Protein Alami A adalah protein permukaan dinding sel yang ditemukan di Staphylococcus aureus, mirip dengan protein G yang diisolasi dari marga G atau C Streptococcus, mengikat paling mamalia IgG oleh berinteraksi terutama dengan itu Sepakbola wilayah imunoglobulin (Ig), tetapi berbeda dalam spesifisitas pengikatannya. Protein ini dapat digunakan untuk pemisahan dan pemurnian berbagai antibodi (antibodi monoklonal dan antibodi poliklonal). Protein A dan Protein G berbeda dalam sifat pengikatannya terhadap subkelas imunoglobulin yang berbeda (lihat Lampiran 1 untuk rinciannya).
Produk ini menggunakan protein A yang dimodifikasi secara genetik, yang tidak hanya mempertahankan sifat afinitas Ig-nya, tetapi juga menghilangkan domain pengikatan non-utama dari protein alami itu sendiri untuk mengurangi pengikatan non-spesifik. SuRi rProtein A Agarose Resin, yang merupakan gel agarosa yang sangat berikatan silang sebagai matriks dan protein A rekombinan yang dimodifikasi dan tahan alkali sebagai ligan, memiliki stabilitas fisikokimia yang tinggi. Antibodi dengan kemurnian tinggi dapat diperoleh dari sampel asites, serum, dan media kultur melalui kromatografi afinitas satu langkah dengan produk ini, yang mudah digunakan dan digunakan secara luas.

Komponen

Spesifikasi

Pengiriman Dan Penyimpanan

Produk dikirim dengan bungkus es.   Dapat disimpan secara stabil pada suhu 2~8℃ selama 5 tahun.

Instruksi

1. Persiapan penyangga

Disarankan untuk melakukan hal-hal berikut: buffer disaring dengan membran filter 0,22 μm atau 0,45 μm sebelum digunakan. Buffer keseimbangan/ikatan/pencucian: 0,15 M NaCl, 20 mM Na2 HPO4, pH 7,0

Penyangga elusi: glisin 0,1 M, pH 3,0

Penyangga penetral: 1 MTris-HCl, pH 8.5

2. Persiapan sampel

Memastikan itu itu mencicipi larutan memiliki itu sesuai ionik kekuatan Dan Tingkat keasaman (pH) sebelum memuat itu kolom, salah satu oleh mengencerkan sampel serum, asites, atau larutan kultur sel dengan buffer pengikat/pencucian, atau dengan dialisis sampel dengan mengikat/mencuci buffer.

3. Pengepakan Kolom

Muat rProtein SuRi A Resin Agarosa ke dalam kolom kromatografi yang sesuai, berhati-hatilah agar tidak terjadi gelembung.

4. Pemurnian sampel

1) Keseimbangan: Kolom kromatografi adalah seimbang dengan mengikat Penyangga dari 5 waktu itu kolom volume, Jadi itu pengepakannya ada di sistem penyangga yang sama seperti protein target, dan berperan melindungi protein.

2) Mencicipi memuat: Itu mencicipi adalah sarat ke itu seimbang Protein A Agarosa Damar ke memastikan penuh kontak antara protein target dan resin, meningkatkan pemulihan laju protein target, dan kumpulkan limbahnya ke diuji.

3) Pencucian: Cuci dengan 10-15 kali lipat kolom volume dari pencucian Penyangga, menghapus itu kenajisan berprotein kecuali secara khusus diserap, kumpulkan larutan pencuci.

4) Elusi: Elusi dengan 5-10 kali kolom volume dari elusi Penyangga, mengumpulkan eluen, itu adalah, itu target berprotein komponen.

5) Pembersihan CIP Dan kelestarian: Umumnya menggunakan 0,1-0,5 M NaOH lebih besar dari 3CV, dan itu kontak waktu adalah 15 menit; Kemudian bilas dengan larutan penyeimbang 5CV sampai netral. Akhirnya, itu adalah seimbang dengan 20% etanol dari 5 kali kolom volume, Dan Kemudian tersimpan  di dalam 20%  etanol  dari itu  sama  volume  pada  4 derajat celcius  ke  mencegah  itu  sedang mengemas  dari  makhluk terkontaminasi oleh bakteri.

5. Deteksi SDS-PAGE

Itu sampel diperoleh di dalam itu pemurnian proses (termasuk asli sampel, tembusan komponen, pencucian Dan komponen elusi, dll.) dideteksi oleh SDS-PAGE untuk menentukan efek pemurnian.

Catatan

1. Jangan simpan produk tersebut dalam lemari es.
2. rProteinAAgarose Resin harus dibalik sepenuhnya beberapa kali sebelum digunakan, agar resin agarose tercampur merata.
3. Selama semua operasi, sampel perlu dioperasikan pada suhu 4°C atau di atas es.
4. Demi keselamatan dan kesehatan Anda, harap kenakan jas lab dan sarung tangan sekali pakai selama pengoperasian.
5. Hanya untuk keperluan penelitian.

Tabel terlampir 1 : Ringkasan kemampuan mengikatprotein f A dan G terhadap Ig dalam berbagai jenis

Protein SuRi Sebuah Agarosa Damar