Asam nukleat berfungsi sebagai dasar dari semua penelitian biologi molekuler. Selain itu, kualitas asam nukleat yang diekstraksi juga merupakan salah satu faktor kunci yang menentukan keberhasilan atau kegagalan eksperimen hilir. Saat mengembangkan reagen ekstraksi asam nukleat, selain komponen kimia konvensional, beberapa asam nukleat atau enzim molekul kecil dapat sangat meningkatkan efisiensi ekstraksi atau menghilangkan gangguan zat non-target dan menjadi komponen penting dalam ekstraksi asam nukleat.
Tentang zat pembantu untuk presipitasi asam nukleat
RNA pembawa
- Konsep dan fungsi RNA pembawa
RNA pembawa, juga dikenal sebagai alat bantu pengendapan asam nukleat dalam bahasa Mandarin. Dalam proses ekstraksi asam nukleat, tabung sentrifus yang digunakan untuk ekstraksi sebagian besar terbuat dari polipropilena. Terdapat listrik statis pada dinding tabung, yang akan menyerap asam nukleat. Penggunaan RNA pembawa dalam proses ekstraksi dan pemurnian dapat membantu asam nukleat menghilangkan efek elektrostatik, memastikan bahwa asam nukleat dapat diserap dengan baik ke dalam kolom pemurnian, meningkatkan efisiensi elusi, dan dengan demikian mencapai pemulihan asam nukleat dalam sampel sebanyak mungkin.
- Jenis-jenis umum RNA pembawa
Sebagai zat pembantu dalam presipitasi asam nukleat, RNA pembawa mempunyai beberapa jenis, seperti garam kalium PolyA, total RNA E. coli, total RNA ragi, tRNA, dan lain-lain.
- Masalah Umum dalam Penggunaan RNA pembawa
Apakah RNA Pembawa masih dapat digunakan setelah disimpan pada suhu ruangan selama beberapa waktu? Apakah degradasi RNA Pembawa memengaruhi penggunaannya? Apakah RNA Pembawa memengaruhi eksperimen selanjutnya?
RNA pembawa dilarutkan dalam pelindung RNA. RNA pembawa cair memiliki dampak kecil saat ditempatkan pada suhu 37°C atau suhu ruangan untuk waktu yang singkat (dalam 7 hari). Pada dasarnya, RNA pembawa adalah fragmen dalam kisaran 500 nt hingga 1000 nt. Degradasi ringan tidak memengaruhi penggunaan normal. Untuk aplikasi hilir seperti PCR kuantitatif fluoresensi, RNA pembawa tidak memiliki efek pada nilai Ct. Untuk aplikasi hilir seperti NGS, RNA pembawa dapat ditambahkan sesuai dengan kebutuhan aktual.
- Pengenalan Produk RNA pembawa
Nama Produk | Produk Nomor | Spesifikasi | Kondisi Penyimpanan dan Umur Simpan |
RNA pembawa, 6 μg/μL | 19701ES | 1ml/5ml/100ml | Disimpan pada suhu -25 hingga -15 °C. Masa simpan 2 tahun. |
Bubuk RNA Pembawa, 216 μg/tabung | tahun 19703ES | 1 tabung / 100 tabung / 1000 tabung | Disimpan pada suhu ruangan. Umur simpan 2 tahun. |
19704ES | 1 tabung / 100 tabung / 1000 tabung | Disimpan pada suhu ruangan. Umur simpan 2 tahun. |
Larutan akrilamida linier
- Konsep dan fungsi larutan akrilamida linier
Akrilamida linier, dengan nama Inggris Akrilamida Linier (Poliakrilamida Linier, disingkat LPA), adalah kopresipitan yang membantu mengendapkan asam nukleat selama proses pemurnian asam nukleat.
- Karakteristik larutan akrilamida linier
Zat ini merupakan pembawa netral dan tidak berasal dari biologis. Oleh karena itu, zat ini tidak mengandung potensi kontaminasi asam nukleat atau nuklease.
Ini tidak akan mengganggu pembacaan A260/A280 dan tidak akan menghambat aktivitas polimerase dan endonuklease restriksi.
Kompatibel dengan aplikasi biologi molekular berikutnya seperti PCR dan pencernaan enzimatik.
