Hieff Trans™ Reagen Transfeksi Liposomal Tanya Jawab Umum

(1) T: Dapatkah serum hadir ketika menyiapkan kompleks reagen transfeksi asam nukleat?

A: Keberadaan serum akan memengaruhi pembentukan liposom. Disarankan untuk menggunakan medium bebas serum (biasanya medium MEM) saat menyiapkan kompleks reagen transfeksi asam nukleat.

(2) T: Bisakah reagen transfeksi dibekukan?

A: Tidak. Reagen ini harus disimpan pada suhu 2-8 derajat Celcius, dan harus diperhatikan untuk menghindari membuka tutup berulang kali dalam jangka waktu lama, karena pembukaan tutup dalam jangka waktu lama akan menyebabkan oksidasi liposom dan memengaruhi efisiensi transfeksi.

(3) T: Apa saja yang harus saya perhatikan saat menggunakan Hieff Trans™ Liposome Nucleic Acid Transfection Reagent?

A: 1) Selama operasi transfeksi, lebih baik pertemuan sel mencapai 80%-95%, dan kepadatan pelapisan spesifik ditentukan sesuai dengan situasi sel;

2) Penggunaan DNA dengan kemurnian tinggi membantu memperoleh efisiensi transfeksi yang lebih tinggi;

3) DNA dan reagen transfeksi harus diencerkan dengan medium bebas serum saat menyiapkan kompleks transfeksi;

4) Antibiotik tidak dapat ditambahkan ke media selama transfeksi;

5) Konsentrasi DNA dan jumlah reagen liposom kationik harus dioptimalkan untuk penggunaan pertama untuk mendapatkan efisiensi transfeksi maksimum. Rasio DNA terhadap reagen transfeksi adalah Secara umum direkomendasikan sebesar 1:2-1:3.

(4) T: Apakah perlu dihentikan setelah transfeksi?

A: Tidak perlu. Kompleks liposom stabil selama 6 jam. Jika media sel tidak diganti sebelum transfeksi, untuk memastikan nutrisi yang dibutuhkan untuk pertumbuhan sel normal, perlu mengganti media baru setelah 4 hingga 6 jam. Namun, jika media telah diganti sebelum transfeksi, tidak perlu mengganti media setelah transfeksi liposom.

(5) T: Apa saja yang harus saya perhatikan jika ingin meningkatkan efisiensi transfeksi?

A: a: Kepadatan sel pada saat transfeksi adalah 90%-95%.

b: Selama transfeksi, gunakan media bebas serum MEM untuk pengenceran asam nukleat dan liposom.

c: Medium dapat diganti 4-6 jam setelah transfeksi.

(6) T: Bisakah ko-transfeksi DNA dan siRNA dilakukan? Bagaimana efeknya?

A: Transfeksi bersama dapat dilakukan, tetapi sebaiknya dilakukan secara terpisah, dan transfeksi DNA harus dilakukan 6 jam setelah siRNA. Jika dilakukan secara bersamaan, efisiensi transfeksi siRNA akan lebih buruk.

(7) T: Dapatkah reagen transfeksi digunakan untuk transfeksi pengemasan lentivirus?

A: Pengemasan lentivirus dimungkinkan, tetapi efisiensi pengemasan lentivirus tidak selalu terkait dengan efisiensi transfeksi, tetapi juga terkait dengan pemilihan plasmid pengemasan dan rasio antar-plasmid.

(8) T: Dapatkah Hieff Trans™ Liposom Nucleic Acid Transfection Reagent digunakan untuk transfeksi sel suspensi?

A: Reagen Transfeksi Asam Nukleat Liposom Hieff Trans™ dapat digunakan untuk transfeksi sel suspensi, lihat Protokol untuk detailnya. Selain itu, kami juga telah meluncurkan reagen transfeksi khusus untuk sel suspensi (Nomor Cat. 40805, Reagen transfeksi asam nukleat liposom untuk sel suspensi).

