PCR 結果の偽陽性の最も一般的な原因としての作業環境におけるエアロゾル汚染: アメリカの科学者 Lindahl による大腸菌と枯草菌におけるウラシル DNA グリコシラーゼ (UDG) の先駆的な発見、および dUTP を使用した UDG 酵素の使用による PCR 汚染防止システムの確立。

市販の UDG 酵素は、主に大腸菌および枯草菌由来の通常の UDG 酵素と、好冷性海洋細菌由来の熱不安定性 UDG 酵素の 2 種類から構成されています。通常の UDG 酵素は耐熱性が高く、95°C で 10 分間処理した後でも少量のウラシル-DNA グリコシラーゼ活性を保持し、dU を含むターゲット増幅産物の分解につながる可能性があります。さらに、分子酵素の組み換え発現に人工細菌株 (大腸菌など) を使用しているため、これらの酵素には一定量の宿主ゲノム DNA が残留しています。製造環境や人為的要因の影響と相まって、分子酵素製品は DNA 汚染の影響を非常に受けやすくなっています。病原体の検出中に、汚染 DNA が低濃度のターゲット核酸を覆い隠したり、一緒に検出されて結果の解釈に影響を及ぼしたりする可能性があります。

Yeasen UCF.ME ウラシル DNA グリコシラーゼ (UDG/UNG)、熱不安定性

説明

UCF.ME ウラシル DNA グリコシラーゼ (UDG/UNG)、熱不安定、1 U/μL (カタログ番号 14466ES) は、好冷性海洋細菌由来で、UCF.ME として知られる超低残留熱不安定 UDG 酵素です。この製品を使用すると、従来の UDG 酵素の不活性化後の残留活性が、室温で dU を含む増幅産物を分解するのを防ぐことができます。また、分子酵素に存在するバックグラウンド細菌が PCR 結果で偽陽性を引き起こすのを防ぎます。したがって、UCF.ME® 超低残留熱不安定 UDG 酵素の導入は、感染性病原体を正確に特定し、感染症や伝染病の臨床診断を支援するために不可欠です。

製品の利点

• UCF.ME の超低残留 - 大腸菌ゲノム DNA 残基 <0.1 コピー/U;
• ヌクレアーゼ残留が少ない - エキソヌクレアーゼ、切断酵素、または RNase が残留しません。
• 強力な消化能力 - 0.05 U/T で 105 コピー/T の dU-DNA 製品を消化できます。
• 優れた耐熱性 - 50°C 10 分、55°C 5 分、または 95°C 5 分のいずれの条件下でも完全に不活化されます。
• RT-qPCR 反応システムと互換性があり、高入力レベル (2U/20μL 反応システム) でも検出システムに影響を与えません。

（1）タンパク質純度≥95%