Ekspresi rekombinan dalam Escherichia coli merupakan cara yang relatif sederhana dan hemat biaya untuk memproduksi beberapa protein dan DNA plasmid. Selama proses produksi produk menggunakan Escherichia coli, terdapat kemungkinan besar terjadinya kontaminasi protein sel inang (HCP) dari Escherichia coli, yang dapat mengurangi kemanjuran obat terapeutik dan menyebabkan toksisitas atau respons imun yang merugikan. Oleh karena itu, selama produksi dan pemurnian obat terapeutik untuk manusia atau hewan, kandungan pengotor ini perlu diminimalkan semaksimal mungkin.

ELISA merupakan metode yang sederhana, sangat sensitif, dan objektif untuk mendeteksi HCP. Kit ini menggunakan prinsip eksperimen double-antibody sandwich enzyme-linked immunoassay (ELISA) untuk mendeteksi jumlah residu E.coli HCP. Untuk mendeteksi residu E.coli HCP, tambahkan standar E.coli HCP dan sampel yang akan diuji ke label enzim yang telah dilapisi pelat antibodi anti-E.coli HCP (36712-A). Kemudian tambahkan antibodi deteksi E.coli HCP berlabel biotin yang diencerkan (36712-C), dan terakhir tambahkan Streptavidin-HRP (SA-HRP) (36712-D) untuk membentuk kompleks antibodi+antigen+antibodi ‐Biotin+ SA‐HRP. Setelah mencuci pelat, tambahkan larutan pengembang warna TMB (36712-G) untuk mengembangkan warna. TMB berubah dari tidak berwarna menjadi biru di bawah katalisis enzim HRP dan akhirnya berubah menjadi kuning di bawah aksi larutan penghenti (36712-H). Nuansa kuning berkorelasi positif dengan jumlah E.coli HCP yang terdeteksi dalam sampel. Kit ini dapat digunakan untuk mengoptimalkan proses pemurnian produk biologis, mengendalikan pengotor dalam proses antara, dan mendeteksi pelepasan produk akhir.

Komponen