[1] Liu R, Yang J, Yao J, Zhao Z, He W, Su N, Zhang Z, Zhang C, Zhang Z, Cai H, Zhu L, Zhao Y, Quan S, Chen X, Yang Y. Kontrol optogenetik fungsi dan metabolisme RNA menggunakan protein pengikat RNA yang dapat dialihkan melalui cahaya. Nat Biotechnol. 3 Januari 2022. doi: 10.1038/s41587-021-01112-1. Diterbitkan dalam bentuk elektronik sebelum dicetak. PMID: 34980910. (IF:54.908)

[2] Zhou J, Chen P, Wang H, Liu H, Li Y, Zhang Y, Wu Y, Paek C, Sun Z, Lei J, Yin L. Varian Cas12a dirancang untuk efek off-target yang lebih rendah di seluruh genom melalui pengenalan PAM yang ketat. Mol Ther. 5 Januari 2022;30(1):244-255. doi: 10.1016/j.ymthe.2021.10.010. Terbit elektronik 20 Oktober 2021. PMID: 34687846; PMCID: PMC8753454. (IF:11.454)

[3] Chen S, Cao X, Zhang J, Wu W, Zhang B, Zhao F. circVAMP3 Mendorong Pemisahan Fase CAPRIN1 dan Menghambat Karsinoma Hepatoseluler dengan Menekan Translasi c-Myc. Adv Sci (Weinh).Maret 2022;9(8):e2103817. doi: 10.1002/advs.202103817. Epub 24 Januari 2022. PMID: 35072355; PMCID: PMC8922094. (IF:16.808)

[4] Zhang Y, Yu X, Sun R, Min J, Tang X, Lin Z, Xie S, Li X, Lu S, Tian Z, Gu C, Teng L, Yang Y. Faktor penyambungan arginin/serin-kaya 8 meningkatkan keganasan mieloma multipel dan lesi tulang melalui penyambungan alternatif CACYBP dan komunikasi seluler berbasis eksosom. Clin Transl Med. 2022 Feb;12(2):e684. doi: 10.1002/ctm2.684. PMID: 35184390. (IF:11.492)

[5] Tang X, Deng Z, Ding P, Qiang W, Lu Y, Gao S, Hu Y, Yang Y, Du J, Gu C. Protein baru yang dikodekan oleh circHNRNPU mendorong perkembangan multiple myeloma dengan mengatur lingkungan mikro sumsum tulang dan penyambungan alternatif. J Exp Clin Kanker Res. 2022 8 Maret;41(1):85. doi: 10.1186/s13046-022-02276-7. PMID: 35260179. (JIKA:11.161)

[6] Hua Z, Wei R, Guo M, Lin Z, Yu X, Li X, Gu C, Yang Y. YTHDF2 meningkatkan proliferasi sel mieloma multipel melalui sumbu STAT5A/MAP2K2/p-ERK. Onkogen. 2022 Maret;41(10):1482-1491. doi: 10.1038/s41388-022-02191-3. Terbit secara elektronik 24 Januari 2022. PMID: 35075244. (IF:9.867)

[7] Liang Y, Lu Q, Li W, Zhang D, Zhang F, Zou Q, Chen L, Tong Y, Liu M, Wang S, Li W, Ren X, Xu P, Yang Z, Dong S, Zhang B, Huang Y, Li D, Wang H, Yu W. Reaktivasi penekan tumor pada kanker payudara dengan peralihan penguat melalui jaringan NamiRNA. Nucleic Acids Res. 2021 Sep 7;49(15):8556-8572. doi: 10.1093/nar/gkab626. PMID: 34329471; PMCID: PMC8421228. (JIKA:16.9)

[8] Dai L, Dai Y, Han J, Huang Y, Wang L, Huang J, Zhou Z. Wawasan struktural tentang perekrutan kompleks BRCA1-BARD1 ke kromatin yang rusak. Mol Cell. 1 Juli 2021;81(13):2765-2777.e6. doi: 10.1016/j.molcel.2021.05.010. Terbit elektronik 7 Juni 2021. PMID: 34102105. (IF:17.97)

