Pemurnian protein merupakan teknik dasar dalam biokimia dan biologi molekuler, yang banyak digunakan dalam penelitian, diagnostik, dan aplikasi terapeutik. Untuk mempelajari protein tertentu, langkah pertama adalah mengisolasi dan memurnikannya dari sampel biologis. Namun, memperoleh protein dengan kemurnian tinggi dapat menjadi tantangan, mengingat keragaman protein dan kompleksitas sistem biologis. Memahami prinsip inti pemurnian protein dan memilih teknik yang tepat untuk penelitian Anda dapat meningkatkan efisiensi dan hasil alur kerja Anda.
Dasar-Dasar Pemurnian Protein
Pemurnian protein bergantung pada perbedaan sifat fisik dan kimia protein, seperti ukuran, muatan, sifat hidrofobisitas, dan afinitas terhadap ligan tertentu. Dengan memanfaatkan perbedaan ini, para peneliti dapat secara efektif memisahkan protein target dari komponen biologis lainnya, sehingga meminimalkan kontaminasi.
Berikut adalah teknik pemurnian protein utama berdasarkan mekanisme pemisahan yang berbeda:
|
| Filtrasi Gel | Pertukaran Ion | Interaksi Hidrofobik | Afinitas |
| Mekanisme Pemisahan | Ukuran | Muatan Permukaan Protein | Hidrofobisitas | Afinitas Spesifik |
| Selektivitas | Sedang | Tinggi | Tinggi-Sedang | Sangat Tinggi |
| Kapasitas Beban | Rendah | Tinggi | Tinggi | Tinggi |
| Kecepatan Pemurnian | Sedang-Rendah | Tinggi | Tinggi | Tinggi |
| Biokompatibilitas | Sangat bagus | Bagus | Sedang-Baik | Bagus |
| Target Hasil Protein | Tinggi | Tinggi | Sedang-Tinggi | Tinggi |
Masing-masing teknik ini dapat dioptimalkan dengan memilih bahan dan kolom yang tepat. Metode yang ideal bergantung pada karakteristik protein dan tingkat kemurnian yang dibutuhkan untuk aplikasi hilir.
Mengoptimalkan Alur Kerja Pemurnian Protein Anda dengan Ysantai saja Produk Biologi
Pada
Tag pemurnian proteinnya ((Kategori: 20502ES):
Dalam ekspresi protein rekombinan, Tag nya (biasanya 6×His) digunakan secara luas karena ukurannya yang kecil, imunogenisitas rendah, dan dampak minimal pada fungsi protein. Protein tagnya dapat dimurnikan secara efisien oleh resin afinitas yang dikelat dengan ion nikel, seperti resin Ni-NTA. Resin Agarosa HisSep Ni-NTA (Cat#20502ES) disediakan oleh Ysantai saja Biologi menggunakan gel agarosa yang sangat berikatan silang sebagai matriks, dikombinasikan dengan ligan nitrogen-triasetat (NTA) yang terkoordinasi empat kali untuk membentuk kelat ion nikel yang stabil. Struktur gabungan memastikan pengikatan protein dan kinerja elusi yang efisien.
Pemurnian afinitas antibodi tag
Pemurnian afinitas antibodi tag memanfaatkan pengikatan spesifik tinggi antara antibodi dan tag spesifiknya untuk mencapai pemurnian protein fusi. Tag umum meliputi: Bendera, HA, Myc, dll. Dengan memanfaatkan media afinitas antibodi yang sesuai, protein yang diinginkan dapat diisolasi secara efisien dari sampel yang kompleks.
- Afinitas Anti-Bendera Gel (Kucing#20584ES):
Disiapkan dari antibodi monoklonal murine IgG2b berkualitas tinggi dengan gel agarosa 4% yang berikatan silang tinggi melaluikopling pasokan ugh, ia memiliki kapasitas pemuatan protein fusi Flag-tag yang tinggi, sucocok untuk imunopresipitasi dan pemurnian protein Flag-tag.Yeasen .com
- Gel Afinitas Anti-HA(Kucing #20586Bahasa Inggris):
Disiapkan dari antibodi monoklonal murine IgG1 berkualitas tinggi dan gel Sepharose 4B melalui penggandengan pasokan, ia memiliki kapasitas pemuatan protein fusi tag HA yang tinggi, cocok untuk imunopresipitasi dan pemurnian protein tag HA.Yeasen .datang
- Gel Afinitas Anti-Mik(Kucing #20587Bahasa Inggris):
Antibodi monoklonal murine IgG1 berkualitas tinggi digabungkan dengan gel Sepharose 4B, yang dirancang untuk pemurnian protein berlabel Myc, dengan spesifisitas tinggi dan kemampuan pengikatan tinggi.
