Dalam bidang penelitian biomedis, pemurnian protein merupakan teknologi kunci untuk mengeksplorasi misteri kehidupan. Namun, metode pemurnian tradisional menghadapi masalah inefisiensi dan biaya tinggi—terutama untuk protein membran, yang menjadi fokus penelitian biologi struktural. Protein ini secara struktural kompleks, memiliki tingkat ekspresi rendah dalam membran sel, dan sensitif terhadap kondisi lingkungan, sehingga pemurniannya menjadi sangat sulit. Sekarang, Yeasen Biotech, dengan kemampuan R&D yang luar biasa, telah meluncurkan versi terbaru Gel Afinitas Anti-DYKDDDDK(Bendera) (Kat#20584ES), alat yang ampuh untuk pemurnian protein yang efisien dan nyaman, bahkan untuk protein membran yang menantang.

Kinerja Produk

1. Spesifisitas Tinggi dan Kapasitas Pengikatan Tinggi: Keuntungan Utama untuk Penangkapan Protein Target

Yeasen Gel Afinitas Anti-DYKDDDDK(Bendera) (Kat#20584ES) disiapkan dengan menggabungkan secara kovalen antibodi monoklonal IgG2b tikus berkualitas tinggi dengan gel agarosa 4% yang sangat berikatan silang. Proses pembuatan yang unik ini memberikan produk dengan spesifisitas yang sangat tinggi, memungkinkannya untuk mengenali dan mengikat protein fusi dengan tag Flag secara tepat. Apakah itu protein fusi Flag N-terminal yang dimodifikasi oleh Met (Protein Bendera Met), protein fusi Bendera N-terminal (Protein Bendera), atau protein fusi Bendera C-terminal (Bendera Protein), gel dapat mengatasinya dengan mudah.

Dalam pemurnian protein membran, spesifisitas ini sangat penting karena protein ini secara struktural kompleks dan rentan terhadap pengikatan non-spesifik dengan protein lain. Spesifisitas tinggi gel Flag secara efektif mengurangi gangguan dari protein non-spesifik, memastikan kemurnian tinggi protein membran yang dimurnikan. Selain itu, gel memiliki kapasitas pengikatan yang tinggi untuk protein fusi berlabel Flag (setidaknya 1,1 mg protein/ml gel). Ini berarti bahwa meskipun protein target diekspresikan pada tingkat rendah, protein tersebut masih dapat ditangkap dan dimurnikan secara efisien menggunakan gel Flag.

2. Kemurnian Tinggi dan Hasil Tinggi: Memungkinkan Aplikasi Hilir

Yeasen Gel Afinitas Anti-DYKDDDDK(Bendera) (Kat#20584ES) memiliki ikatan non-spesifik yang minimal terhadap pengotor, sehingga menghasilkan sampel protein yang sangat murni setelah pemurnian. Hal ini penting untuk aplikasi hilir seperti uji bioaktivitas dan analisis struktural. Sampel protein dengan kemurnian tinggi memberikan data eksperimen yang lebih akurat, yang menjadi dasar yang kuat bagi penelitian para peneliti.

3. Alur Kerja Eksperimen yang Dioptimalkan: Menyederhanakan Tantangan Pemurnian Protein

Pemurnian protein perlu dilakukan dalam kondisi ringan untuk menghindari kerusakan struktural pada protein, terutama untuk protein membran kompleks. Yeasen Gel Afinitas Anti-DYKDDDDK(Bendera) (Kat#20584ES) dirancang dengan mempertimbangkan hal ini. Buffer penyimpanannya adalah TBS mengandung gliserol 50% pada pH 7.4, yang tidak hanya melindungi aktivitas gel tetapi juga menyediakan lingkungan yang lembut untuk pemurnian protein.

Proses pemurnian dengan gel Flag sederhana dan efisien. Untuk memudahkan penggunaan elusi peptida 1×Flag, paket produk menyertakan peptida 1×Flag (Cat#20572ES) sebagai pelengkap. Hal ini membuat proses elusi menjadi lembut (hampir tanpa kerusakan pada protein) dan sangat praktis (semakin meningkatkan kemudahan eksperimen).

4. Berbagai Ukuran dan Opsi Pengiriman Fleksibel: Memenuhi Berbagai Kebutuhan Eksperimen

Mengingat skala dan kebutuhan laboratorium yang berbeda-beda, Yeasen menawarkan gel Bendera dalam berbagai ukuran, termasuk 1 mL, 5 mL, 25 mL, dan 100 mL. Baik untuk eksplorasi awal skala kecil maupun produksi protein skala besar, tersedia opsi yang sesuai. Untuk pembelian tahunan dalam jumlah besar, pelanggan dapat memilih untuk menerima pengiriman secara berkelompok, yang memungkinkan mereka menikmati diskon harga sekaligus menghindari tekanan persediaan yang berlebihan.

