Keterangan
DNA Polimerase Tth adalah DNA polimerase tahan panas yang ditemukan dari bakteri termofilik Thermus thermophilus HB8. Dengan adanya Mg²⁺, enzim ini menunjukkan aktivitas DNA polimerase 5′-3′ dan aktivitas eksonuklease 5′-3′, tetapi tidak memiliki aktivitas eksonuklease 3′-5′, sehingga dapat digunakan secara luas untuk reaksi amplifikasi PCR. Dengan adanya Mn²⁺, enzim ini menunjukkan aktivitas reverse transcriptase yang kuat pada suhu 55-70°C, sehingga cocok untuk reaksi RT-PCR satu langkah.
Spesifikasi
Definisi Satuan: Satu unit (U) aktivitas didefinisikan sebagai jumlah enzim yang menggabungkan 10 nmol nukleotida total ke dalam produk yang tidak larut dalam asam dalam 30 menit pada suhu 74°C, menggunakan DNA sperma salmon yang diaktifkan sebagai cetakan/primer.
Komponen
TIDAK. | Nama | Ukuran | |
14607ES72 (250 unit) | 14607ES80 (tahun 1250) kamu) | ||
14607-A | DNA Polimerase Tth (5 U/μL) | 50 μL | 250 μL |
14607-B | 5xTth RT-PCR Penyangga | 1 ml air | Ukuran 4×1,25 ml |
14607-C | PCR 10xT Penyangga (dengan Mg2+) | 500 μL | Ukuran 2×1,25 ml |
14607-D | 50mMg(OAc)2 | 250 μL | 1.25 ml |
14607-E | Campuran dNTP (masing-masing 10 mM) | 150 μL | 750 μL |
Pengiriman dan Penyimpanan
Pengirimandengan es kering. Simpan pada -20°C, dengan umur simpan 2 tahun.
Tindakan pencegahan
1) Jika sedikit endapan muncul dalam buffer setelah pencairan, ini adalah fenomena normal. Harap balikkan dan aduk hingga merata sebelum digunakan.
2) Demi keselamatan dan kesehatan Anda, kenakan jas lab dan sarung tangan sekali pakai selama bekerja.
3) Produk ini hanya untuk keperluan penelitian!
Instruksi
Prosedur Reaksi PCR yang Direkomendasikan:
1.Persiapan Sistem Reaksi
Nama | Volume (μL) |
PCR 10xT Penyangga (dengan Mg2+) | 5 |
DNA Polimerase Tth (5 U/μL) | 0.5 |
Campuran dNTP (masing-masing 10 mM) | 1 |
Hulu Bahasa Inggris: Primer 10 mikrometer | 2 |
Hilir Bahasa Inggris: Primer 10 mikrometer | 2 |
Templat DNA | 50 hal- 1 mikrogram |
ddH2HAI | ke 50 |
[Catatan]: Jumlah Tth DNA Polimerase, primer hulu dan hilir, dan Campuran dNTP dapat disesuaikan menurut kebutuhan eksperimen spesifik.
2. Pengaturan Siklus
Tangga | Suhu(ºC) | Waktu | Siklus |
Pra-denaturasi | 94 | 30 detik-5 menit | 1 |
Denaturasi | 94 | 30 detik |
35
|
Anil | 50-70 | 30 detik | |
Perpanjangan | 72 | 60 detik/kb | |
Perpanjangan Akhir | 72 | 10 menit | 1 |
[Catatan]: Kondisi reaksi dapat disesuaikan menurut persyaratan eksperimen tertentu.
Prosedur Reaksi RT-PCR yang Direkomendasikan:
1. Persiapan Sistem Reaksi
Nama | Volume (μL) |
5xTth RT-PCR Penyangga | 10 |
DNA Polimerase Tth (5 U/μL) | 1.5 |
50mMg(OAc)2 | 2.5 |
Campuran dNTP (masing-masing 10 mM) | 1.5 |
Hulu Bahasa Inggris: Primer 10 mikrometer | 2 |
Hilir Bahasa Inggris: Primer 10 mikrometer | 2 |
Templat RNA | 50 hal- 1 mikrogram |
air raksa | ke 50 |
[Catatan]: Jumlah Tth DNA Polimerase, primer hulu dan hilir, dan Campuran dNTP dapat disesuaikan menurut kebutuhan eksperimen spesifik.
2.Pengaturan Siklus
Tangga | Suhu (ºC) | Waktu | Siklus |
Transkripsi terbalik | 55-70 | 30 menit | 1 |
Pra-denaturasi | 94 | 30 detik-5 menit | 1 |
Denaturasi | 94 | 30 detik |
35
|
Anil | 50-70 | 30 detik | |
Perpanjangan | 72 | 60 detik/kb | |
Perpanjangan Akhir | 72 | 10 menit | 1 |
[Catatan]: Kondisi reaksi dapat disesuaikan menurut persyaratan eksperimen tertentu.
Pembayaran & Keamanan
Informasi pembayaran Anda diproses dengan aman. Kami tidak menyimpan detail kartu kredit atau memiliki akses ke informasi kartu kredit Anda.
Pertanyaan
Anda mungkin juga menyukai
FAQ
Produk ini hanya untuk keperluan penelitian dan tidak ditujukan untuk penggunaan terapeutik atau diagnostik pada manusia atau hewan. Produk dan konten dilindungi oleh paten, merek dagang, dan hak cipta milik
Aplikasi tertentu mungkin memerlukan hak kekayaan intelektual pihak ketiga tambahan.