MikroRNA, kelas RNA non-coding dengan panjang sekitar 22 nt, banyak diperhatikan dan memainkan peran yang sangat penting dalam mengatur ekspresi gen pada tumbuhan dan hewan. Kit ini menggunakan metode fluoresensi chimeric SYBR Green I untuk deteksi kuantitatif fluoresensi miRNA. 2×Hieff™ miRNA Universal qPCR Master Mix adalah generasi baru reagen deteksi PCR kuantitatif fluoresensi premix yang dikembangkan khusus untuk deteksi kuantitatif miRNA. Ini berisi Pewarna Referensi Pasif ROX khusus. Cocok untuk sebagian besar instrumen qPCR, tidak perlu menyesuaikan konsentrasi ROX pada instrumen yang berbeda, cukup tambahkan primer dan template dalam persiapan sistem reaksi dapat diperkuat. DNA Polimerase menggunakan Polimerase yang diaktifkan panas yang dimodifikasi secara kimia, dikombinasikan dengan sistem Buffer khusus, untuk membuat reaksi lebih spesifik, lebih sensitif, dan dapat diukur secara akurat dalam rentang yang lebih luas.
Produk ini direkomendasikan untuk digunakan dengan Hifair™ miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (Tailing) (Cat# 11148) untuk mendapatkan hasil eksperimen yang optimal.

Fitur

• Seluruh platform: Tidak perlu mengubah konsentrasi ROX menggunakan warna yang telah dicampur sebelumnya
• Tingkat deteksi sensitivitas tinggi: 10 pg DNA dapat dideteksi
• Kinerja amplifikasi yang baik: Efisiensi amplifikasi yang sangat baik
• Spesifisitas tinggi: Mampu membedakan perbedaan basa tunggal antara miRNA dalam keluarga yang sama

Aplikasi

• Ekspresi Gen

Spesifikasi

Komponen

Penyimpanan

Produk harus disimpan pada suhu -25℃ ~ -15℃ selama 1 tahun.

Angka

Gambar 1. Kinerja amplifikasi yang baik: efisiensi amplifikasi yang sangat baik.

Gen miR-let-7b-5p, miR-let-7c-5p, miR-let-7e-5p, dan miR-let-7f-5p diperkuat menggunakan sel 293T manusia dan Total RNA hati tikus sebagai templat.Hasilnya menunjukkan bahwa jika dibandingkan dengan produk sejenis, Hifair™ miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (Cat# 11148ES) memiliki kinerja yang sama dengan sistem reaksi Hieff™ miRNA Universal qPCR SYBR Master Mix (Cat# 11171ES).

Gambar 2. Spesifisitas tinggi: mampu membedakan perbedaan basa tunggal antara miRNA dalam keluarga yang sama.

Keluarga hsa-let-7 manusia memiliki beberapa miRNA, dengan beberapa basa yang berbeda satu sama lain, atau bahkan hanya satu perbedaan basa. Amplifikasi miRNA ini dengan primer yang berbeda dan gunakan Rumus 2- Δ CT x 100% tingkat kecocokan yang dihitung. Hasil penelitian menunjukkan bahwa anggota keluarga subtipe yang berkerabat dekat dapat dibedakan secara efektif.