Kit Substrat Chemiluminescent ECL yang Disempurnakan dirancang untuk mendeteksi antibodi dan antigen terkait yang secara langsung atau tidak langsung diberi label dengan horseradish peroxidase (HRP). Prinsip Kit Substrat Chemiluminescent ECL yang Disempurnakan adalah, protein atau asam nukleat dipindahkan ke membran yang dicetak setelah elektroforesis, dan protein target pada membran diikat oleh antibodi primer dan antibodi sekunder yang diberi label dengan HRP, atau asam nukleat pada membran diikat secara langsung atau tidak langsung oleh probe yang diberi label dengan HRP. Setelah mencuci membran, larutan kerja ECL yang disiapkan oleh produk digunakan untuk menginkubasi membran pada suhu ruangan selama beberapa menit. Membran yang dicetak dibungkus dengan plastik pembungkus dan dipasang pada Kaset paparan sinar-X. Kemudian film sinar-X ditekan pada membran di kamar gelap dan diekspos selama beberapa detik hingga beberapa jam. Setelah pengembangan dan fiksasi, pita protein atau asam nukleat dapat ditampilkan dengan jelas pada film sinar-X.

Kit ini memiliki sistem substrat luminescent yang unik, yang mengurangi latar belakang paparan sekaligus memperkenalkan oksidan baru yang sangat meningkatkan stabilitas kit, sehingga membuatnya stabil pada suhu ruangan hingga satu tahun. Selain sinar-X, pemindaian CCD fluorescent juga dapat langsung digunakan terutama untuk deteksi WB dan sistem deteksi imun chemiluminescence.

Fitur

Sensitivitas tinggi dan rasio sinyal terhadap derau tinggi, dapat mendeteksi antigen tingkat menengah.

Bersinar dengan cepat dan terang, pita film yang tercetak dapat diamati di bawah lampu fluoresens.

Sangat cocok untuk mendeteksi target yang kelimpahannya lebih tinggi, sampel protein konvensional.

Oksidan baru, stabil pada suhu ruangan hingga satu tahun.

Aplikasi

ELISA kemiluminesensi

Penyakit Western Blot

Titik Blot-DNA/RNA

Southern blot-DNA

Blot RNA Utara

Spesifikasi

Komponen

Pengiriman dan Penyimpanan

Produk dikirim dengan suhu ruangan dan dapat disimpan pada suhu ruangan selama satu tahun. Jika tidak digunakan dalam waktu lama, sebaiknya disimpan pada suhu 2℃~8℃ untuk memperpanjang masa berlaku.

Catatan: 36222-A harus disimpan jauh dari cahaya!

Instruksi (misalnya film sinar-X)

1.Elektroforesis rutin, membran transfer, antibodi berlabel HRP atau probe asam nukleat berlabel HRP, inkubasi dan membran pencucian.

Catatan: Larutan luminescent ECL adalah substrat warna HRP, jadi sistem deteksi harus didasarkan pada antibodi berlabel enzim HRP atau probe asam nukleat.

2.Pada saat yang sama saat mencuci membran untuk terakhir kalinya, larutan kerja luminescent disiapkan baru (100-200 μL larutan kerja luminescent/cm2 membran): ambil volume yang sama dari Reagen A dan B, aduk rata untuk digunakan kemudian.

Catatan: Ambil Reagen A dan Reagen B harus menggunakan ujung yang berbeda. Sebaiknya segera gunakan cairan kerja. Cairan tersebut masih dapat digunakan setelah beberapa jam pada suhu ruangan, tetapi sensitivitasnya sedikit berkurang.

3. Gunakan pinset pipih untuk mengeluarkan membran, taruh di atas kertas saring untuk meniriskan losion, jangan biarkan membran benar-benar kering. Benamkan membran sepenuhnya dalam larutan kerja luminescent, kontak yang cukup dengan cairan kerja luminescent. Inkubasi pada suhu ruangan selama 1-2 menit dan segera persiapkan untuk paparan tablet.

