UltraNuclease, juga dikenal sebagai endonuklease non-restriktif, nuklease spektrum luas, adalah endonuklease non-spesifik yang berasal dari Serratia Marcescen, yang menghidrolisis ikatan fosfodiester internal antara nukleotida apa pun dalam asam nukleat untuk menghasilkan oligonukleotida 5'-monofosfat dengan panjang 2-5 basa. Ia dapat mendegradasi DNA dan RNA dalam berbagai bentuk (untai ganda, untai tunggal, linier, sirkuler, asli atau terdenaturasi) dalam berbagai kondisi yang sangat luas (6 M Urea, 0,1 M Guanidine HCl, 0,4% Triton X-100, 0,1% SDS, 1 mM EDTA, 1 mM PMSF) dan secara luas digunakan untuk menghilangkan asam nukleat dari produk biologis. UltraNuclease juga dapat dihilangkan dengan metode yang sesuai selanjutnya.

Kit ini menggunakan prinsip uji imunosorben terkait enzim sandwich antibodi ganda (sandwich ELISA) untuk mendeteksi residu UltraNuclease yang terdenaturasi dan tidak terdenaturasi. Pertama, lapisi mikroplat dengan antibodi poliklonal kelinci anti-UltraNuclease untuk membentuk antibodi fase padat. Kedua, tambahkan standar UltraNuclease dan sampel uji ke mikroplat antibodi fase padat, lalu tambahkan antibodi poliklonal Anti-UltraNuclease berlabel biotin, dan terakhir, tambahkan streptavidin berlabel peroksidase lobak (SA-HRP) untuk membentuk kompleks antibodi + antigen + antibodi-Biotin + SA-HRP. Selanjutnya, substrat TMB ditambahkan ke kompleks untuk mengamati reaksi warna setelah mencuci kompleks. TMB diubah menjadi biru di bawah katalisis enzim HRP dan akhirnya diubah menjadi kuning di hadapan asam, dan corak warna berkorelasi positif dengan jumlah UltraNuclease dalam sampel.

Kisaran kuantifikasi deteksi kit ini adalah 0,047-3 ng/mL; batas deteksi yang lebih rendah adalah 23,5 pg/mL.

Fitur

• Sangat sensitif: Mendeteksi sedikitnya 23 pg/ml residu UltraNuclease dalam sampel biologis yang sedang diproses dan akhir.
• Memastikan akurasi: Residu UltraNuclease dapat dideteksi secara akurat dengan pemulihan 80%-110%.
• Spesifisitas: Bekerja sama dengan penggunaan Yeasen UltraNuclease dan dapat mendeteksi residu secara akurat.
• Stabil: Perbedaan antara lot ke lot rendah, properti kit tidak terpengaruh pada suhu 37℃ selama 6 hari.
• Pengumpulan sinyal yang mudah: Menggunakan sistem Biotin-Streptavidin, sinyal dapat diperbesar secara stabil.
• Kit lengkap: Semua komponen utama disediakan dalam kit, hemat biaya untuk digunakan.

Aplikasi

• Uji Residual UltraNuclease pada produk biologi

Spesifikasi

Komponen

Pengiriman dan Penyimpanan

Kit ELISA UltraNuclease dikirim dengan bungkus es dan dapat disimpan pada suhu 2°C ~8°C. Produk yang belum dibuka berlaku selama satu tahun. Setelah reagen dibuka, produk tersebut berlaku selama setengah tahun. Jangan pernah membekukan produk ini.

Penyimpanan reagen yang telah disiapkan:

1. Larutan pencuci yang diencerkan dan larutan pengenceran dapat disimpan pada suhu 2°C ~8°C selama 1 minggu

2. Standar 36701-C berbentuk cair dan disimpan pada suhu 2°C ~8°C selama 1 tahun

3. Antibodi deteksi yang telah disiapkan dan buffer stop dapat disimpan pada suhu 2°C ~8°C selama 1 bulan

Angka

• Demonstrasi Spesifisitas

Gambar 1. Spesifisitas kit ELISA UltraNuclease ditunjukkan pada gambar di atas.

8 sampel tiruan diestimasikan untuk reaksi non-spesifik dengan antibodi dalam kit. Tidak ada perbedaan signifikan antara 8 sampel dan sampel negatif. （*: Perbedaan signifikan dari sampel Negatif；NS: Tidak ada perbedaan signifikan dari sampel Negatif）

• Tampilan Presisi

A)

B)

Gambar 2. Ketepatan ELISA UCF.ME™ UltraNuclease diuji seperti di atas skema.

6 duplikat diuji pada setiap konsentrasi pada kurva standar, dan semua CV% lebih rendah dari 5% (Gambar 2A). 3 analis melakukan percobaan ELISA UCF.ME™ UltraNuclease dan CV% lebih rendah dari 15% (Gambar 2B).

• Validasi Akurasi

A)

B)

Gambar 3. Akurasi UCF.ME™ UltraNuclease ELISA adalah diuji sebagai skema berikut.

UltraNuclease dicampur dalam larutan lisis sel 5 μg/mL (HEK293, E.coli, CHO, dan Vero) secara terpisah dengan konsentrasi akhir yang dicampur sebesar 1,5 ng/mL. Akurasi dalam sampel sel yang berbeda menunjukkan hasil yang sangat baik dibandingkan vendor lain (Gambar 3A). UltraNuclease dicampur dalam sampel aktual (disediakan oleh klien) dan diencerkan sebanyak 2 kali lipat dari 3ng/mL menjadi 0,093ng/mL. Pemulihan spike semuanya antara 80%~110% (Gambar 3B).