De oprichting van azoxymethaan (AOM) en dextran sulfaat natrium (DSS, colitis graad) geïnduceerd colitis-geassocieerd kankermodel

Colitis-geassocieerde kanker (CAC) is de derde meest voorkomende kwaadaardige tumor ter wereld, met morbiditeit en mortaliteit op de tweede plaats na maag- en leverkanker.[1], Inflammatory Bowel Disease (IBD) kan de kans op het ontwikkelen van colorectale kanker vergroten. De combinatie van AOM en DSS heeft aan populariteit gewonnen vanwege de reproduceerbaarheid, potentie, lage kosten en het gebruiksgemak. Dit artikel belicht een protocol voor het maken van een DSS-AOM-model om de oncogenese van CAC's te bestuderen.

Diermodel

BALB/c-muizen (7 weken oud, mannelijk)

Materiaal

DSS-(Yeasen#60316ES,MW36000-50000)、AOM（Yeasen#60751ES)

Oplossing voorbereiding

Drinkwater aangevuld met DSS: Gebruik steriel water om een ​​1-3% DSS-oplossing te bereiden. Bewaar bij 4 °C tot gebruik.

AOM-oplossing: Los AOM op in WFI om een ​​voorraadoplossing van 10 mg/ml te verkrijgen. Aliquoteer en invriezen bij -20 °C. Vermijd herhaalde vries-dooicycli. Op de dag van gebruik, Ontdooi een aliquot en verdun het tot 1/10 met steriele zoutoplossing.

Protocol

  • Weeg en markeer de muizen op dag 1. Injecteer de muizen intraperitoneaal met 10 mg/kg AOM-oplossing.
  • Vul de drinkwatervoorziening van de muizenkooien met water. Bereken 7-10 ml water per muis per dag. Voer gedurende één week.
  • Vervang drinkwater gedurende één week met 2,5% DSS;
  • Geef het twee weken lang regelmatig drinkwater;
  • Herhaal stap 3-4 3 keer.

Figuur 1. AOM/DSS-modelleringsprotocol voor colorectale kanker

Resultaten van een succesvol CAC-model

Gewichtsverlies met DSS-behandeling

Figuur 2. De verandering in lichaamsgewicht van muizen

2、Diarreescore en Bloedingsscore

Figuur 3. Diarree score en Bloedingsscore

3、Tumorvorming in de dikke darm van muizen

Figuur 4. De representatieve gehele dikke darm en het aantal dikkedarmkankers

Figuur 5. De eiwitexpressie van COX-2, IL-6, β-catenine en slak in acute colitis en azoxymethaan (AOM)/DSS-geïnduceerde colorectale kanker muismodellen (A) Colonsecties werden gekleurd met H&E en de aangegeven antilichamen (B) De eiwitexpressie werd onderzocht door Western blot met de aangegeven antilichamen na het lyseren van colonweefsels van twee muizen uit elke groep, en β-tubuline werd gebruikt als laadcontrole[2].

Links naar deze bron

[1]Qun Wang, et al.Saffloerpolysaccharide remt AOM/DSS-geïnduceerde muizen colorectale kanker door regulatie van macrofaagpolarisatie[J].Frontiers in Pharmacology.2021.761641

[2]Jia-Rong Huang, et al. Piperlongumine verlicht muizen Colitis en colitis-geassocieerde Colorectaal Kanker[J].Frontiers in Pharmacology.2020.586885

Succesvol geval voor modelleren met Yeasen DSS

Yeasen biedt hoogwaardige DSS (Cat.nr. 60316ES): zuiverheid (98%), zwavelgehalte 17-19%, vrije zwavel <0,2%, ondersteund door een groot aantal literatuurgegevens.

Tabel 1 Constructie van verschillende soorten enteritismodellen met DSS

Model

Modelleren van monsters

Modelleringsplan

Modelleringsresultaten

Gebruik evaluatie

acute colitis

BALB/c-muizen, vrouwelijk, 6-8 weken, 25 g

3%-5% DSS drinkt gedurende 7 opeenvolgende dagen vrij

Dag 5 verscheen, de lengte van de dikke darm was verkort, HE-kleuring en de ontsteking was duidelijk

de vormsnelheid is snel en de tijd is kort. Consistent met de kenmerken van het acute colitis model

C57BL/6 muizen, mannelijk, 8 weken, 20 g

3%-5% DSS via sondevoeding, continue toediening

Dag 5 treedt op, verkorting van de dikke darm, gewichtsverlies, bloed in de ontlasting, diarree

Hoge schimmelgraad en korte duur. Consistent met de kenmerken van het acute colitismodel

chronische colitis

C57BL/6 muis, mannelijk, 8 weken, 22 g

1-2% DSS via sondevoeding, continue toediening

Dag 40 verschijnt, verkorting van de dikke darm, gewichtsverlies, bloed in de ontlasting, diarree

Hoge vormsnelheid. Consistent met de kenmerken van het chronische colitismodel

dikke darmkanker

C57BL/6 muis, mannelijk, 8 weken, 21 g

1%-2% DSS ad libitum gedurende 5 dagen gedurende 3 weken

14 weken met verkorte colonlengte, gewichtsverlies, HE-kleuring en duidelijke ontsteking

Hoge vormsnelheid. Consistent met kenmerken van het colonkankermodel

Pproduct bestelling

Een goed verkopend product kost slechts 1/3 van de prijs M* met dezelfde efficiëntie, en we houden een grote voorraad aan.

