背景

トランスフェリン（TRF、Tf）としても知られるトランスフェリンは、消化管で吸収された鉄と赤血球の分解によって放出された鉄を運ぶ役割を担っています。トランスフェリンは、成熟した赤血球を生成するために、三価鉄複合体（Tf-Fe3+）の形で骨髄に入ります。トランスフェリンは主に血漿中に存在します。血漿中のトランスフェリンは、体のほとんどの組織に鉄を供給しますが、トランスフェリンが届かない領域では、これらの組織自体によって合成されたトランスフェリンが、その領域で鉄の移動を引き起こします。

図1. トランスフェリンの構造

ヒトトランスフェリンは主に肝臓で合成されます。これは、相同な N 末端と C 末端に位置する 2 つのローブからなる単鎖糖タンパク質です。ヒトトランスフェリンは 678 個のアミノ酸残基、等電点 5.9、分子量 76kD を含みます。トランスフェリンの各分子は 2 つの三価鉄イオン (Fe ³⁺ ) を運ぶことができます。トランスフェリンと Fe ³⁺の相互作用は pH に依存します。pH 7.4 では、トランスフェリンと Fe3+ は効率的に結合し、酸性 pH では 2 つが分離します。

存在

ホロトランスフェリン、部分飽和トランスフェリン、アポトランスフェリン

機能メカニズム

トランスフェリン（Tf）は、その受容体であるトランスフェリン受容体1（TfR1）と相互作用して鉄と結合します。TfR1は細胞表面に発現する糖タンパク質で、ジスルフィド結合でつながった2つのホモ二量体サブユニットで構成されています。細胞表面で、TfはFe3+と相互作用してホロTfを形成し、TfR1受容体に結合してエンドサイトーシスによりエンドソームに入ります。酸性エンドソーム環境では、Fe3+はTfから分離し、STEAP3はFe3+をFe2+に還元し、これは二価金属イオントランスポーター1（DMT1）によって細胞質に輸送されます。その後、Fe3+を放出したTfはTfR1とTf/TfR1複合体を形成し、エキソサイトーシスにより細胞表面に戻ります。細胞表面では、トランスフェリン（Tf）が受容体TfR1から分離してアポTfになり、その後Fe3+と再結合して鉄サイクルに参加します。プロセス全体が完了すると、TfとTfR1はリサイクルされ、細胞の鉄摂取の次のサイクルに入ります。

図2.トランスフェリンサイクルのメカニズム図^[1]

トランスフェリンの主な機能

1. フリーラジカルの発生を防ぎ、細胞の成長を保護します。
2. 抗菌、殺菌、解毒
3. 細胞の増殖と成長を維持する
4. 細胞外鉄の貯蔵と輸送を促進する

トランスフェリンの供給源

製品の特徴

優れた安全性:製品は複数段階の品質検査とテストに合格しており、病原体による汚染を回避しています。

低毒性:細胞毒性は非常に低く、その後の実験に影響を与えません。

安定したパフォーマンス:各バッチは同じ細胞株から発現され、パフォーマンスの違いは最小限で、タンパク質の純度は高い

操作は簡単:製品をベースに追加するだけです。

幅広い適用性：さまざまな種類の細胞の培養に使用できます。

よくある質問

Q1: 抽出トランスフェリンまたは組み換えトランスフェリンを無血清培養培地に添加する必要がありますか?

A: 抽出トランスフェリンは安全性が低い、ロット間の差が大きいなどの欠点があります。特に、抽出トランスフェリンを細胞培養用の無血清培地に添加すると、ヒトや動物の病原体（狂牛病ウイルス、クロイツフェルト・ヤコブウイルス、その他の未知の病原体など）を細胞内に持ち込み、細胞を汚染する可能性があります。組み換えトランスフェリンは病原体汚染の可能性を完全に回避するため、組み換えトランスフェリンは無血清培地に添加する必要があります。

Q2: 鉄飽和（ホロ）トランスフェリンまたはアポ（アポ）トランスフェリンを培地に添加する必要がありますか?

A: 培地に鉄が含まれていない、または鉄含有量が低い場合は、鉄飽和（ホロ）トランスフェリンを追加します。培地に鉄が豊富に含まれている場合は、アポトランスフェリンを選択します。

Q3: 鉄飽和（ホロ）トランスフェリンとアポ（アポ）トランスフェリンのどちらが良いですか？

A: 両者の効果を理論的に推測することは不可能であり、実験による検証が必要です。

Q4: 無血清培地中のトランスフェリン濃度はどれくらいですか？

回答: トランスフェリンの濃度は細胞の種類に関係します。特定の濃度は細胞の状態、細胞濃度、実験目的に関係します。一般的な初代細胞: 5-100 mg/L、チャイニーズハムスター卵巣細胞: 10-50 mg/L、ハイブリドーマおよび Vero 細胞: 5-20 mg/L

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