細胞培養は、医薬品開発から遺伝子治療まで、多くの研究用途の基礎となっています。しかし、適切なアプローチとツールがなければ、健全で増殖する培養を維持するのは困難です。熟練した科学者であっても、細胞培養の初心者であっても、プロセスの各ステップを最適化することで大きな違いが生まれます。このガイドでは、消化から汚染防止まで、細胞培養を成功させるための 5 つの重要なヒントを紹介します。
1. 細胞の消化を完璧にする
細胞消化は細胞培養実験において重要なステップであり、培養表面からの細胞の剥離と、継代培養およびその後の分析のための単一細胞懸濁液への分離を促進します。適切な消化酵素を選択すると、細胞分離効率が向上し、細胞損傷が軽減され、実験の円滑な進行が保証されます。お客様のニーズに最適な消化酵素を選択できるように、一般的に使用されるいくつかの酵素製品とその特性に関するガイドをまとめました。細胞の種類、実験要件、および下流のアプリケーションに基づいて、最も適切な製品を選択できます。
一般的な消化酵素
- トリプシン（細胞間タンパク質の加水分解に使用）
- 組み換えトリプシン（動物由来の汚染がなく、バイオ医薬品用途に適しています）
- コラーゲナーゼ（コラーゲン繊維を分解するのに使用され、組織の消化に最適）
- 複合トリプシン（細胞表面抗原をよりよく保存するアキュターゼなど）
- トリプシンの代替品（無血清細胞培養に最適な TrypLE™ など）
- ディスパーゼII（さまざまな組織や細胞を分離するため）。
それぞれの酵素には独自の用途と利点があり、適切な酵素を選択すると、実験の効率と結果の品質が大幅に向上します。
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製品名 |
猫番号 |
仕様 |
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PerfCel ™ l トリプシン-EDTA (0.25%)、フェノールレッドなし |
40123ES60 |
100mL |
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PerfCell ™トリプシン - EDTA 不使用 (0.25%)、フェノールレッド不使用 |
40124ES60 |
100mL |
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PerfCell ™トリプシン（0.25%）、フェノールレッド |
40126ES60 |
100mL |
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PerfCell ™トリプシン-EDTA (0.25%)、フェノールレッド |
40127ES60 |
100mL |
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トリプシン 1:250(粉末) |
40101ES25 |
25グラム |
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PerfCell ™組み換えトリプシン（粉末） |
40512ES10/60 |
10mg/100mg |
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20416ES60 |
100μg |
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PerfCel Tryzyme™ エクスプレス酵素 (1X)、フェノールレッド |
40134ES60 |
100mL |
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PerfCel Tryzyme™ エクスプレス酵素 (1X)、フェノールレッドなし |
40135ES60 |
100mL |
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ACCUTASE 細胞分離ソリューション |
40506ES60 |
100mL |
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ディスパーゼII |
40104ES60/80 |
100mg/1g |
2. 理想的な培養環境の創出
健全な培養は適切な環境から始まります。適切な環境には、適切な温度、pH、細胞の種類に最適な培地が含まれます。
無血清細胞培養は、生物学研究において、再現性、一貫性、倫理基準を保証する極めて重要な技術として登場しました。従来の細胞培養はウシ胎児血清 (FBS) に依存しており、実験結果にばらつきが生じ、動物由来の倫理的リスクが生じます。これらの課題に対処するため、多くの研究者が無血清培養培地を選択するようになっています。
免疫学的研究では、リンパ球培養 リンパ球は、免疫応答、ワクチン開発、がん免疫療法の分野で特に重要な役割を果たしています。免疫システムの中心的な構成要素であるリンパ球は、体外で増殖および活性化するために特定の培養条件を必要とします。
加えて、 オルガノイド培養 これは細胞培養技術におけるもう一つの重要な進歩を表しています。オルガノイドは、体外で人間の組織や臓器の機能をシミュレートできる3次元細胞構造であり、疾患モデリング、薬物スクリーニング、再生医療のための新しい研究プラットフォームを提供します。オルガノイドの3次元構造は、人間の臓器の複雑さと生理学的機能をよりよく再現し、臓器の発達、疾患のメカニズム、治療反応を研究するための重要なツールとなっています。
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製品名 |
猫番号 |
仕様 |
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CelCulSF™ 昆虫細胞培養培地（無血清） |
40140ES |
1000mL |
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CelCulSF™ 293 細胞培養培地（無血清） |
40141ES |
1000mL |
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CelCulSF™ リンパ球培養培地（無血清） |
40142ES |
1000mL |
