Hifair^™ Advanced One Step RT-qPCR Kit merupakan kit untuk kuantifikasi fluoresensi berdasarkan pewarna SYBR Green I. Dengan menggunakan primer spesifik gen, reaksi transkripsi balik dan qPCR diselesaikan dalam satu tabung, sehingga menghilangkan kebutuhan untuk operasi pembukaan tutup dan pemipetan berulang, sehingga meningkatkan efisiensi pengujian dan mengurangi risiko kontaminasi. Untuk sampel RNA, kit ini menggunakan Hifair yang tahan panas.^™ V Reverse Transcriptase untuk sintesis cDNA yang efisien dan UNICON^™ HotStart Taq DNA Polymerase untuk amplifikasi kuantitatif. Di bawah sistem buffer yang dioptimalkan, sensitivitas kit dapat mencapai 0,1 pg untuk target yang diekspresikan secara tinggi dan mencapai 1 pg untuk target yang diekspresikan secara sedang, dan kit ini juga cocok untuk amplifikasi dan kuantifikasi sampel DNA. Kit ini cocok untuk amplifikasi dan kuantifikasi sampel DNA. Kit ini memungkinkan deteksi dan kuantifikasi asam nukleat yang sensitif dari berbagai sampel tanaman dan hewan, sel, dan mikroorganisme.

Spesifikasi

Komponen

Penyimpanan

Produk ini harus disimpan pada suhu -25~-15℃ jauh dari lampu untuk 1 tahun.

Instruksi

1. Reaksi sistem konfigurasi*****

* Model Low Rox dan model tanpa koreksi Rox disiapkan langsung sesuai dengan sistem reaksi di atas. Saat menggunakan model High Rox, tambahkan Hieff™ SP High Rox ke 2 x Hifair™ Advanced SG Buffer pada 1:250 v/v, aduk rata, lalu sentrifus. 2× Hifair^™ Buffer SG Lanjutan dengan Hieff™ SP High Rox tidak memengaruhi penggunaan model koreksi Low Rox dan No Rox.

** Konsentrasi primer akhir adalah 0,2 μmol/L, yang juga dapat disesuaikan antara 0,1 dan 1 μmol/L sebagaimana mestinya.

*** Reagen ini sangat sensitif, dengan Total RNA dalam kisaran 1 pg-1 μg, dan pengujian sampel manusia menunjukkan masukan optimal sebesar 1 pg-100 ng, dengan mengendalikan nilai Ct keseluruhan dalam kisaran 15-30 sebagaimana mestinya.

**** Disarankan untuk menggunakan 20 μL atau 50 μL untuk memastikan validitas dan reproduktifitas amplifikasi gen target.

***** Harap persiapkan di bangku yang sangat bersih dan gunakan ujung tabung reaksi dan tabung reaksi yang bebas residu nuklease; ujung tabung reaksi dengan kartrid filter direkomendasikan. Hindari kontaminasi silang dan kontaminasi aerosol.

2)Program reaksi

*Suhu transkripsi balik dapat dipilih antara 50-55°C sesuai dengan kebutuhan eksperimen. Untuk sampel DNA, proses transkripsi balik dapat diabaikan.

** Dalam kasus khusus, suhu annealing/ekstensi dapat disesuaikan menurut nilai Tm primer, suhu yang direkomendasikan adalah 60°C.

3）Model yang Berlaku

Model instrumen yang tidak memerlukan kalibrasi Rox:

Bio-Rad: CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;

Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;

Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;

Sains Terapan Roche: LightCycler 480, LightCycler2.0, Lightcycler 96;

Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR;

Model yang berlaku untuk Low Rox:

ABI 7500, 7500 Cepat, ViiA7, QuantStudio 3 dan 5, QuantStudio 6, 7, 12k Flex;

Stratagene MX3000P, MX3005P, MX4000P;

Model yang berlaku untuk High Rox*:

ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Cepat, StepOne, StepOne Plus.

* Untuk model High Rox, perlu diketahui bahwa Hieff™ SP High Rox harus ditambahkan secara proporsional dengan 2 x Hifair^™ Buffer SG Lanjutan sebelum digunakan.

Catatan

1. Produk ini hanya untuk keperluan penelitian.
2. Harap bekerja dengan jas lab dan sarung tangan sekali pakai, demi keselamatan Anda.

Dokumen:

Lembar Data Keselamatan

11175ES-A-MSDS-HB230927.PDF

11175ES-B-MSDS-HB230927.PDF

11175ES-C-MSDS-HB230927Bahasa Indonesia: .PDF

Buku Panduan