Keterangan
Kit PCR langsung jaringan tanaman adalah kit yang dapat secara langsung memperbanyak berbagai jenis daun tanaman melalui PCR, dengan kemampuan adaptasi yang luas dan stabilitas yang kuat. Kit ini menggunakan sistem penyangga lisis yang unik, yang dapat dengan cepat melisiskan berbagai sampel tanaman dan melepaskan DNA genom. DNA genom yang dilepaskan dapat digunakan secara langsung sebagai templat tanpa menghilangkan protein, RNA, atau metabolit sekunder dalam reaksi PCR. Selain itu, kit ini memerlukan sejumlah kecil sampel, daun tanaman sekecil 1 mm dapat digunakan untuk eksperimen.
2×Plant Master Mix yang disediakan dalam kit ini memiliki kompatibilitas amplifikasi yang kuat dan dapat langsung menggunakan lisat sampel sebagai templat untuk amplifikasi yang efisien dan spesifik. Reagen ini adalah campuran reaksi PCR terkonsentrasi 2 kali lipat, yang mengandung semua komponen yang digunakan untuk amplifikasi PCR kecuali templat dan primer, yang sangat menyederhanakan proses operasi dan mengurangi kemungkinan kontaminasi.
Kit ini dapat digunakan untuk identifikasi tanaman transgenik, genotipe tanaman, dan lain-lain.
Pengiriman
Produk dikirim dengan bungkusan es.
Penyimpanan
1. Reagen 10187-A [Buffer P1] dapat disimpan pada suhu 4℃ selama 1 tahun.
2. Reagen 10187-B [Buffer P2], digunakan untuk menetralkan lisat, yang bermanfaat untuk menyimpan sampel dalam waktu lebih lama, dan dapat disimpan pada suhu 4℃ selama 1 tahun.
3. Reagen 10187-C [2× Plant Master Mix] dapat disimpan pada suhu -20℃ selama 1 tahun. Hindari pembekuan dan pencairan berulang kali.
Perhatian
1. Saat melakukan percobaan daun, disarankan untuk menggunakan jaringan daun yang baru dikumpulkan. Jika jaringan tersebut dibekukan dalam jangka panjang, jaringan tersebut perlu disimpan pada suhu -80°C. Pembekuan dan pencairan berulang harus dihindari sebisa mungkin untuk menghindari degradasi templat dan memengaruhi efisiensi PCR. Jaringan daun cocok untuk daun muda. Jika merupakan daun dewasa, hindari penggunaan jaringan urat daun utama.
2. Disarankan untuk mengamplifikasi fragmen dengan panjang 1 kb demi efisiensi amplifikasi terbaik.
3. Saat mengambil sampel, gunakan pelubang kertas atau pisau untuk mengambil sampel dengan ukuran yang sesuai. Jika sampelnya berbeda, pelubang kertas atau pisau harus dibersihkan setiap kali sebelum memproses sampel.
4. Untuk jaringan daun, disarankan untuk mengambil daun berukuran 1-10 mm, panjang daun yang terlalu kecil akan menyebabkan hasil amplifikasi PCR yang rendah, jika terlalu banyak akan menghambat reaksi PCR, gunakan metode thermal cracking, penumbukkan dengan ujung pipet, dan penghancuran dengan penggiling untuk mengolah daun tanaman. Setelah pengolahan, perlu dikocok dan disentrifugasi. Pastikan untuk mengambil supernatan untuk pengujian. Presipitasi akan sangat menghambat reaksi PCR.
5. Demi keselamatan dan kesehatan Anda, harap kenakan jas lab dan sarung tangan sekali pakai saat bekerja.
6. Produk ini HANYA untuk keperluan penelitian!
| Masalah Umum | Kemungkinan penyebab | Solusi |
| Tidak ada pita pada kontrol positif dan sampel yang akan diuji. | Sistem reaksi PCR atau kondisi reaksi tidak sesuai. | Gunakan PCR gradien untuk mengeksplorasi kondisi reaksi optimal untuk PCR. |
| Penyimpanan reagen PCR yang tidak tepat akan menonaktifkannya. | Campuran 2×PCR harus disimpan pada suhu -20℃, hindari pembekuan dan pencairan berulang kali saat digunakan. Jika sering digunakan, campuran dapat disimpan pada suhu 4°C untuk waktu yang singkat. | |
| Masalah desain primer. | Cobalah mendesain ulang primer untuk memeriksanya. | |
| Kontrol positif memiliki pita yang diinginkan, dan sampel yang akan diuji tidak memiliki pita atau pita lemah. | Rasio buffer lisis dan buffer netralisasi tidak tepat, dan campuran lisis akan memengaruhi nilai pH sistem PCR. | Dalam kondisi normal, pH campuran lisis yang dinetralkan harus sekitar 7-8 (produk lisis dan Buffer P2 harus dinetralkan sesuai dengan rasio 5:1). |
| Campuran lisis sampel telah disimpan secara tidak benar atau terlalu lama, dan genom DNA telah terdegradasi. | Campuran lisat dapat disimpan pada suhu 4°C selama 5 hari, cobalah menggunakan campuran lisat yang baru disiapkan untuk PCR. | |
| Jumlah templat yang ditambahkan tidak sesuai. | Optimalkan jumlah templat yang ditambahkan dalam kisaran <5% dari sistem reaksi. | |
| Jumlah siklus PCR tidak mencukupi. | Tingkatkan jumlah siklus PCR secara tepat, sebaiknya 35-40 siklus. Karena rumitnya pola, secara umum lebih baik menggunakan 5-10 siklus reaksi PCR lebih banyak daripada menggunakan pola DNA murni. | |
| Amplifikasi nonspesifik | Suhu annealing PCR terlalu rendah, nomor siklus, konsentrasi primer, atau konsentrasi templat terlalu tinggi. | Tingkatkan suhu annealing PCR dan kurangi nomor siklus PCR, konsentrasi primer, atau konsentrasi templat. |
| Ketidakcocokan primer PCR. | Mendesain ulang primer PCR. | |
| Suhu terlalu tinggi saat menyiapkan sistem reaksi PCR atau waktu yang ditetapkan terlalu lama setelah persiapan. | Persiapan sistem reaksi PCR dilakukan pada suhu rendah, dan reaksi amplifikasi PCR dilakukan sesegera mungkin setelah persiapan selesai. | |
| Pita target muncul pada kontrol negatif | Kontaminasi alat operasi atau reagen. | Semua reagen atau peralatan dalam percobaan harus diautoklaf.Berhati-hatilah dan lembut saat menangani untuk mencegah urutan target terhisap ke dalam pistol sampel atau tumpah keluar dari tabung sentrifus. |
| Kontaminasi silang antar sampel. | Setiap pengambil sampel hanya digunakan untuk satu sampel; atau setelah mengambil satu sampel, rendam bilah pengambil sampel dalam larutan natrium hipoklorit 2%, bilas berulang kali, lalu keringkan residu dengan handuk kertas bersih. |
Pembayaran & Keamanan
Informasi pembayaran Anda diproses dengan aman. Kami tidak menyimpan detail kartu kredit atau memiliki akses ke informasi kartu kredit Anda.
Pertanyaan
Anda mungkin juga menyukai
FAQ
Produk ini hanya untuk keperluan penelitian dan tidak ditujukan untuk penggunaan terapeutik atau diagnostik pada manusia atau hewan. Produk dan konten dilindungi oleh paten, merek dagang, dan hak cipta milik
Aplikasi tertentu mungkin memerlukan hak kekayaan intelektual pihak ketiga tambahan.