Itu Magnetik Sisa DNA Mencicipi Perlengkapan Persiapan adalah sesuai untuk itu praperawatan dari sisa DNA di dalam bermacam-macam biologis sampel. Ini dapat memaksimalkan pemisahan dan pemurnian sejumlah kecil DNA sisa sel inang dalam sampel dengan menggunakan manik-manik magnetik unik dan hati-hati sistem penyangga yang dioptimalkan.

Magnetik Kit Persiapan Sampel DNA Residu dapat digunakan dengan berbagai macam sisa DNA sel inang kit deteksi, termasuk Kit Deteksi Residu DNA Sel Host CHO (Cat#41301ES), Kit Deteksi Residu DNA Sel Inang HEK293 (Cat#41302ES), Kit Deteksi Residu DNA Sel Host Vero (Kat#41303ES), dan Kit Deteksi Residu DNA Sel Inang E.coli (Cat#41304ES).

Komponen Produk

Pengiriman dan Penyimpanan

1. Bagian I dikirim dengan paket es, 4°C selama 1 tahun atau -20°C untuk penyimpanan jangka panjang.

2. Bagian II dikirim pada suhu ruangan dan disimpan selama 1 tahun pada suhu ruangan.

3. Bagian III dikirim dengan es kering dan disimpan pada suhu -20°C selama 1 tahun.

4. Setelah menerima barang, harap periksa apakah ketiga komponen Bagian I, Bagian II, dan Bagian III sudah lengkap, dan segera simpan pada suhu penyimpanan yang sesuai.

Perhatian

1. Harap baca buku petunjuk dengan saksama sebelum digunakan, dan gunakan sesuai dengan buku petunjuk. Pemrosesan sampel direkomendasikan untuk dilakukan di bangku yang bersih atau lemari pengaman biologis.

2. Perhatikan apakah terjadi pengendapan atau kekeruhan pada larutan yang disimpan pada suhu ruangan (terutama saat suhu ruangan rendah seperti di musim dingin), Anda dapat mandi air pada suhu 37°C hingga larutan menjadi bening untuk menghindari mempengaruhi efek penggunaan.

3. Mungkin ada manik-manik magnetik sisa selama elusi, jadi cobalah untuk menghindari aspirasi manik-manik magnetik ketika mengambil sampel.

4. Harap ganti ujungnya secara berkala untuk menghindari kontaminasi silang saat mengoperasikan produk ini.

5. Demi keselamatan dan kesehatan Anda, harap kenakan alat pelindung diri (APD), seperti jas laboratorium dan sarung tangan sekali pakai, saat mengoperasikan produk ini.

6. Produk ini HANYA untuk keperluan penelitian!

Pra-Persiapan

1. Peralatan yang disediakan sendiri: pengocok pusaran, penangas air atau penangas logam, sentrifus, rak pemisah magnetik, ekstraktor asam nukleat otomatis Hangzhou Aosheng Auto-Pure32A atau merek lain ekstraktor asam nukleat otomatis penuh.

2. Bahan habis pakai yang disediakan sendiri: 10μL-1000μL ujung filter adsorpsi rendah, tabung sentrifus adsorpsi rendah 1,5 mL, tabung PCR atau pelat 96 sumur dan tutup tabung atau membran yang sesuai.

3. Reagen yang disiapkan sendiri: etanol absolut (tingkat analitis), buffer 1×PBS (pH 7,4, bebas ion Mg dan Ca), air ultramurni.

4. Untuk penggunaan pertama, tambahkan etanol anhidrat dengan volume yang tertera pada label atau dalam petunjuk pada botol Larutan Pencuci A* dan Larutan Pencuci B*, campurkan dengan seksama sebelum digunakan, dan tandai dengan baik. Tutup botol dengan rapat setelah digunakan untuk menjaga kadar etanol dalam botol.

Ekstraksi DNA sisa manual

1. Pengolahan sampel

1.1 Jika sampel mengandung kandungan DNA yang relatif tinggi, seperti vaksin, harap encerkan dalam proporsi yang tepat dengan 1×buffer PBS (pH 7.4, bebas ion Mg dan Ca) dan kemudian mengekstrak (pengenceran sampel adalah untuk membuat nilai deteksi berada dalam rentang linier kurva standar dan kemudian memastikan keakuratan deteksi. dan biasanya pengenceran 100 kali lipat dapat dipertimbangkan).