Pproduct Nik ben

Aartikel Nomber

Specificatie

Dextransulfaat natriumzout (DSS), colitis klasse MW: 36000~50000

60316ES25/60/76/80

25 gram/100 gram/500 gram/1 kg

Azoxymethaan (AOM)

60751ES03/08/10

1mg/5mg/10mg

MolPuur® Ontlasting DNA Kit

18820ES08/50/70

5 ton/50 T/200 T

MolPuur® Mag48 Bodem/ontlasting DNA Kit FA

18528ES48

48T

MolPuur®Mag Bodem/ontlasting DNA Kit

18526ES20/50/70

20 T/50 T/200 T

Hematoxyline en eosine kleuringskit

60524ES60

2×100 ml

Urine Fecale Occult Bloed Test Kit

60403ES60

100T

Alcian Blue Periodic Acid-Schiff (AB-PAS) kleuringsoplossing

60534ES50/60

6×50 ml/6×100 ml/

Pgepubliceerde artikelen met onze reagentia

  1. Zhong D, Jin K, Wang R, et al. Microalgen-gebaseerde hydrogel voor inflammatoire darmziekte en de bijbehorende angst en depressie. Adv Mater. 2024 26 jan:e2312275. doi: 10.1002/adma.202312275. ALS=29,4
  2. Zhang Y, Tu S, Ji X, Wu J, Meng J, Gao J, Shao X, Shi S, Wang G, Qiu J, Zhang Z, Hua C, Zhang Z, Chen S, Zhang L, Zhu SJ. Dubosiella newyorkensis moduleert immuuntolerantie bij colitis via het L-lysine-geactiveerde AhR-IDO1-Kyn-pad. Nat Commun. 2024 13 feb;15(1):1333. doi: 10.1038/s41467-024-45636-x.ALS= 16,6
  3. Li Zhao, Fei Wang, Zhengwei Cai, et al. Verbetering van het platform voor medicijngebruik met injecteerbare mucoadhesieve hydrogel voor de behandeling van colitis ulcerosa[J].chemical engineering journal.424(2021)130464.ALS=16.744
  4. Lingjun Tong, Haining Hao, Zhe Zhang, et al. Van melk afkomstige extracellulaire blaasjes verlichten colitis ulcerosa door de darmimmuniteit te reguleren en de darmmicrobiota opnieuw vorm te geven [J]. Theranostics. 2021; 11(17): 8570-8586 ALS=11.556
  5. Li, Y., Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fan, S. Gut commensal derived-valeriaanzuur beschermt tegen stralingsschade. Gut Microbes,.2020 .1–18.ALS=10.245
  6. Jingjing Gan, Yuxiao Liu, Lingyu Sun, et al. Oraal toegediende nucleotide-afgiftedeeltjes uit microfluïdica voor de behandeling van inflammatoire darmziekten [J]. Applied Materials Today. 2021 Dec; 25:101231 ALS=10.041
  7. Mengmeng Xu, Ying Kong, Nannan Chen, et al. Identificatie van immuungerelateerde gensignatuur en voorspelling van CeRNA-netwerk bij actieve colitis ulcerosa [J]. Frontiers in Immunology. 2022; 13: 855645.ALS=7.561
  8. JialiDong, YuanLi, HuiwenXiao, et al. Orale microbiota beïnvloedt de werkzaamheid en prognose van radiotherapie voor colorectale kanker in muismodellen [J]. Celrapporten. 2021, 109886.ALS=9.423
  9. Hoi H,  Zhang X,  Tong Ik,  Liu Q,et al.Lactobacillus plantarumEffect van extracellulaire blaasjes afkomstig van Vraag 7 over darmflora en colitis ulcerosa bij muizen[J].Frontiers in Immunology.2021.777147 .ALS=7.561
  10. Yaohua Fan, Yanqun Fan, Kunfeng Liu, et al. Eetbaar vogelnest verbetert door dextransulfaatnatrium geïnduceerde colitis ulcerosa bij C57BL/6J-muizen door het herstellen van de Th17/Treg-celbalans[J].Frontiers in Pharmacology.2021.632602.ALS=7.561
  11. Jia-Rong Huang, Sheng-Te Wang, Meng-Ning Wei, et al. Piperlongumine verlicht colitis bij muizen en colitis-geassocieerde colorectale kanker [J]. Frontiers in Pharmacology.2020.586885.ALS=7.561
  12. Gao X, Fan W, Tan L, et al. Soja-isoflavonen verbeteren experimentele colitis door te richten op ERα/NLRP3-inflammasome-paden[J]. The Journal of Nutritional Biochemistry, 2020, 83.ALS=6.048
  13. Lujuan Xing, Lijuan Fu, Songmin Cao, et al. Het ontstekingsremmende effect van uit runderbotten afkomstige gelatinepeptiden bij LPS-geïnduceerde RAW264.7 Macrofagencellen en door dextransulfaatnatrium geïnduceerde C57BL/6-muizen[J]. Nutrients 2022, 14, 1479. ALS=5.717
  14. Wang S,  Huang J,  Bruinen KS, et al. Isosteviolnatrium verbetert door dextrannatriumsulfaat veroorzaakte chronische colitis door regulering van metabole profilering, macrofaagpolarisatie en NF-B-route[J]. Oxidatieve geneeskunde en cellulaire levensduur. 2022,4636618. ALS=5.076

Inquiry