- Manik Imunomagnetik Anti-Bendera(Kucing#20565ES):
Manik imunomagnetik ini digabungkan dengan mikrosfer agarosa magnetik menggunakan antibodi monoklonal IgG2b turunan tikus berkualitas tinggi, yang dapat dengan cepat memurnikan protein berlabel Flag di bawah aksi medan magnet, dan cocok untuk pemurnian ukuran sampel kecil.
Pemurnian afinitas antibodi (Cat#36401ES):
Pemurnian afinitas antibodi adalah metode penggunaan pengikatan spesifik antibodi terhadap antigennya untuk pemurnian protein. Resin pemurnian agarosa protein A rekombinan tahan alkali (Cat#36401ES) umumnya digunakan sebagai media pemurnian afinitas antibodi dan digunakan secara luas untuk pemurnian dan pengayaan antibodi.
Proteinase
Dalam studi protein, protease digunakan untuk membelah tag fusi, memulihkan keadaan alami protein target. Memasukkan protease ini ke dalam alur kerja pemurnian protein Anda dapat meningkatkan kualitas dan fungsionalitas protein target Anda, memfasilitasi proyek penelitian dan pengembangan tingkat lanjut.
- Enterokinase Rekombinan (Cat#20401ES):
Enterokinase, juga dikenal sebagai enteropeptidase, adalah protease serin yang secara khusus membelah urutan asam amino DDDDK.
- akuPNGase F (Cat#20407ES):
PNGase F merupakan amidase yang secara khusus membelah antara residu GlcNAc dan Asn terdalam dari glikoprotein terkait-N.
- Tripsin Rekombinan (MS-SAFE) (Cat#20416ES):
Tripsin merupakan protease serin yang memecah ikatan peptida pada sisi karboksil residu lisin dan arginin.
| Pemurnian Metode | Jenis Reagen | Tipe Produk | Produk yang Direkomendasikan |
| Filtrasi Gel | Dekstran Gel Kromatografi | Pengisi Penghilang Garam Pengeluaran Garam dari Kolom yang Sudah Dikemas Kolom Gravitasi Desalting Kolom Putar
| Kolom Penghilang Garam G25 M(Kucing#20590ES) Kolom Desalinasi Putar, 0,5 mL (Kucing#20599ES) Kolom Desalinasi Gravitasi, 8.3 ml (Kucing#20741ES) |
| Agarosa Gel Kromatografi | Pengisi Kolom yang sudah dikemas | Kemasan Kromatografi Gel Agarosa Resolusi Tinggi Geldex 200 PG (10-600 kDa) (Cat#20598ES) Kolom Kromatografi Geldex 200 PG (Kucing#20593ES) | |
| Pertukaran Ion | Pertukaran Anionik Kromatografi | Pengisi Kolom yang sudah dikemas | Q Agarose HP (Kemasan Kromatografi Pertukaran Anion Q Strong HP) (Cat#20460ES) Kolom Pertukaran Anion Kuat Q HP yang Dikemas, 5 mL (Cat#20462ES) |
| Kromatografi Pertukaran Kationik | SP Agarose HP (SP Strong Cation Exchange Chromatography Packing HP) (Cat#20463ES) Kolom Pertukaran Kation Kuat SP HP, 5 mL (Cat#20465ES) | ||
| Kromatografi Interaksi Hidrofobik | Hidrofobik Lemah Kromatografi | Pengisi Kolom yang sudah dikemas | Media Kromatografi Hidrofobik Butil Lemah Resolusi Tinggi (Cat#20484ES) Kolom Pramuat Kromatografi Hidrofobik Lemah Butil HP, 5 mL (Cat#20485ES) |
| Hidrofobik Kuat Kromatografi | Media Kromatografi Fenil Hidrofobik Resolusi Tinggi (Cat#20486ES) Kolom Pramuat Kromatografi Hidrofobik Kuat Fenil HP, 5 mL (Cat#20487ES) | ||
| Pemurnian Afinitas | Tag-nya Pemurnian Protein | Damar Kolom yang sudah dikemas Manik Magnetik Pemurnian
| Resin Pemurnian Protein Agarosa His-tag (Kat#20502ES) Kolom Pramuat Pemurnian Protein His-tag, 5 mL (Cat#20504ES) Manik Magnetik Pemurnian Protein His-tag (Cat#20561ES) |