4. Ambil membran dengan pinset dan letakkan di atas kertas saring untuk mengalirkan cairan kerja berpendar. Namun, jangan bilas cairan berpendar.

5. Letakkan selembar plastik pembungkus yang lebih besar dari membran pada permukaan bagian dalam film obscura sinar-X. Tempelkan membran yang dicetak pada plastik pembungkus, lipat plastik pembungkus sepenuhnya di sekeliling membran yang dicetak, dan singkirkan gelembung gas dan lipat, dapat memotong tepi plastik pembungkus yang berlebih. Gunakan kertas saring untuk menyedot kelebihan cairan kerja bercahaya. Rekatkan plastik pembungkus yang menutupi membran yang dicetak pada obscura dengan selotip, dengan pita protein menghadap ke atas.

6.Sepotong film sinar-X diambil dari kamar gelap dan diletakkan pada membran yang dibungkus. Film ditekan dan diekspos selama 30 detik - 2 menit. Kemudian film tersebut dicetak dan difiksasi.

Catatan: Waktu pencahayaan harus disesuaikan dengan intensitas pencahayaan.Jika latar belakang terlalu tinggi, gunakan dua film sinar-X secara bersamaan.

Metode paparan lainnya

Jika menggunakan fotografi CCD: membran dapat ditempatkan dalam fluida kerja, setelah dinyalakan sesuai petunjuk penggunaan, lepaskan film, ambil foto. Selain itu, parameter pengukuran mesin dapat disesuaikan menurut situasi untuk meningkatkan rasio signal-to-noise.

Catatan

1. Gelembung harus dihindari selama pemindahan, penyegelan, dan inkubasi membran. Selain itu, mengenakan sarung tangan akan menghindari meninggalkan sidik jari pada membran dan menjaganya tetap bersih.

2. Paparan yang terlalu lama atau protein yang berlebihan akan memperdalam latar belakang dan membuat perubahan kekuatan pita kehilangan hubungan linier. Paparan yang kurang akan mengaburkan pita.

3. Beberapa plastik pembungkus dapat meredam fluoresensi saat membungkus membran yang dicetak. Plastik pembungkus yang dipilih harus berkualitas tinggi.

4. Hindari meletakkan beberapa membran dalam kotak membran pencucian yang sama, karena penyerapan atau gesekan timbal balik dapat menyebabkan latar belakang yang dalam.

5. Posisi dan ukuran pita pada film dapat ditentukan secara akurat menggunakan penanda protein pra-pewarnaan yang terlihat dan tag paparan autoradiografi fluoresensi.

6. Gunakan sistem biotin-avidin dan hindari penggunaan penutup susu, yang dapat menyebabkan latar belakang menjadi terlalu tinggi.

7. Partikel oksida logam dapat menyebabkan bintik-bintik granular pada membran. Hindari penggunaan gunting dan pinset berkarat. Gunakan pinset pipih plastik.

8. Natrium azida (NaN3) dapat menghambat aktivitas HRP, jika pemulihan probe atau antibodi berlabel HRP harus menghindari penggunaan NaN3, jika perlu, tidak lebih dari 0,01%.

9. Produk ini tidak memiliki toksisitas khusus, menurut perawatan kimia umum.

10. Harap kenakan APD yang diperlukan, seperti jas lab dan sarung tangan, untuk memastikan kesehatan dan keselamatan Anda.!