Ini dapat membantu dalam mengendapkan DNA dan RNA (termasuk Oligo) pada tingkat pikogram atau di atasnya. Panjang fragmen yang dapat dipulihkan adalah di atas 20 nukleotida, dan asam nukleat untai tunggal dan untai ganda dapat digunakan.
- Pengenalan Produk
Nama Produk | Produk Nomor | Spesifikasi | Kondisi Penyimpanan dan Umur Simpan |
Larutan Akrilamida Linier (5 mg/mL) | 10408ES | 1 ml air | Disimpan pada suhu 4 °C. Umur simpan 3 bertahun-tahun. |
Enzim bantu ekstraksi asam nukleat
RNAse A (asam amino)
- Konsep dan fungsi RNase A
Ribonuklease A (RNase A), sebagai endoribonuklease, secara khusus mendegradasi residu sitosin (C) atau urasil (U) pada RNA untai tunggal. Aplikasi ribonuklease A (RNase A) yang paling umum adalah untuk menghilangkan RNA selama persiapan DNA plasmid atau DNA genomik. Selain itu, produk ini juga dapat digunakan dalam eksperimen biologi molekuler seperti uji perlindungan RNase dan analisis urutan RNA.
- Karakteristik RNase A
RNase A berasal dari pankreas sapi. Tidak ada kontaminasi deoksiribonuklease endo- dan eksonuklease. Dapat digunakan langsung tanpa pemanasan awal dan tahan terhadap lingkungan bersuhu tinggi.
- Pengenalan Produk
Nama Produk | Produk Nomor | Spesifikasi | Kondisi Penyimpanan dan Umur Simpan |
RNase A (100 mg/ml) | 10406ES | 1 ml air | Disimpan pada suhu -20°C. Masa simpan 2 tahun. |
RNase A (10 mg/ml) | 10405ES | 1 ml | Disimpan pada suhu ruangan.Umur simpan adalah 1 bertahun-tahun. |
10407ES | 100mg/1 gram | Disimpan pada suhu ruangan. Umur simpan 2 tahun. |
Deoksiribonuklease I (DNase I)
Deoksiribonuklease I (DNase I), suatu endonuklease yang ditemukan di berbagai sel dan jaringan, menargetkan dan membelah ikatan fosfodiester yang berdekatan dengan pirimidin, menghasilkan polinukleotida dengan gugus fosfat di ujung 5' dan gugus hidroksil di ujung 3'. Produk pencernaan minimum rata-rata adalah polimer tetra-nukleotida. DNase dapat mengkatalisis berbagai bentuk DNA, seperti DNA untai tunggal, DNA untai ganda, dan bahkan kromatin (yang laju pembelahannya dipengaruhi oleh histon). Dalam percobaan biologi molekuler, enzim ini sering digunakan untuk menghilangkan DNA dari protein atau untuk memasukkan torehan ke dalam DNA guna memasukkan basa berlabel ke dalam DNA.
2.Karakteristik DNase I
Kisaran kerja optimal DNase I adalah pH 7-8, dan aktivitasnya bergantung pada Ca2+ dan dapat diaktifkan oleh ion logam divalen seperti Co2+, M N2+, Seng2+, dll. 5 mM Ca2+ dapat melindungi enzim dari hidrolisis. Dengan adanya Mg2+, enzim ini dapat mengenali dan memotong secara acak situs mana pun di salah satu untai DNA; sementara di hadapan Mn2+, ia dapat mengenali kedua untai DNA secara bersamaan dan memotong di tempat yang hampir sama.
3. Pengenalan Produk
Nama Produk | Produk Nomor | Spesifikasi | Kondisi Penyimpanan dan Umur Simpan |
Deoksiribonuklease I (DNase I) dari pankreas sapi | 10607ES | 15 KU/10×15KU | Disimpan pada suhu -20°C. Masa simpan 2 tahun. |
Deoksiribonuklease I (DNase I) dari pankreas sapi | 10608ES | 25mg/100mg/1 gram | Disimpan pada suhu -20°C. Masa simpan 2 tahun. |
Proteinase K
1.Konsep dan Fungsi Proteinase K
Proteinase K (Proteinase K) merupakan protease serin dengan berbagai macam aktivitas pembelahan. Berat molekul relatifnya sekitar 29,3 kDa dan dapat membelah ikatan peptida karboksil-terminal dari asam amino alifatik dan asam amino aromatik. Proteinase K memiliki berbagai macam aplikasi dan dapat digunakan dalam percobaan seperti menyiapkan DNA kromosom untuk elektroforesis gel medan-pulsa, Western blotting, dan menghilangkan nuklease dalam sediaan DNA dan RNA. Agen denaturasi seperti SDS (1%) dapat meningkatkan aktivitasnya.
