel di bawah ini. Silakan pilih metode deteksi yang tepat dan produk optimal sesuai dengan kebutuhan Anda.

Kategori

Deskripsi Produk

Nama Produk

SKU

Ekstraksi

Ekstraksi manik magnetik

Reagen Pelepasan Asam Nukleat V2 (Menanyakan)

13720ES

Campuran qPCR

Campuran stabil

Campuran Master Hieff Unicon™ TaqMan Multiplex qPCR (UDG plus)Menanyakan)

13171ES

Sensitif tinggi

Campuran induk qPCR multipleks Hieff Unicon™ Universal TaqMan

11211ES

Enzim dan Antibodi

Tak

Hieff UNICON™ HotStart Direct Taq DNA Polimerase (Menanyakan)

10717ES

antibodi taq

Antibodi DNA Polimerase anti-Taq Blok Ganda Hieff™

31303ES

Terbaik

Hieff™ Bst Plus DNA Polimerase (40 U/μL)

14402ES

Hieff™ Bst Plus DNA Polimerase (2000 U/μL)Menanyakan)

14403ES

UDG

Uracil DNA Glikosilase (UDG), tidak tahan panasMenanyakan)

10303ES

Mengenai membaca:

Yeasen Solusi Biologi untuk Mendeteksi Virus Demam Babi Afrika

Wabah virus cacar monyet di seluruh dunia, apa yang harus kita lakukan? -Yeasen menyediakan bahan baku enzim untuk deteksi virus

Pertanyaan