[9] Zhang K, Wang A, Zhong K, Qi S, Wei C, Shu X, Tu WY, Xu W, Xia C, Xiao Y, Chen A, Bai L, Zhang J, Luo B, Wang W, Shen C. Sumbu UBQLN2-HSP70 mengurangi agregat poli-Gly-Ala dan mengurangi cacat perilaku pada model hewan C9ORF72. Neuron. 16 Juni 2021;109(12):1949-1962.e6. doi: 10.1016/j.neuron.2021.04.023. Terbit elektronik 14 Mei 2021. PMID: 33991504. (IF:17.17)

[10] Liang Y, Lu Q, Li W, Zhang D, Zhang F, Zou Q, Chen L, Tong Y, Liu M, Wang S, Li W, Ren X, Xu P, Yang Z, Dong S, Zhang B, Huang Y, Li D, Wang H, Yu W. Reaktivasi penekan tumor pada kanker payudara dengan pengalihan penguat melalui jaringan NamiRNA. Nucleic Acids Res. 2021 Sep 7;49(15):8556-8572. doi: 10.1093/nar/gkab626. PMID: 34329471; PMCID: PMC8421228. (IF:16.9)

[11] Li T, Chen X, Qian Y, Shao J, Li X, Liu S, Zhu L, Zhao Y, Ye H, Yang Y. Perangkat optogenetik berbasis BRET sintetis untuk ekspresi transgen berdenyut yang memungkinkan homeostasis glukosa pada tikus. Nat Commun. 27 Januari 2021;12(1):615. doi: 10.1038/s41467-021-20913-1. PMID: 33504786; PMCID: PMC7840992. (IF:14.92)

[12] Pan Y, He X, Li C, Li Y, Li W, Zhang H, Wang Y, Zhou G, Yang J, Li J, Qu J, Wang H, Gao Z, Shen Y, Li T, Hu H, Ma H. Aktivitas neuronal merekrut sumbu CRTC1/CREB untuk mendorong autofagi yang bergantung pada transkripsi guna mempertahankan LTD fase akhir. Cell Rep. 2021 Jul 20;36(3):109398. doi: 10.1016/j.celrep.2021.109398. PMID: 34289350. (IF:9.42)

[13] Liu H, Xing R, Ou Z, Zhao J, Hong G, Zhao TJ, Han Y, Chen Y. Reseptor berpasangan protein-G GPR17 menghambat perkembangan glioma dengan meningkatkan produksi ROS yang dimediasi oleh kompleks represif polycomb 1. Cell Death Dis. 2021 12 Juni;12(6):610. doi: 10.1038/s41419-021-03897-0. PMID: 34120140; PMCID: PMC8197764. (IF:8.463)

[14] Fan Y, Wang J, Jin W, Sun Y, Xu Y, Wang Y, Liang X, Su D. CircNR3C2 meningkatkan efek penekan tumor yang dimediasi HRD1 melalui spons miR-513a-3p pada kanker payudara triple-negatif. Mol Cancer. 2 Februari 2021;20(1):25. doi: 10.1186/s12943-021-01321-x.PMID: 33530981; PMCID: PMC7851937. (IF:27.403)

[15] Gu C, Wang Y, Zhang L, Qiao L, Sun S, Shao M, Tang X, Ding P, Tang C, Cao Y, Zhou Y, Guo M, Wei R, Li N, Xiao Y, Duan J, Yang Y. AHSA1 merupakan target terapi yang menjanjikan untuk proliferasi sel dan resistensi terhadap inhibitor proteasom pada mieloma multipel. J Exp Clin Cancer Res. 6 Januari 2022;41(1):11. doi: 10.1186/s13046-021-02220-1. PMID: 34991674; PMCID: PMC8734095. (IF:11.161)

[16] Luo Q, Wu X, Zhao P, Nan Y, Chang W, Zhu X, Su D, Liu Z. OTUD1 Mengaktifkan Apoptosis yang Tidak Bergantung pada Kaspase dan Bergantung pada Kaspase dengan Mempromosikan Translokasi Nuklir AIF dan Degradasi MCL1. Adv Sci (Weinh). 8 Februari 2021;8(8):2002874. doi: 10.1002/advs.202002874. PMID: 33898171; PMCID: PMC8061361. (IF:15.84)

