Keterangan
Hieff® Blood Advanced Direct PCR Kit adalah kit yang dapat langsung mengamplifikasi sampel darah utuh tanpa pemurnian DNA atau praperlakuan sampel, dan kompatibel dengan darah segar, darah dingin (beku), dan noda darah kering komersial yang mengandung antikoagulan konvensional seperti EDTA, heparin, sitrat, dll. Kit ini mengandung kombinasi DNA polimerase yang direkayasa secara genetika dengan kesetiaan tinggi dan ketahanan terhadap inhibitor PCR, 2× Hieff® Blood Advanced PCR Buffer dengan faktor pemanjangan yang kuat, faktor peningkatan amplifikasi, dan sistem buffer yang dioptimalkan untuk secara efisien mengamplifikasi 8 kb fragmen genomik dalam kondisi ekstensi cepat, dan mengatur waktu ekstensi 3-5 detik/kb untuk fragmen di bawah 2 kb, sehingga secara signifikan mempersingkat waktu untuk identifikasi dan pengujian sampel darah.
Spesifikasi
| Kesetiaan (vs. Taq) | 1 lembar |
| Mulai Panas | Ya |
| menjorok | 3'-A |
| Polimerase | Taq DNA Polimerase (Kat: 10726) |
Komponen
| TIDAK. | Nama | Nomor telepon 10188ES20 | Nomor 10188ES60 |
| 10188-A | 2× Tinggi® Penyangga PCR Darah Canggih | 500 akuSaya | 2,5 ml |
| 10188-B | Hieff® Campuran DNA Polimerase Fidelitas Tinggi Canggih | 20 akuSaya | 100 mikroliter |
| 10188-C | Campuran primer kontrol positif (masing-masing 10 μM) | 100 mikroliter | 200 mikroliter |
| 10188-D | 10× buffer pemuatan DNA | 1 ml air | 1 ml air |
Instruksi
Sistem reaksi PCR yang direkomendasikan.
| Komponen | Volume (μL) |
| ddH2HAI | sampai 50 μL |
| 2× Tinggi® Penyangga PCR Darah Canggih | 25 mikroliter |
| Primer Maju (10 μM) | 2 mikroliter |
| Primer Terbalik (10 μM) | 2 mikroliter |
| Hieff® Campuran DNA Polimerase Fidelitas Tinggi Canggih | 1 mikroliter |
| Sampel darah | X |
2. Konsentrasi akhir yang direkomendasikan adalah 0,4 μM per primer, jika terlalu tinggi akan menghasilkan amplifikasi yang tidak spesifik.
3. Konsentrasi optimal templat darah utuh berkisar antara 0,5% hingga 20%, dan penggunaan yang disarankan adalah 10% sebagai kondisi uji awal, yaitu, 5 μL darah utuh ditambahkan sebagai templat ke sistem reaksi 50 μL, dengan hati-hati agar tidak terjadi aspirasi gumpalan darah. Untuk noda darah kering yang disimpan pada kartu filter Whatman®, sekitar 1 mm2 potongan kertas bundar dengan noda darah dapat diambil dan diperbanyak langsung ke dalam reaksi PCR tanpa praperlakuan.
Program reaksi
| Siklus melangkah | Suhu. | Waktu | Siklus |
| Denaturasi awal | 95℃ | 5 menit | 1 |
| Denaturasi | 95℃ | 15 detik | 30-35 |
| Anil | 60℃ | 15 detik | |
| Perpanjangan | 72℃ | 3-10 detik/kb | |
| Terakhir perpanjangan | 72℃ | 5 menit | 1 |
Suhu annealing adalah nilai Tm generik atau 1-2°C di bawah nilai Tm primer. Jika produk amplifikasi kurang spesifik, gradien suhu annealing dapat ditetapkan untuk menemukan kondisi annealing yang optimal.
Waktu perpanjangan 10 detik/kb dapat mengamplifikasi sebagian besar fragmen target di bawah 8 kb, dan 3-5 detik/kb dapat mengamplifikasi sebagian besar fragmen di bawah 2 kb. Jika efisiensi amplifikasi rendah, waktu dapat diperpanjang hingga 20-30 detik/kb, dan tidak boleh melebihi 60 detik/kb.
Pengiriman dan Penyimpanan
Produk harus disimpan pada suhu -15℃ ~ -25℃ untuk 1 tahun
Angka
Catatan
1. Sebaiknya cetakan darah digunakan sebanyak 10% dari total volume reaksi, yaitu 5 μL darah utuh ditambahkan ke sistem reaksi 50 μL sebagai cetakan, dengan hati-hati agar tidak terjadi penghisapan bekuan darah.
2. Waktu perpanjangan 10 detik/kb dapat mengamplifikasi sebagian besar fragmen target di bawah 8 KB, dan 3-5 detik/kb dapat mengamplifikasi sebagian besar fragmen di bawah 2 KB. Jika efisiensi amplifikasi rendah, waktu dapat diperpanjang hingga 30 detik/kb.
3. Setelah reaksi PCR, disarankan untuk mensentrifus produk reaksi pada 4000 rpm (1000× g) selama 1-3 menit untuk mengendapkan fragmen sel darah, dan mengambil supernatan untuk analisis hilir.
4. Produk ini tidak dapat langsung digunakan untuk diagnosis medis.
5. Demi keselamatan dan kesehatan Anda, harap kenakan jas lab dan kenakan sarung tangan sekali pakai.
Pembayaran & Keamanan
Informasi pembayaran Anda diproses dengan aman. Kami tidak menyimpan detail kartu kredit atau memiliki akses ke informasi kartu kredit Anda.
Pertanyaan
Anda mungkin juga menyukai
FAQ
Produk ini hanya untuk keperluan penelitian dan tidak ditujukan untuk penggunaan terapeutik atau diagnostik pada manusia atau hewan. Produk dan konten dilindungi oleh paten, merek dagang, dan hak cipta milik
Aplikasi tertentu mungkin memerlukan hak kekayaan intelektual pihak ketiga tambahan.