Data Uji

Figure 1.   Yeasen Anti-DYKDDDDK(Flag) Affinity Gel purification results for low-expressing proteins (Flag-N (a), Flag-M (b), Flag-C (c)) shown in SDS-PAGE.

M: Penanda Protein

1: Sampel kasar pra-kolom protein Flag-N/ Flag-M/ Flag-C

2: Aliran pasca-kolom protein Flag-N/ Flag-M/ Flag-C

3: Elusi (elusi pH 2,7)

4: Elusi (elusi pH 12)

5: Elusi (1Bahasa Indonesia:(elusi peptida bendera)

6: Gel murni (elusi pH 2,7)

7: Gel murni (elusi pH 12)

8: Gel yang dimurnikan (1Bahasa Indonesia:(elusi peptida bendera)

A: Bahasa Indonesia:Bendera-N   B: Bahasa Indonesia:Bendera-M   C: Bahasa Indonesia:Bendera-C

Gambar 1.   Yeasen Gel Afinitas Anti-DYKDDDDK(Bendera) hasil pemurnian untuk protein dengan ekspresi rendah (Flag-N (a), Flag-M (b), Flag-C (c)) ditunjukkan dalam SDS-PAGE.

  Figure 2.  Comparison of Yeasen (a) withBrand S* (b) and Brand G* (c) Anti-Flag gels in purifying low-expressing proteins (e.g., membrane proteins) shown in SDS-PAGE.

M: Penanda Protein

1: Sampel kasar pra-kolom protein Flag-C

2: Aliran protein Flag-C pasca-kolom

3: Elusi (elusi pH 2,7)

4: Elusi (elusi pH 12)

5: Elusi (1Bahasa Indonesia:(elusi peptida bendera)

6: Gel yang dimurnikan (pH 2.7 elusi)

7: Gel murni (elusi pH 12)

8: Gel yang dimurnikan (1Bahasa Indonesia:(elusi peptida bendera)

A: Bahasa Indonesia:Yeasen B: Bahasa Indonesia:Merek S*   C: Bahasa Indonesia:Merek G*

Angka 2. Perbandingan Yeasen (a) denganBrand S* (b) dan Brand G* (c) Gel Anti-Flag dalam memurnikan protein dengan ekspresi rendah (misalnya, protein membran) yang ditunjukkan dalam SDS-PAGE.

Kesimpulan:

1. Yeasen Gel Afinitas Anti-DYKDDDDK(Bendera) (Kat#20584ES) memiliki spesifisitas tinggi dan dapat mengikat tag Flag di berbagai posisi (protein fusi Flag N-terminal, protein fusi Flag N-terminal yang dimodifikasi Met, protein fusi Flag C-terminal).

2. Dalam kondisi ekspresi protein target yang sangat rendah (misalnya, protein membran), Yeasen Gel Afinitas Anti-DYKDDDDK(Bendera) (Cat#20584ES) menghasilkan hasil dan kemurnian yang jauh lebih tinggi dibandingkan dengan pesaing. Penggunaan Yeasen Peptida 1×Flag gratis (Cat#20572ES) untuk elusi memberikan hasil yang lebih baik.

Solusi Lengkap untuk Protein Fusi Berlabel Bendera:

Enterokinase Rekombinan (Cat#20395ES): Protease spesifik yang membelah ujung karboksil lisin yang didahului oleh empat asam aspartat: Asp-Asp-Asp-Asp-Lys. Urutan ini merupakan bagian dari penanda Flag oktapeptida (DYKDDDDK). Enterokinase rekombinan (rEK) dapat dengan mudah menghilangkan penanda Flag dari protein fusi, menjadikannya alat yang ideal untuk mempelajari struktur dan fungsi protein asli.

Anti-DYKDDDDK (Bendera) MagBeads (Kat#20565ES):Mikrosfer magnetik polimer yang disiapkan dengan menggabungkan secara kovalen antibodi monoklonal anti-DYKDDDDK (Flag) tikus berkualitas tinggi dengan manik-manik magnetik berbasis silika (diameter dari 200 nm). Manik-manik ini cocok untuk imunopresipitasi (IP) atau ko-imunopresipitasi (Co-IP) protein dengan tag Flag.

Informasi Produk

Nama Produk

Nomor Produk

Spesifikasi

Gel Afinitas Anti-DYKDDDDK(Bendera)

20584Bahasa Inggristanggal 03/Tanggal 25/08

1 ml/5 ml/25ml

Enterokinase Bovin Rekombinan, His, Diekspresikan dalam Ragi

20395ES60/76/90

100 kamu/500 U/5000 U

Anti-DYKDDDDK (Bendera) MagBeads

Nomor telepon 20565ES03/08

1 ml/5 ml

Pertanyaan