2.Karakteristik Proteinase K
Berasal dari strain ragi rekombinan genetik.
Bebas dari RNase dan DNase.
Aktif dan stabil dalam urea dan SDS.
Aktif dalam rentang pH yang luas (pH 4,0 - 12,0), dan kisaran pH optimal adalah pH 7,5 - 9,0.
Nama Produk | Produk Nomor | Spesifikasi | Kondisi Penyimpanan dan Umur Simpan |
10401ES | 100mg/1 gram/5 gram/100 gram | Disimpan pada suhu 4°C. Umur simpan 3 tahun. bertahun-tahun. | |
Larutan Proteinase K (20 mg/mL) | 10412ES | 1ml/10ml/25ml/500ml | Disimpan pada suhu 4°C. Umur simpan 2 tahun. bertahun-tahun. |
Larutan Proteinase K (20 mg/mL) | 10410ES | 1ml/10ml/25ml/500ml | Disimpan pada suhu 4°C. Umur simpan 2 tahun. bertahun-tahun. |
Stabilisator RNA
Larutan penstabil RNA untuk jaringan hewan dan tumbuhan
1.Fungsi larutan penstabil RNA untuk jaringan hewan dan tumbuhan
RNase banyak terdapat di lingkungan dan sangat mungkin merusak RNA dalam sampel jaringan hewan dan tumbuhan, darah, cairan tubuh, dll. Penstabil jaringan RNAsafe untuk jaringan hewan dan tumbuhan (RNAsafe Tissue Stabilizer) secara khusus dikembangkan untuk menstabilkan dan melindungi RNA dalam sampel yang dikumpulkan. Sebagai larutan tidak beracun, ia dapat dengan cepat menembus jaringan dan menonaktifkan RNase endogen.
2.Karakteristik larutan penstabil RNA untuk jaringan hewan dan tumbuhan
Sangat mudah dioperasikan: Cukup potong jaringan segar menjadi blok jaringan dengan ukuran yang sesuai (≤0,5 cm) dan rendam dalam RNAsafe dengan volume 5 hingga 10 kali lipat.
Periode stabilisasi yang panjang: Jaringan/sel yang diinfiltrasi dengan RNAsafe dapat disimpan pada suhu 37°C selama 1 hari, pada suhu kamar selama 1 minggu, pada suhu 4°C selama 4 minggu, dan untuk penyimpanan jangka panjang pada suhu -20°C/-80°C.
Kompatibilitas hilir yang luas: Kompatibel dengan hampir semua metode isolasi RNA, seperti HieffTM Total RNA Extraction Reagent (nomor katalog: 10606ES60), dan hampir semua kit ekstraksi RNA komersial, termasuk metode ekstraksi kolom sentrifugal dan metode pemurnian manik magnetik.
Aplikasi bahan yang luas: Dapat digunakan untuk pengawetan berbagai jaringan hewan dan tumbuhan (seperti otak, jantung, hati, pankreas, ginjal, limpa, testis, otot, batang dan daun tanaman, dll.), dan juga untuk ragi, sel kultur jaringan, dll.
3. Pengenalan Produk
Nama Produk | Produk Nomor | Spesifikasi | Kondisi Penyimpanan dan Umur Simpan |
Penstabil Jaringan RNAsafe RNAsafe | nomor seri 10604ES60 | 100 ml air | Disimpan pada suhu ruangan. Umur simpan 5 bertahun-tahun. |
Produk Terkait
Nama Produk | Produk Nomor | Spesifikasi | Kondisi Penyimpanan dan Umur Simpan |
Lisozim | 10402ES | 5/50 G | Disimpan pada suhu -20°C. Umur simpan 3 tahun. bertahun-tahun. |
Litikase (10 U/μL) | 10403ES | 1500/3000/10000 tahun | Disimpan di -20°C. |
siput | 10404ES | 5/10 G | Disimpan pada suhu 2-8°C. Umur simpan 2 bertahun-tahun. |
RNA aman-ICE | 10605ES | 100 ml air | Disimpan pada suhu ruangan. Umur simpan 2 bertahun-tahun. |