Keterangan
Hifair™ Super Reverse Transcriptase adalah enzim reverse transcriptase generasi berikutnyaBahasa Indonesia: yang adalah eNdiolah dari M-MLV. Enzim ini tidak memiliki aktivitas RNase H dan menunjukkan stabilitas termal yang jauh lebih baik, mentoleransi suhu reaksi hingga 70°C. Enzim ini sangat cocok untuk transkripsi balik templat RNA yang efisien dengan struktur sekunder yang kompleks.
Aplikasi
Produk ini cocok untuk percobaan RT-PCR, RT-qPCR, RT-LAMP, RNA-seq, dan sintesis cDNA. Suhu reaksi transkripsi balik dapat mencapai hingga 70°C.
Definisi Satuan
Satu unit (U) aktivitas enzim didefinisikan sebagai jumlah enzim yang dibutuhkan untuk menggabungkan 1 nmol dTTP ke dalam bahan yang tidak larut dalam asam dalam waktu 10 menit pada suhu 37°C, menggunakan Poly(A).Oligo(dT) sebagai primer templat.
Komponen
| Komponen | Nama | 14612ES92 | 14612ES93 |
| 14612 | Hifair™ Transkriptase Terbalik Super (200 U/μL) | 50 mikroliter | 250 mikroliter |
Kondisi Penyimpanan
Simpan pada suhu -25˚C hingga -15˚C hingga 18 bulan.
Petunjuk Penggunaan
Prosedur Sintesis cDNA Untai Pertama
1. Denaturasi RNA (Langkah Opsional)
1. Denaturasi RNA membantu membuka struktur sekunder, secara signifikan meningkatkan hasil cDNA untai pertama.
| Komponen | Volume |
| ddH2O bebas RNase | sampai 13 μL |
| Oligo(dT)18 (50 μM) atau Primer Acak (50 μM) atau Primer Spesifik Gen (2 μM) | 1 mikroliter |
| Template RNA | Total RNA: 10 pg - 5 μg atau mRNA: 10 pg - 500 ng |
Bahasa Indonesia: Panaskan pada suhu 65°C selama 5 menit, lalu dinginkan dengan cepat di atas es selama 2 menit.
Bahasa Indonesia: Sentrifus sebentar untuk mengumpulkan cairan reaksi dan tambahkan campuran reaksi transkripsi balik seperti yang ditunjukkan di bawah ini.
2. Pengaturan Reaksi Transkripsi Terbalik (Sistem 20 μL)
| Komponen | Volume |
| Campuran reaksi dari langkah sebelumnya | 13 mikroliter |
| 5× Penyangga Reaksi | 4 mikroliter |
| Campuran dNTP (10 mM) | 1 mikroliter |
| Hifair® Super Transkriptase Terbalik (200 U/μL) | 1 mikroliter |
| Penghambat RNase (40 U/μL) | 1 mikroliter |
3. Pengaturan Program Transkripsi Terbalik
| Suhu | Waktu |
| 25 derajat celcius* | 5 menit |
| 50-70°C | 15-30 menit |
| 85°C** | 5 menit |
*Jika menggunakan Primer Acak, inkubasi pada suhu 25°C selama 5 menit. Jika menggunakan Oligo(dT)18 atau Primer Spesifik Gen, langkah ini dapat diabaikan.
Pemanasan 85°C selama 5 menit menonaktifkan transkriptase balik dan dapat disesuaikan sesuai kebutuhan.
Produk transkripsi balik dapat segera digunakan untuk reaksi PCR atau qPCR berikutnya, disimpan dalam jangka pendek pada suhu -20°C, atau untuk penyimpanan jangka panjang pada suhu -80°C setelah pembagian guna menghindari siklus beku-cair.
Tindakan pencegahan
1. Jaga kebersihan lingkungan laboratorium; kenakan sarung tangan dan masker yang bersih. Pastikan semua bahan habis pakai eksperimen bebas RNase untuk mencegah kontaminasi.
2. Lakukan semua operasi di atas es untuk mencegah degradasi RNA.
3. Gunakan sampel RNA berkualitas tinggi untuk memastikan transkripsi balik yang efisien.
4. Produk ini hanya untuk keperluan penelitian.
5. Demi keselamatan dan kesehatan Anda, kenakan jas lab dan sarung tangan sekali pakai saat menangani produk.
Dokumen:
Pembayaran & Keamanan
Informasi pembayaran Anda diproses dengan aman. Kami tidak menyimpan detail kartu kredit atau memiliki akses ke informasi kartu kredit Anda.
Pertanyaan
Anda mungkin juga menyukai
FAQ
Produk ini hanya untuk keperluan penelitian dan tidak ditujukan untuk penggunaan terapeutik atau diagnostik pada manusia atau hewan. Produk dan konten dilindungi oleh paten, merek dagang, dan hak cipta milik
Aplikasi tertentu mungkin memerlukan hak kekayaan intelektual pihak ketiga tambahan.