----きれいな背景、安定したバンドパターン、正確なサイズ
DNA マーカーは、異なる分子量の DNA フラグメントの組み合わせです。主な用途は、アガロース ゲル電気泳動でサンプル DNA と共移動して DNA 分子を分離することです。サンプル バンドのサイズと明るさを DNA マーカーのバンドと比較することで、溶液中のサンプル DNA の分子量と濃度を大まかに推定できます。YEASEN DNA マーカーは、100 bp から 15 kb までの分子量範囲をカバーし、ほとんどの実験のニーズを満たします。
製品の特徴
- 安定性が高く、室温で3〜6か月間保存できます。
- きれいな背景、安定したバンドパターン、正確なサイズ。
- 既知の濃度の参照バンドが含まれており、簡単に位置決めして半定量分析を行うことができます。
- 便利で迅速な直接電気泳動用のローディング バッファーが含まれています。
- サンプルロード用の 5× ローディング バッファーが付属しています。
電気泳動図
注意点
- 保管方法: 室温で 3 ～ 6 か月間安定して保管できます。長期間保管する場合は、4°C または -20°C で保管してください。
- DNA マーカーは、アガロース ゲル電気泳動における DNA バンドの分析に適していますが、ポリアクリルアミド ゲル電気泳動での使用は推奨されません。
- ゲル濃度と緩衝液の選択:
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アガロース濃度 |
有効分離範囲（bp） |
推奨バッファ |
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0.5% |
2,000～50,000人 |
1×TAE |
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0.8% |
800～10,000人 |
1×TAE |
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1.0% |
400～8,000人 |
1×TAE |
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1.2% |
300～7,000人 |
1×TAE |
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1.5% |
200～3,000人 |
1×TAE/0.5×TBE |
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2.0% |
100～2,000人 |
1×TAE/0.5×TBE |
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3.0% |
25～1,000人 |
0.5×TBE |
【注意】：大きな断片の場合は低濃度ゲルを選択し、電気泳動にはTAE緩衝液システムを使用してください。小さな断片の場合は高濃度ゲルを選択し、電気泳動にはTBE緩衝液システムを使用してください。
- 核酸染色の選択:
EB（エチジウムブロマイド）は、最大励起波長が302 nmの高感度蛍光染料で、アガロースゲルやポリアクリルアミドゲル中の核酸の観察に使用できます。EBは核酸中の塩基に挿入され、毒性があることが知られています。
YeaRed (Cat#10202ES76) と YeaGreen (Cat#10204ES76) は、細胞膜を貫通して細胞内に入り込むことができないユニークな油状分子構造を持つ新しい非毒性核酸染料で、揮発性や昇華性が低く、人間が吸入することがないため、実験者の安全が確保されています。また、Ames 試験の結果では、YeaRed と YeaGreen はゲル染色濃度で変異原性がなく、発がん性の高い EB の安全で非毒性の代替品であることが示されました。さらに、YeaRed は EB と同じスペクトル特性を持っているため、既存のイメージング システムを変更することなく EB を完全に置き換えることができます。
質疑応答
Q1: DNAマーカーの高分子バンドが引きずられてうまく分離しないのはなぜですか?
A1: 核酸色素がDNAマーカーと十分に結合していません。高分子バンドにはより多くの核酸色素が必要なため、色素が飽和していないと、高分子バンドは移動効果の影響を受けやすくなり、引きずられて分離不良になります。使用するDNAマーカーの量を減らすか（水で5倍に希釈してから8～10μLをロードできます）、核酸色素の濃度を上げることをお勧めします。
Q2: DNA にバンドがないか弱いバンドがあるのはなぜですか?
A2:
- DNA のロードが不十分な場合は、ロード量を増やします。
- DNA バンドがゲルから出てしまいました。
- DNA バンドは追跡染料によって隠されています。
- 核酸染料はゲルに添加されませんでした。
- アガロースゲルを長時間放置した場合は、すぐに準備して使用することをお勧めします。
Q3: DNA マーカー バンドが拡散するのはなぜですか?
A3:
- DNA が部分的に劣化しています。保管条件が高温すぎないか確認してください。
- 電気泳動中の電圧が低すぎるため、DNA バンドが拡散します。ゲルを 110V ～ 130 V で 45 分以上泳動することをお勧めします。
- アガロースゲルの濃度が適切ではありません。マニュアルの推奨ゲル濃度に従って準備してください。
- アガロースゲルの品質が悪いので、新しいものを準備することをお勧めします。
Q4: サンプル バンドのサイズが DNA マーカー バンドのサイズと異なるように見えるのはなぜですか?
A4:
- DNAの移動は、実際のサイズだけでなく、タンパク質との結合、イオン状態、DNA構造、ゲルなどの要因にも関係しています。核酸の電気泳動移動速度はDNA/染料の比率に関係しており、核酸染料の量が不十分な場合、移動速度の誤差が大きくなる可能性があります。
- サンプルに高濃度の塩イオンが含まれている場合も、重大な移動エラーが発生する可能性があります。
- ロードされたサンプルの量が DNA マーカー バンドの量と大幅に異なる場合、または容量が大幅に異なる場合も、大きな移動エラーが発生する可能性があります。
注文情報
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製品オリエンテーション |
製品名 |
製品番号 |
仕様 |
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DNAマーカー |
GoldBand DL2000 DNAマーカー |
10501ES60/80 |
100T/10×100T |
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GoldBand DL5000 DNAマーカー |
10504ES60/80 |
100T/10×100T |
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ゴールドバンド 100bp DNA ラダー |
10507ES60/80 |
100T/10×100T |
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ゴールドバンド 1 kb DNA ラダー |
10510ES60/80 |
100T/10×100T |