1.2 Jika sampel yang akan diuji adalah bubuk kering, encerkan hingga 10 mg/mL atau 100 mg/mL dengan air ultra murni sebelum digunakan.

1.3 Jika sampel memiliki matriks kompleks, percobaan penambahan dan pemulihan standar harus dilakukan untuk menentukan pengenceran yang tepat.

2. Tambahkan 100 μL sampel ke tabung 1,5 mL, lalu tambahkan 100 μL buffer lisis, 10 μL proteinase K, kocok, dan campur selama 10 detik.

[Catatan]: Tambahkan 10 μL proteinase K jika konsentrasi sampel protein adalah 0-100 mg/mL, dan tambahkan 20 μL proteinase K jika konsentrasi sampel protein adalah 100-200 mg/mL.

3. Inkubasi pada suhu 60°C selama 20 menit.

4. Kemudian tambahkan 400 mikroliter larutan pengikat, 9 μL glikogen, dan 6 μL garam kalium Poly A, lalu kocok dan aduk rata.

5. Tambahkan 20 μL manik-manik magnetik, aduk dan aduk rata, lalu diamkan selama 10 menit. Aduk dan aduk selama 10 detik. setiap 3 menit.

[Catatan]: Manik-manik magnet perlu diaduk sebelum digunakan untuk memastikan bahwa manik-manik magnet tersuspensi kembali secara menyeluruh. Setelah menambahkan sampel sebanyak 4-5 kali sekaligus, sebaiknya dicampur lagi.

Nomor telepon 7. Sentrifus sebentar untuk mendapatkan larutan, dan letakkan tabung sentrifus pada rak magnetik selama 1-2 menit. Setelah butiran magnetik terserap seluruhnya, keluarkan cairan dengan hati-hati.

8. Tambahkan 500 μL Larutan Pencuci A (harap periksa apakah etanol absolut telah ditambahkan sebelum digunakan), kocok atau putar untuk mencampur guna memastikan manik-manik magnetik tersebar dan tidak ada manik-manik magnetik yang terkumpul pada dinding tabung sentrifus.

9. Sentrifus sebentar, dan letakkan tabung sentrifus pada rak magnet selama 1-2 menit. Setelah butiran magnet terserap seluruhnya, keluarkan cairan dengan hati-hati.

10. Tambahkan 500 μL Larutan Pencuci B (harap periksa apakah etanol absolut telah ditambahkan sebelum digunakan), kocok atau pusaran untuk mencampur guna memastikan manik-manik magnetik tersebar dan tidak ada manik-manik magnetik yang terkumpul pada dinding tabung sentrifus.

11. Sentrifus sebentar, dan letakkan tabung sentrifus pada rak magnet selama 1-2 menit. Setelah butiran magnet terserap seluruhnya, keluarkan cairan dengan hati-hati.

12. Untuk memastikan cairan sisa dihilangkan sebanyak mungkin, sentrifus tabung selama 10 detik cepat, letakkan pada rak magnetik, dan gunakan pipet 10 μL untuk menyedot cairan sisa.

13. Buka tutup tabung dan biarkan pada suhu ruangan selama 3 menit hingga etanol menguap sepenuhnya. Tidak adanya pantulan atau retakan yang muncul pada permukaan manik-manik magnetik menunjukkan bahwa etanol telah menguap sepenuhnya.

14. Keluarkan tabung dari dudukan magnet, tambahkan 50-100 μL eluat yang telah dihangatkan sebelumnya pada suhu 65°C, kocok dan campur dengan baik. Kemudian sentrifus sebentar, inkubasi pada suhu 65°C selama 5 menit, kocok dan campur setiap 2-3 menit.

15. Sentrifus sebentar lagi, letakkan tabung sentrifus pada dudukan magnet selama 2 menit. Setelah manik-manik magnet terserap seluruhnya, pindahkan larutan DNA dengan hati-hati ke tabung sentrifus baru dan simpan pada suhu -20°C, atau pada suhu -80°C untuk penyimpanan jangka panjang.