Keterangan
Kit ini dapat secara langsung dan cepat melakukan amplifikasi PCR jaringan tikus (seperti ekor tikus, telinga tikus, jari kaki tikus, otot, dll.), dan memiliki kompatibilitas sampel yang kuat. Dilengkapi dengan buffer lisis yang kuat, kit ini dapat dengan cepat melisiskan sampel dan melepaskan DNA genomik. Lisat dapat langsung ditambahkan ke sistem reaksi PCR tanpa pemurnian, dan pengoperasiannya mudah. Selain itu, kit ini memerlukan input sampel yang rendah, dan jaringan tikus 5 mg atau ekor tikus 1-5 mm dapat digunakan untuk eksperimen.
Campuran PCR Langsung Tikus 2x yang disediakan oleh kit ini adalah larutan reaksi PCR dengan awalan panas dengan konsentrasi 2 kali lipat. Campuran ini mengandung semua komponen yang digunakan untuk amplifikasi PCR kecuali templat dan primer, yang sangat menyederhanakan proses operasi dan mengurangi kemungkinan kontaminasi. Kit ini dapat digunakan untuk identifikasi transgen, penentuan genotipe tikus, dll.
Fitur
- Sampel yang dibutuhkan lebih sedikit: 5 mg jaringan tikus atau 1-5 mm ekor tikus
- Persiapan templat yang nyaman: tidak perlu menggiling, tidak perlu memperbaiki dan memurnikan DNA, fluks lebih tinggi, menghemat waktu dan uang
- Sistem PCR yang dioptimalkan: dengan spesifisitas yang lebih tinggi dan toleransi yang lebih kuat terhadap penghambat reaksi PCR
Aplikasi
- Identifikasi tikus transgenik
- Genotipe tikus
- Analisis penghapusan gen tikus
Spesifikasi
| Spesifikasi produk | Peralatan |
| Mulai panas | Hot Start Terpadu |
| Kondisi transportasi | Paket Es |
| Tipe produk | Kit PCR Langsung |
| Menerapkan ke (aplikasi) | Ekor tikus, Telinga tikus, Jari kaki tikus, Jeroan, Kulit, dll. |
Komponen
| Komponen No. | Nama | nomor seri 10185ES50 | Nomor telepon 10185ES70 |
| 10185-A | Penyangga Bahasa Inggris | 5×1ml | 20×1ml |
| 10185-B | Penyangga MT | 0,6 ml | 2×1,25ml |
| 10185-C | 2× Campuran PCR Langsung Tikus | 500 μL | 2×1ml |
- a) Buffer ML adalah buffer lisis yang mengandung denaturan protein yang kuat, harap kenakan sarung tangan.
- b) Buffer MT merupakan buffer penghenti yang digunakan untuk menghentikan fungsi lisis Buffer ML.
- c) 2× Mouse Direct PCR Mix: Mengandung hot-start Taq DNA polymerase, campuran dNTP, MgCl2, buffer reaksi, penambah reaksi PCR, pengoptimal, penstabil, pewarna indikator elektroforesis, dll.
Penyimpanan
- Komponen A: Produk harus dapat disimpan pada suhu 2°C~8°C selama satu tahun. Untuk penggunaan berulang dalam jangka waktu lama, harap hindari kontaminasi silang.
- Komponen B/C: Produk harus disimpan di-25℃ ~ -15℃ selama satu tahun. Hindari pembekuan dan pencairan berulang.
Angka
1. Hasil amplifikasi gen target (dalam 1 kb)
Gambar 1.Cocok untuk amplifikasi gen target dalam 1 kb.
2. Demonstrasi kecepatan ekstensi
Gambar 2. Gen 500bp, kecepatan ekstensi bisa secepat 1 detik/kb.
Dikutip dari "TFPI adalah reseptor kripta kolon untuk TcdB dari klade 2 C. difficile yang sangat virulen. Sel . 2022 Mar 17;185(6):980-994.e15. doi: 10.1016/j.cell.2022.02.010."