11. Hanya untuk keperluan penelitian!

Dokumen:

Lembar Data Keselamatan

Nomor Induk Kependudukan 36222-A-MSDS-CN20250110

Nomor Induk Perusahaan 36222-B-MSDS-CN20250110

Buku Panduan

36222_Manual_HB221212_ID

Kutipan & Referensi:

[1] He X, Li J, Zhou G, dkk. Pengatur ritme dan memori hipokampus melalui plastisitas sinaptik pada interneuron penghambat. Neuron. 2021;109(6):1013-1028.e9. doi:10.1016/j.neuron.2021.01.014(IF:17.173)

[2[Bahasa Indonesia] Wang X, Zhang S, Jin D, dkk. Agonis reseptor μ-opioid memfasilitasi pembentukan sel tumor yang bersirkulasi pada kanker kandung kemih melalui jalur MOR/AKT/Slug: studi komprehensif termasuk uji coba terkontrol acak.Komunitas Kanker (London). 2023;43(3):365-386. doi:10.1002/cac2.12408(IF:16.2)

[3[Bahasa Indonesia] Li Y, Zhou S, Song H, Yu T, Zheng X, Chu Q. Nanopartikel CaCO3 yang digabungkan dengan KAE untuk memungkinkan terapi kanker dengan kelebihan kalsium yang lebih besar. Biomaterial. 2021;277:121080. doi:10.1016/j.biomaterials.2021.121080(IF:12.479)

[4[Bahasa Indonesia] Xu Z, Xu J, Sun S, dkk. Mecheliolide memicu kematian sel imunogenik yang dimediasi ROS yang dipicu oleh ERS pada karsinoma hepatoseluler. Redox Biol. 2022;54:102351. doi:10.1016/j.redox.2022.102351(IF:11.799)

[5[Bahasa Indonesia] Cai Z, Zhang Y, Zhang W, dkk. Retensi arsenik dalam eritrosit dan eritrofagositosis berlebihan terkait dengan status selenium rendah akibat gangguan homeostasis redoks. Redox Biol. 2022;52:102321. doi:10.1016/j.redox.2022.102321(IF:11.799)

[6[Bahasa Indonesia] Kaushik AC, Wu Q, Lin L, dkk. Profil ncRNA eksosomal dari infeksi mikobakteri mengidentifikasi miRNA-185-5p sebagai biomarker baru untuk tuberkulosis. Brief Bioinform. 2021;22(6):bbab210. doi:10.1093/bib/bbab210(IF:11.622)

[7[Bahasa Indonesia] Hu P, Li H, Sun W, dkk. Gangguan lisosomal terkait kolesterol memicu kematian sel akibat keganasan hematologi: Analisis dinamis tentang efek sitotoksik LW-218. Acta Pharm Sin B. 2021;11(10):3178-3192. doi:10.1016/j.apsb.2021.02.004(IF:11.614)

[8[Bahasa Indonesia] Wang X, Ni J, You Y, dkk. Penginderaan LPS yang dimediasi SNX10 menyebabkan disfungsi barier usus melalui kaskade pensinyalan yang bergantung pada caspase-5. EMBO J. 2021;40(24):e108080. doi:10.15252/embj.2021108080(IF:11.598)

[9[Bahasa Indonesia] Jiang K, Chen H, Fang Y, dkk. ANGPTL1 eksosomal melemahkan metastasis hati kanker kolorektal dengan mengatur pola sekresi sel Kupffer dan menghambat kebocoran vaskular yang diinduksi MMP9. J Exp Clin Cancer Res. 2021;40(1):21. Diterbitkan 7 Januari 2021. doi:10.1186/s13046-020-01816-3(IF:11.161)

[1angka 0[Bahasa Indonesia] Zhang S, Yang Z, Bao W, dkk. SNX10 (sorting nexin 10) menghambat inisiasi dan perkembangan kanker kolorektal dengan mengendalikan degradasi autofagi SRC. Autophagy. 2020;16(4):735-749. doi:10.1080/15548627.2019.1632122(IF:11.059)

[11[Bahasa Indonesia] Liu L, Liang L, Yang C, Zhou Y, Chen Y. Vesikel ekstraseluler Fusobacterium nucleatum membahayakan penghalang usus melalui penargetan jalur kematian sel yang dimediasi RIPK1. Mikroba Usus. 2021;13(1):1-20. doi:10.1080/19490976.2021.1902718(IF:10.245)