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CelCulSF™ ハイブリドーマ細胞培養培地（無血清） |
40143ES |
1000mL |
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CelCulSF 間葉系幹細胞（ MSC ）培養培地（無血清） |
40144ES |
500mL |
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CelCulSF™ 接着細胞培養培地（血清低減） |
40145ES |
1000mL |
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Cebrary® 腸管オルガノイド増殖培地（マウス） |
41426ES60/76 |
100/500mL |
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Cebrary® 腸癌オルガノイド増殖培地（ヒト） |
41427ES50/60/76 |
50/100/500mL |
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Cebrary® 胃癌オルガノイド増殖培地（ヒト） |
41428ES50/60/76 |
50/100/500mL |
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Cebrary® 肝臓がんオルガノイド増殖培地（ヒト） |
41429ES50/60/76 |
50/100/500mL |
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Cebrary® 乳がんオルガノイド増殖培地（ヒト） |
41430ES50/60/76 |
50/100/500mL |
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Cebrary® 肺がんオルガノイド増殖培地（ヒト） |
41431ES50/60/76 |
50/100/500mL |
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Cebrary® 食道がんオルガノイド増殖培地（ヒト） |
41432ES50/60/76 |
50/100/500mL |
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Cebrary® 卵巣がんオルガノイド増殖培地（ヒト） |
41433ES50/60/76 |
50/100/500mL |
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Cebrary® 膵臓がんオルガノイド増殖培地（ヒト） |
41434ES50/60/76 |
50/100/500mL |
3. 高品質な遺伝子発現のための効率的なトランスフェクション
細胞トランスフェクションは、バイオメディカル研究において極めて重要な技術であり、遺伝子発現、サイレンシング、または機能研究のために細胞に外因性核酸（DNA、mRNA、siRNA、miRNA など）を導入することを可能にします。多様な細胞タイプと核酸があるため、実験を成功させるには適切なトランスフェクション試薬を選択することが不可欠です。
リポソーム、PEI、リン酸カルシウムベースの製剤などの化学トランスフェクション試薬は、それぞれ独自の利点を備えています。
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猫番号 |
製品名 |
核酸 |
応用 |
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40802ES |
DNA |
高性能リポソームトランスフェクション試薬 |
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40804ES |
左 |
レンチウイルス感染能力を強化します。 |
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40806ES |
siRNA、miRNA、ASO |
高いノックダウン効率を備えた siRNA および miRNA 固有のトランスフェクション試薬。 |
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40808ES |
DNA、siRNA、miRNA |
さまざまな細胞タイプで DNA および RNA トランスフェクションを実行でき、トランスフェクションが難しい細胞にも優れた効果を発揮する、アップグレードされたリポソームトランスフェクション試薬です。 |
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40809ES |
mRNA |
さまざまな細胞タイプで高いトランスフェクション効率を実現する mRNA 特異的トランスフェクション試薬。 |
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40815ES |
DNA |
タンパク質発現やウイルスパッケージング（粉末状）に幅広く適用可能。 |
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40816ES |
DNA |
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40820ES |
DNA |
ウイルスパッケージング専用のトランスフェクション試薬。AAVおよびLVウイルスパッケージングでより高い収量を達成できます。 |
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40821ES |
DNA |
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40823ES |
DNA |
最高のトランスフェクション効率。特に、浮遊培養での AAV の生産に適しており、より高い出力が得られます。 |
4. 長期使用のために細胞を凍結保存する
