Apakah Anda masih terganggu dengan rendahnya efisiensi rekombinasi homolog multi-fragmen atau fragmen super panjang dan jumlah koloni yang kecil?
Masih untuk pembawa atau fragmen lebih berharga, hasil rendah, untuk menghemat bahan baku, penggunaan ligasi konsentrasi rendah sistem kecil, tetapi efisiensi ligasi rendah dan terganggu?
Perbandingan kloning satu langkah dengan metode kloning pembatasan enzim tradisional
| Metode | Persiapan fragmen penyisipan | Pembatasan situs pembatasan | Properti universal | Waktu koneksi | Tingkat positif |
| Teknik kloning rekombinan cepat satu langkah | Langkah 1 Pemurnian | Tidak ada | Bahasa Indonesia: ★★★★★ | Waktu tercepat adalah 5 menit | Hingga 95% |
| Teknik pembatasan pencernaan dan kloning ligasi | Langkah 2 pemurnian | Ya | ★★ | menghabiskan malam | Gen yang berbeda sangat bervariasi |
Keunggulan Produk
Orientasi: 1-7 fragmen DNA kloning satu langkah.
Sederhananya: Beberapa fragmen dapat diikat dalam satu tabung.
Cepat: Ligasi tercepat dalam 5 menit.
Efisiensi tinggi: Tingkat kloning positif tinggi.
Sistem kecil: Total sistem ligasi dapat serendah 6 μL.
Panjang berlebih: Di atas 25 kb (Panjang pembawa+fragmen) untuk ligasi.
Pertunjukan Menampilkan
- Rekombinasi efisien dari satu fragmen sistem kecil 6 μL
Gbr. 1 10 ng fragmen tunggal input rendah diligasi dalam keadaan sel reseptif non-resusitasi dari sistem kecil 6 μL.Hasil penelitian menunjukkan bahwa 10923ES memiliki kinerja yang lebih baik daripada produk pesaing, dengan efisiensi ligasi yang tinggi, lebih banyak koloni, dan rasio positif sebesar 100%. AB: Plat konversi yang direkonstitusi. Rasio molar pembawa (10 kb) terhadap fragmen sisipan (1 kb) adalah 1:2. C: Identifikasi PCR terhadap fragmen sisipan. M:
- Rekombinasi efisien multi-fragmen
Gambar 2 Enam fragmen (7,6 kb) diligasi. Hasil penelitian menunjukkan bahwa 10923ES memiliki kinerja yang lebih baik daripada produk pesaing, dengan lebih banyak koloni dan rasio positif sebesar 100%. AB: Plat konversi yang direkonstitusi. Rasio molar pembawa (11,6 kb) terhadap fragmen sisipan (7,6 kb) adalah 1:2. C: Identifikasi PCR terhadap fragmen sisipan. M:
- Rekombinasi multifragmen yang efisien dengan konsentrasi rendah
Gambar 3 Ligasi fragmen konsentrasi rendah lima dan enam secara terpisah. Hasil penelitian menunjukkan bahwa 10923ES menunjukkan konektivitas yang stabil pada konsentrasi rendah, dengan jumlah bakteri yang tinggi dan tingkat positif 100%. AB: Plat Konversi Rekombinan. CD: Gambar elektroforesis identifikasi PCR fragmen penyisipan, M:
- Stabilitas Reagen
Gambar 4 Setelah ditempatkan pada suhu 37℃ selama 7 hari, hasilnya menunjukkan bahwa 10923ES tetap stabil dalam menghubungkan lima dan enam fragmen pada konsentrasi rendah. AF: Plat Konversi Rekombinan. GH: Gambar elektroforesis identifikasi PCR fragmen penyisipan, M:
Kasus Pelanggan
-
Reorganisasi sistem kecil yang efisien
Gbr. 5 10923ES diligasikan ke satu fragmen dalam Sistem reaksi kecil 10 μL, dengan tingkat positif 100%. A: Plat konversi yang telah direkonstitusi. B: Identifikasi PCR dari fragmen sisipan. Ukuran pembawa: 5.631 bp; Ukuran fragmen target: 1.384 bp.
Gambar 6 10 μL Klon mutasi titik dan sambungan fragmen tunggal sistem kecil, laju positif 100%. A & C: Plat transformasi rekombinasi. B: Identifikasi PCR terhadap fragmen sisipan, lajur 1-5 adalah koloni 1, koloni 2, kontrol negatif, kontrol positif (genom sebagai templat), kontrol positif (fragmen yang dimurnikan dengan PCR sebagai templat). D: Elektroforegram identifikasi PCR terhadap fragmen sisipan.
-
Rekombinasi efisien fragmen pendek konsentrasi rendah
Gbr. 7 10923ES menghubungkan fragmen konsentrasi rendahDibandingkan dengan produk pesaing, jumlah koloni tinggi, dan rasio positif (10/11) >90,9%. AB: Plat konversi yang direkonstitusi. C: Identifikasi PCR dari fragmen sisipan. Ukuran pembawa: 3.000 bp; ukuran fragmen target: 441 bp.
-
Ligasi multi segmen yang efisien dan cepat
Ara.8 10923ES ligasi empat segmen, GC tinggi dan koneksi kombinasi segmen pendek, dibandingkan dengan merek S, memiliki jumlah bakteri 10923ES yang lebih tinggi dan rasio positif 100%. D: Tablet konversi rekombinan. E: Sisipkan peta identifikasi sekuensing fragmen. F: Sekuensing Sanger mengonfirmasi koneksi yang berhasil antara vektor dan fragmen, dan sekuensing di lokasi koneksi sudah benar.
Rekomendasi Produk Kekuatan Bintang
Saluran Pesanan 10923ES
| Orientasi Produk | Nsaya | Seni.Tidak | Sspesifikasi |
| 1 – 7 fragmen digabungkan dalam satu langkah dan reaksi rekombinasi diselesaikan dalam waktu 5 menit tercepat | Klon HieffWaktu Standar Kit Kloning Universal II Satu Langkah | 20T/50T |
Rgembira Pproduk
| Orientasi produk | Nsaya | Seni.Tidak | Sspesifikasi |
| PCR fidelitas tinggi | 2× Hieff CanaceWaktu Standar Campuran Master PCR AdvanceFast (Dengan Pewarna) | 1ml/5×1ml | |
| Peningkatan PCR cepat, dapat berupa PCR koloni dan cocok untuk amplifikasi templat kompleks | 2×HieffWaktu Standar Campuran Master PCR HotStart Ultra-Cepat II | 1ml/5×1ml |