Keterangan
Bahasa Indonesia: Hieff™ Versatility T4 DNA Ligase merupakan varian dari T4 DNA Ligase. Enzim ini cocok untuk mengkatalisis reaksi ligasi antara molekul kohesif atau berujung tumpul. Produk enzim tunggal ini dirancang untuk menghubungkan fragmen DNA dan adaptor selama proses persiapan pustaka dalam sequencing generasi berikutnya (NGS). Hieff® Versatility T4 DNA Ligase telah divalidasi secara luas melalui pengurutan berthroughput tinggi dan menunjukkan kualitas yang luar biasa.
Fitur
- Kesetiaan tinggi
- Toleran terhadap panas
Pelajari lebih lanjut tentang pengembangan ligase DNA T4 yang serbaguna
Spesifikasi
| Sumber | E.coli rekombinan |
| Penyangga Penyimpanan | 50 Bahasa Inggris Tris HC1,100 KC1,0,1 mM mM EDTA, 1 mM DTT, 50% Gliserol, pH 7,5lebih0,2 pada 25℃ |
| Definisi Satuan | Dalam sistem reaksi ligasi 20 μL, jumlah enzim yang diperlukan untuk mengkatalisis ligasi lebih dari 50% fragmen DNA, ketika 6 μg λDNA-Hind III direaksikan pada suhu 16°C selama 30 menit, didefinisikan sebagai 1 unit aktivitas (U). |
Komponen
| Komponen | Nama | nomor 12996ES60 60KU | 12996ES62 600 KU |
| 12996-A | Bahasa Indonesia: Hieff® Ligase DNA T4 Serbaguna (600 U/µL) | 100 mikroliter | 1000 mikroliter |
| 12996-B | Penyangga Ligase DNA 10×T4 | 500 mikroliter | 3×1500 mikroliter |
Penyimpanan
Produk ini harus disimpan pada suhu -25~-15℃ selama 2 bertahun-tahun.
Angka
Silakan tinggalkan pesan untuk menanyakan tentang data perbandingan kinerja antara enzim ini dan ligase DNA T4 konvensional dan termostabil tingkat atas lainnya.
Catatan
1. Harap bekerja dengan jas lab dan sarung tangan sekali pakai.，demi keselamatan Anda.
2. Jika terjadi sedikit endapan di dalam buffer, itu adalah fenomena normal. Harap balikkan dan campur buffer secara menyeluruh sebelum menggunakannya.
3. Produk ini hanya untuk keperluan penelitian.
Protokol
1. Kit persiapan pustaka DNA arus utama saat ini yang menggunakan metode berbasis ligasi biasanya tidak memerlukan langkah pemurnian setelah perbaikan ujung dan A-tailing. Fragmen DNA secara langsung mengalami ligasi adaptor tanpa pemurnian. Kit ini kompatibel dengan arus utama sistem perbaikan ujung dan A-tailing yang tersedia secara komersial untuk ligasi adaptor yang mulus.
Atur reaksi berikut dalam tabung mikrosentrifus di atas es, campurkan perlahan dengan pipet atau pengocokan, Sentrifus sebentar dan panaskan secara nonaktif pada suhu 20°C selama 15 menit.
Tabel 1. Sistem Reaksi untuk Ligasi Adaptor
| Komponen | Volume(μL) | Konsentrasi akhir |
| DNA berekor dA | 60 | Ukuran 1× |
| Penyangga Ligase DNA 10×T4 | 10 | 0.1 μM-0.5 μM |
| 50% PEG6000 | 12* | 1 berat -400 kg |
| Adaptor DNA | 5** |
|
| 3~5*** |
| |
| Air bebas nuklease | ke atas sampai 100 | - |
【Catatan】*Solusi PEG6000 50% tidak disediakan dalam kit, Anda harus menyiapkannya sendiri
**Silakan lihat Tabel 2 Untuk jumlah adaptor.
***Jumlah T4 DNA Ligase dapat ditambahkan sesuai kebutuhan sebanyak 3-5 μL.
2. Konsentrasi adaptor secara langsung mempengaruhi efisiensi ligasi dan hasil pustaka. Penggunaan adaptor yang berlebihan dapat mengakibatkan di dalam lebih banyak dimer adaptor, sementara penggunaan yang rendah dapat memengaruhi efisiensi koneksi dan produksi perpustakaan. Tabel 2 mencantumkan jumlah adaptor yang direkomendasikan untuk berbagai jumlah DNA masukan.
Tabel 2. Jumlah adaptor yang direkomendasikan untuk 100 pg-1 μg DNA Input
| Masukan DNA | Konsentrasi |
| 0.1 Bahasa Inggris | |
| 1 malam | 0,5 mikron |
| 10 hari | 1 mikron |
| 25 hari | 2 mikron |
| 100 ng~1000 ng | 10 mikron |
【Catatan】:Jumlah adaptor dapat disesuaikan menurut persyaratan pada tabel di atas.
Pembayaran & Keamanan
Informasi pembayaran Anda diproses dengan aman. Kami tidak menyimpan detail kartu kredit atau memiliki akses ke informasi kartu kredit Anda.
Pertanyaan
Anda mungkin juga menyukai
FAQ
Produk ini hanya untuk keperluan penelitian dan tidak ditujukan untuk penggunaan terapeutik atau diagnostik pada manusia atau hewan. Produk dan konten dilindungi oleh paten, merek dagang, dan hak cipta milik
Aplikasi tertentu mungkin memerlukan hak kekayaan intelektual pihak ketiga tambahan.