| PPN-menandai Pemurnian Protein | Damar Kolom yang sudah dikemas Manik Magnetik Pemurnian
| Resin Glutathione Agarose (untuk pemurnian protein berlabel GST) (Cat#20507ES) Kolom Pramuat Pemurnian Protein Berlabel GST, 5 mL (Cat#20510ES) Manik Magnetik Pemurnian Protein Berlabel GST (Cat#20562ES) | |
| MBP-menandai Pemurnian Protein | Damar Kolom yang sudah dikemas
| Resin Pemurnian Berikatan Silang Tinggi Protein Berlabel MBP (Cat#20515ES) Kolom Pramuat Pemurnian Protein Berlabel MBP, 5 mL (Cat#20517ES) | |
| radang tenggorokan(Ⅱ) Menandai Pemurnian Protein | Damar Kolom yang sudah dikemas
| Resin Pemurnian Agarosa Protein Berlabel Strep(II) (Cat#20495ES) | |
| Biotik-menandai Pemurnian Protein | Damar Kolom yang sudah dikemas Manik-manik Imunomagnetik | Resin Pemurnian Streptavidin Agarose (Cat#20512ES) Kolom Pramuat Pemurnian Molekuler Biotin, 5 mL (Cat#20514ES) Manik-manik Imunomagnetik Streptavidin (SAV) (Cat#47503ES) | |
| Tag Pemurnian Afinitas Antibodi | Gel Manik-manik Imunomagnetik | Gel Pemurni Afinitas Anti-Bendera (Kat#20584ES) Gel Pemurni Afinitas Anti-HA (Kat#20586ES) Gel Pemurni Afinitas Anti-Myc (Kat#20587ES) Manik Imunomagnetik Anti-Bendera (Kat#20565ES) | |
| Pemurnian Afinitas Antibodi | Damar Kolom yang sudah dikemas Manik-manik Imunomagnetik | Resin Pemurnian Agarosa Protein A Rekombinan (Kat#36401ES) Resin Pemurnian Protein G Agarosa (Cat#36405ES) Resin Pemurnian Agarosa Protein A/G (Cat#36403ES) Manik-manik Imunomagnetik Protein A/G (Kat#36417ES) | |
| Pemurnian Afinitas Antibodi Lainnya | Damar Kolom yang sudah dikemas
| Resin Pemurnian Efisiensi Tinggi untuk Penghapusan Endotoksin (Cat#20518ES) Media Pemurnian Afinitas Heparin (Cat#20493ES) | |
| tempat sampah | Protease | Tag Enzim Pembelah Glikosidase Enzim Kelas Spektrometri Massa | Bahasa Indonesia: E.coli yang mengekspresikan enterokinase rekombinan (tanpa label) (Kat#20401ES) Trombin Sapi (Viabilitas Tinggi, >2000 IU/mg) (Cat#20402ES) Protease rTEV Protease Virus Etch Tembakau Rekombinan (Cat#20403ES) PNGase F, N-Glikosidase F (100000 U/mL) (Kat#20407ES) Tripsin Rekombinan (MS-SAFE) Tripsin Rekombinan (Tingkat Spektrometri Massa) (Kat#20416ES) |
| Bahan Habis Pakai Kromatografi | Kolom Kosong Aliran Gravitasi ketik Kolom Kosong Kolom YXK Kantong Dialisis | Kolom Kosong Kromatografi Gravitasi 12 mL (Cat#20523ES) Kolom Kosong Tipe C 5 mL (terhubung ke Akata, jarum suntik atau pompa peristaltik) (Cat#20526ES) Kolom Kosong Kromatografi YXK16/70 (Cat#20443ES) Kantong dialisis 27mm (MWCO 50 kDa) (Cat#20534ES) |
Kesimpulan: Sesuaikan Alur Kerja Anda dengan Kebutuhan Anda
Mengoptimalkan alur kerja pemurnian protein Anda sangat penting untuk memperoleh protein dengan kemurnian tinggi dan hasil tinggi untuk penelitian atau aplikasi Anda. Dengan memahami prinsip pemurnian dan memilih alat yang tepat, Anda dapat menyederhanakan proses dan menghindari kesalahan umum.
Untuk mempelajari lebih lanjut tentang bagaimana produk kami dapat meningkatkan proses pemurnian protein Anda, kunjungi halaman produk kami atau hubungi tim kami untuk rekomendasi yang dipersonalisasi.
Untuk informasi lebih lanjut atau untuk pembelian, kunjungi resmi kamiBlokasi.