[17] Luo Q, Wu X, Nan Y, Chang W, Zhao P, Zhang Y, Su D, Liu Z. TRIM32/USP11 Menyeimbangkan Stabilitas ARID1A dan Status Onkogenik/Penekan Tumor pada Karsinoma Sel Skuamosa. Cell Rep. 7 Januari 2020;30(1):98-111.e5. doi: 10.1016/j.celrep.2019.12.017. PMID: 31914402. (IF:9.42)

[18] Sun X, Peng X, Cao Y, Zhou Y, Sun Y. ADNP mempromosikan diferensiasi saraf dengan memodulasi sinyal Wnt/β-catenin. Nat Komuni. 2020 12 Juni;11(1):2984. doi: 10.1038/s41467-020-16799-0. PMID: 32533114; PMCID: PMC7293280. (JIKA:14.911)

[19] Yang X, Wang H, Xie E, Tang B, Mu Q, Song Z, Chen J, Wang F, Min J. Pengkabelan ulang sinyal ERBB3 dan ERK menghasilkan resistensi terhadap penghambatan FGFR1 pada kanker gastrointestinal yang mengandung mutasi ERBB3-E928G. Protein Cell. 2020 Desember;11(12):915-920. doi: 10.1007/s13238-020-00749-z. PMID: 32632529; PMCID: PMC7719122. (IF:14.872)

[20] Chen, T., Chen, Y., Chen, H. dan kawan-kawan. Mesin nano DNA berjalan tanpa batas yang digerakkan oleh enzim ganda untuk pencitraan intraseluler mikroRNA yang diekspresikan rendah. Nano Res. 12, 1055–1060 (2019). https://doi.org/10.1007/s12274-019-2344-5 (JIKA:8.21)

[21] Zhang X, Qi Z, Yin H, Yang G. Interaksi antara p53 dan sinyal Ras mengendalikan resistensi cisplatin melalui regulasi apoptosis dan autofagi yang dimediasi oleh HDAC4 dan HIF-1α. Theranostics. 30 Januari 2019;9(4):1096-1114. doi: 10.7150/thno.29673. PMID: 30867818; PMCID: PMC6401400. (IF:8.12)

[22] Zou Y, Wang A, Shi M, Chen X, Liu R, Li T, Zhang C, Zhang Z, Zhu L, Ju Z, Loscalzo J, Yang Y, Zhao Y. Analisis bentang alam dan dinamika redoks dalam sel hidup dan in vivo menggunakan sensor fluoresensi berkode genetik. Nat Protoc. 2018 Okt;13(10):2362-2386. doi: 10.1038/s41596-018-0042-5. PMID: 30258175; PMCID: PMC6714056. (IF:13.49)

[23] Zhang K, Zhao X, Chen X, Wei Y, Du W, Wang Y, Liu L, Zhao W, Han Z, Kong D, Zhao Q, Guo Z, Han Z, Liu N, Ma F, Li Z. Peningkatan Efek Terapi Eksosom yang Berasal dari Sel Punca Mesenkimal dengan Hidrogel yang Dapat Disuntikkan untuk Pengobatan Iskemia Tungkai Belakang. Antarmuka Aplikasi ACS. 12 September 2018;10(36):30081-30091. doi: 10.1021/acsami.8b08449. Terbit elektronik 29 Agustus 2018. PMID: 30118197. (IF:8.09)

[24] Hao H, Hu S, Chen H, Bu D, Zhu L, Xu C, Chu F, Huo X, Tang Y, Sun X, Ding BS, Liu DP, Hu S, Wang M. Hilangnya CXCR7 Endotel Mengganggu Homeostasis Vaskular dan Remodelasi Jantung Setelah Infark Miokard: Implikasi untuk Penemuan Obat Kardiovaskular. Circulation. 28 Maret 2017;135(13):1253-1264. doi: 10.1161/CIRCULATIONAHA.116.023027. Terbit secara elektronik 2 Februari 2017. PMID: 28154007. (IF:18.881)