細胞凍結は、汚染の防止、実験の一貫性の維持、輸送の容易化、細胞バンクの確立などの目的のために、細胞を長期保存するための重要な技術です。凍結中の主なリスクには、氷結晶の形成と溶液の損傷があります。これらのリスクを軽減するには、緩やかな凍結と急速な解凍のプロトコルを採用することが不可欠です。氷結晶の形成と浸透圧ストレスを軽減するために、グリセロールやジメチルスルホキシド (DMSO) などの凍結保護剤が一般的に使用されます。
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製品名 |
猫番号 |
仕様 |
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哺乳類細胞保存凍結 |
40128ES50 |
5×10mL |
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哺乳類細胞保存凍結 |
40128ES60 |
100mL |
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昆虫細胞保存凍結 |
40129ES50 |
5×10mL |
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昆虫細胞保存凍結 |
40129ES60 |
100mL |
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無血清細胞凍結培地 |
40151ES |
50mL/100mL |
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無血清細胞凍結培地（DMSOフリー） |
40152ES |
100mL |
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無血清細胞凍結培地（幹細胞用） |
40153ES |
100mL |
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無血清細胞凍結培地（幹細胞用、DMSOフリー） |
40154ES |
100mL |
5.健全な培養のための汚染防止
細胞培養では汚染が頻繁に問題となり、結果の悪化や研究時間の無駄につながることがよくあります。効果的な予防と修復には、さまざまな種類の汚染を認識することが不可欠です。
一般的な細胞汚染物質
- 細菌
- 菌類
- マイコプラズマ
- 原生動物
- 黒い斑点
- ウイルス
- 異種間
予防策としては、抗生物質の使用、機器の定期的な消毒、無菌技術の順守、作業エリアの清潔さの維持などがあります。汚染が検出された場合は、まれなまたは貴重なものでない限り、影響を受けた培養物を廃棄することが一般的に推奨されます。そのような場合は、汚染物質を除去するための措置を講じる必要があります。バックアップ細胞株を確立するか、新しい培養物を入手することをお勧めします。状況によっては、特定の汚染物質をターゲットにした特殊な処理が細胞培養物の回復に役立つ場合があります。適切な衛生状態を維持し、機器を厳密に分離し、無菌環境を維持することは、汚染を防ぎ、細胞培養実験を成功させるために不可欠です。
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タイプ |
製品名 |
猫番号 |
仕様 |
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抗菌 |
ペニシリン-ストレプトマイシン（100 × ）、細胞培養に適した |
60162ES76 |
100mL |
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60230ES07/60 |
3.2/100グラム |
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ゲンタマイシン硫酸塩 |
60214ES03/08/25 |
1/5/25グラム |
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メトロニダゾール |
60223ES25/60 |
25/100mg |
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抗真菌 |
アンホテリシンB |
60238ES01/03 |
100mg/1g |
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ナイスタチン |
60219ES08 |
5グラム |
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60231ES03/08 |
1/5mg |
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マイコプラズマ検出 |
40601ES10/20 |
10/20 アッセイ |
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40612ES25/60 |
25/100 トン |
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マイコプラズマ除去 |
MycAway ™スプレー（そのまま使用可能） |
40605ES02/03/08 |
1/2/10 × 500mL |
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40607ES03/08 |
1/5mL |
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40608ES03/08 |
1/5mL |
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40609ES60 |
100mL |
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40610ES60 |
100mL |
結論
細胞培養プロセスを最適化することは、信頼性が高く再現性のある結果を生み出すために不可欠です。消化に適した酵素の選択から汚染の防止まで、ワークフローの各ステップが重要です。
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