Macrofagen spelen unieke en cruciale rollen in verschillende delen van het lichaam, maar nauwkeurige verwijdering van macrofagen is een belangrijk onderzoeksinstrument geworden om de specifieke functies van macrofagen in specifieke gebieden en hun impact op de ontwikkeling van ziekten beter te bestuderen. Clodronate Liposomen zijn een van de meest bewezen, kosteneffectieve en ideale hulpmiddelen voor het verwijderen van macrofagen. Clodronate Liposomen kunnen intraperitoneaal, in de staartader en op verschillende andere manieren worden toegediend om macrofagen uit verschillende weefsels te verwijderen.

Hieronder delen we een reeks onderwerpen om de methoden en effectiviteit van het verwijderen van macrofagen op verschillende locaties te demonstreren. We hopen hiermee nuttige referenties en naslagwerken voor onderzoekers te bieden.

Introductie van injectiemethoden

Injectie in de staartader

De maximale uitputting wordt bereikt na 24 uur bij injectie in de staartader. Er moet aandacht worden besteed aan het tijdstip van detectie.

1. Plaats de muizen in een omgekeerde lunchbox, trek de staart uit de opening, er zijn twee slagaders en drie aderen in de staart van de muizen, twee slagaders bevinden zich aan de dorsale en ventrale zijde van de staart, en de drie aderen zijn verdeeld in een zigzagpatroon, over het algemeen worden de linker- en rechterkant van de aderen gebruikt;

2. Week het gaas in ongeveer 70℃ warm water (of week het in alcohol), haal het eruit en wikkel het om de staart, om het doel van vasodilatatie van de staart te bereiken en de opperhuidkeratine te verzachten;

3. Voor intraveneuze injectie in de staart, met de linkerduim en wijsvinger voor en na het vasthouden van de staart van de rat, waarbij een sectie van ongeveer 2 cm wordt overgelaten, zodat de huid gespannen is, de aderen voller zijn, de rechterhand een 1 ml naaldspuit vasthoudt, zodat de naald en de ader parallel zijn (minder dan 30° hoek), van het onderste 1/4 van de staart in de naald, moet het begin van de injectie van het medicijn langzaam zijn, zorgvuldige observatie, als er geen weerstand is, geen witte dermatomen verschenen, betekent dit dat de bloedvaten zijn doorboord en kan formele injectie van medicijnen.

4、Sommige experimenten vereisen herhaalde injecties in de staartader gedurende meerdere dagen, de injectieplaats moet zo ver mogelijk beginnen bij het uiteinde van de staart en in volgorde naar de staartwortel gaan, en de vasculaire positie voor injectie veranderen. Na het verwijderen van de naald, druk de injectieplaats met een wattenbolletje gedurende 1 - 2 min om het bloeden te stoppen.

Intraperitoneale injectie

Intraperitoneale injectie bereikt maximale uitputting na 48 - 72 uur. Er moet aandacht worden besteed aan het detecteren van tijdstippen.

1. Gebruik eerst de dorsale vangmethode om de muizen te vangen, zodat hun hoofd lichtjes naar achteren is gekanteld en hun buik omhoog is, de linkerachterpoot van de muis wordt met de pink vastgezet en vervolgens wordt de injectieplaats gesteriliseerd met een wattenbolletje met 75% alcohol.

2. De locatie van de intraperitoneale injectie bij muizen is 0,5 cm aan beide zijden van de middellijn van de onderbuik (gelijk met de wortel van de dij). Om letsel aan de organen te voorkomen, moet de kop van de muis naar achteren worden gekanteld bij het vangen van de muis, zodat de organen van de onderbuik omhoog bewegen.

3. Prik de naald van de spuit in de huid, ga het onderhuidse gebied in en duw de naald 2 seconden lang naar voren langs het onderhuidse gebied. - 3 mm, en prik vervolgens in de buikholte van de muis onder een hoek van 45 graden tussen de naald en de huid. Let op: Na het penetreren van het peritoneum verdwijnt de weerstand van de naaldpunt.

4. Trek de naaldplug terug. Als er geen bloed of vloeistof meer terugkomt, kan het medicijn worden geïnjecteerd.

5. Draai na de injectie de naald voorzichtig rond en trek de spuit er vervolgens langzaam uit om lekkage van vloeistof te voorkomen.

Er zullen ook verschillende injectiemethoden zijn voor verschillende onderzoekslocaties, zoals: subcutane injectie, tracheale toediening, intracraniële injectie enzovoort. U dient de relevante literatuur te raadplegen en te overleggen met Yeasen technisch team voordat er werd geëxperimenteerd.

Doseercyclus en dosering

Kortdurende toediening: een enkele injectie van 200 µL chlorofosfaatliposomen (20 - 25 g gewicht) op een specifiek tijdstip om de efficiëntie van het opruimen van macrofagen te bepalen of voor vervolgexperimenten.

Langdurige toediening: meer dan een week of langer is nodig om macrofaagklaring te bereiken. Bij WT-muizen bijvoorbeeld 200 µL (20 - 25 g gewicht) wordt meestal als eerste dosis gegeven, gevolgd door 200 µL elke 2 - 3 dagen.

Referentie testprotocol

Orgaan/Macrofaag

Dosering (20-25g/muis)

Milt/Rode pulpa macrofagen

Enkele dosis: 200 µL/muis (IV of IP).
Langdurige uitputting: eerste dosis van 200 µL/muis, daarna 200 µL/muis met tussenpozen van 2 - 3 dagen

Lever-/Kuffercellen

Enkele dosis: 200 µL/muis (IV of IP).
Langdurige uitputting: eerste dosis van 200 µL/muis, daarna 200 µL/muis met tussenpozen van 2 - 3 dagen

Long-/alveolaire macrofagen

IV (150-200 µL) gecombineerd met intratracheale of intranasale toediening (50 µL) geeft de beste resultaten.

lymfeklier

Injectie (100-200 µL)/muis; specifieke doseringsschema's zijn in de literatuur te vinden.

Hersenen/microglia

Intracerebroventriculaire toegang tot cerebrospinaal vocht, 10 µL/muis, 50 µL/rat.

Bloed/Monocyten

150-200 µL/muis (IV), Maximale uitputtingssnelheid wordt binnen 24 uur bereikt, maar maximale uitputtingssnelheid na 1 - 7 dagen is afhankelijk van de stam.

Let op: het bovenstaande is alleen ter referentie, raadpleeg de relevante literatuur en neem contact op met Yeasen technisch team vóór het experimenteren.

Productaanbeveling

Productnaam

Artikelnummer

Specificatie

Clodronaatliposomen (van de Vrije Universiteit Amsterdam)

40337ES08

5 ml

40337ES10

10 ml

Controle Liposomen (PBS)

40338ES08

5 ml

40338ES10

10 ml

Inquiry