[1] Luo J, Yang Q, Zhang X, et al. TFPI adalah reseptor kripta kolon untuk TcdB dari klade hipervirulen 2 C. sulit. Sel. 2022;185(6):980-994.e15. doi:10.1016/j.cell.2022.02.010(IF:41.584)
[2] Zhao J, Chen J, Li YY, Xia LL, Wu YG. Kinase tirosin Bruton mengatur peradangan yang disebabkan makrofag pada ginjal penderita diabetes melalui aktivasi inflammasome NLRP3. Int J Mol Med. 2021;48(3):177. doi:10.3892/ijmm.2021.5010(IF:4.101)
| Masalah umum | Kemungkinan alasan | Larutan |
| Tidak ada pita pada kontrol positif dan sampel yang akan diuji. | Sistem reaksi PCR atau kondisi reaksi tidak sesuai. | Gunakan PCR gradien untuk mengeksplorasi kondisi reaksi optimal untuk PCR. |
| Penyimpanan reagen PCR yang tidak tepat akan kehilangan aktivitas. | 2× Mouse Direct PCR Mix harus disimpan pada suhu -20°C dan hindari pembekuan dan pencairan berulang kali selama penggunaan. Jika sering digunakan, dapat disimpan pada suhu 4°C untuk waktu yang singkat. | |
| Masalah desain primer. | Cobalah mendesain ulang primer untuk memeriksanya. | |
| Kontrol positif memiliki pita yang diinginkan, dan sampel yang akan diuji tidak memiliki pita atau pita lemah. | Penyimpanan yang tidak tepat atau penyimpanan yang terlalu lama dapat menyebabkan hilangnya aktivitas reagen. | Gunakan reagen baru. |
| Tambahkan lisat jaringan secara berlebihan. | Tingkatkan sistem reaksi, atau kurangi jumlah lisat. | |
| Campuran lisis sampel telah disimpan secara tidak benar atau disimpan terlalu lama, dan genom DNA telah terdegradasi. | Campuran lisat dapat disimpan pada suhu 4°C selama 2-3 hari.Cobalah menggunakan campuran lisat yang baru disiapkan untuk PCR. | |
| Jumlah templat yang ditambahkan tidak sesuai. | Jumlah templat yang ditambahkan dioptimalkan dalam kisaran 1-10% dari sistem reaksi. | |
| Jumlah siklus PCR tidak mencukupi. | Tingkatkan jumlah siklus PCR, sebaiknya 35-40 siklus. Karena rumitnya pola, reaksi PCR harus dilakukan dengan 5-10 siklus lebih banyak daripada dengan pola DNA murni. | |
| Amplifikasi nonspesifik | Suhu annealing PCR terlalu rendah, nomor siklus, konsentrasi primer, atau konsentrasi templat terlalu tinggi. | Tingkatkan suhu annealing PCR dan kurangi nomor siklus PCR, konsentrasi primer atau konsentrasi templat. |
| Ketidakcocokan primer PCR. | Mendesain ulang primer PCR. | |
| Suhu terlalu tinggi saat menyiapkan sistem reaksi PCR atau waktunya terlalu lama setelah persiapan selesai. | Persiapan sistem reaksi PCR dilakukan pada suhu rendah, dan reaksi amplifikasi PCR dilakukan sesegera mungkin setelah persiapan selesai. | |
| Pita target muncul pada kontrol negatif | Kontaminasi alat operasi atau reagen. | Semua reagen atau peralatan dalam percobaan harus diautoklaf. Berhati-hatilah dan berhati-hati saat menanganinya untuk mencegah sekuens target terhisap ke dalam pistol sampel atau tumpah keluar dari tabung sentrifus. |
| Kontaminasi silang antar sampel. | Setiap pengambil sampel hanya digunakan untuk satu sampel; atau setelah mengambil satu sampel, rendam tepi pengambil sampel dalam larutan natrium hipoklorit 2%, bilas berulang kali, lalu keringkan residu dengan handuk kertas bersih. |
Pembayaran & Keamanan
Informasi pembayaran Anda diproses dengan aman. Kami tidak menyimpan detail kartu kredit atau memiliki akses ke informasi kartu kredit Anda.
Pertanyaan
Anda mungkin juga menyukai
FAQ
Produk ini hanya untuk keperluan penelitian dan tidak ditujukan untuk penggunaan terapeutik atau diagnostik pada manusia atau hewan. Produk dan konten dilindungi oleh paten, merek dagang, dan hak cipta milik
Aplikasi tertentu mungkin memerlukan hak kekayaan intelektual pihak ketiga tambahan.